DEPTOR-mTOR信号通路介导的自噬在多发性骨髓瘤中对破骨细胞分化的调控作用

目的探讨沉默RPMI-8226 DEPTOR基因表达在非接触式共培养体系下,对破骨细胞分化因子(RANKL)蛋白表达及THP-1细胞向破骨样分化的作用,并研究其可能机制。方法构建DEPTOR sh RNA重组慢病毒载体转染RPMI-8226细胞。通过Western blot技术从蛋白水平检测RPMI-8226细胞中DEPTOR及RANKL的表达,Western blot检测自噬相关蛋白LC-3和Atg5表达。构建共培养体系,分三组:THP-1细胞单培养组、THP-1+RPMI-8226细胞组和THP-1+DEPTOR sh RNA组。应用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法检测THP-1向破骨样细胞分化过程中抗酒石酸酸性磷酸酶活性改变,应用RT-PCR法检测THP-1细胞降钙素受体(CTR)和组织蛋白酶(Cathepsin)-K m RNA表达水平。结果 DEPTOR sh RNA可明显抑制RPMI-8226细胞中DEPTOR及RANKL蛋白表达(P<0.05),DEPTOR sh RNA组自噬相关蛋白LC-3和Atg5的蛋白的表达水平较阴性对照转染组及未转染组下降(P<0.05)。THP-1细胞与RPMI-8226细胞共培养条件下可诱导THP-1细胞破骨样分化,CTR和Cathepsin-K基因表达上调(P<0.05);DEPTOR sh RNA共培养条件下可抑制THP-1细胞向破骨样细胞分化,CTR和Cathepsin-K基因表达减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DEPTOR sh RNA能明显抑制共培养体系中THP-1细胞的破骨样分化,该作用可能与DEPTOR下调RPMI-8226细胞RANKL有关,抑制自噬可阻碍破骨细胞的分化成熟。

临床路径教学法在肿瘤内科学带教的价值

目的:探讨临床路径教学法在肿瘤内科临床实习教学中的应用效果。方法:选取2016年4-10月肿瘤内科30名本科实习医生为对照组,2016年11月至2017年4月30名实习医生为观察组,分别采用传统教学模式和临床路径教学法进行教学,并对2组学生的实习末理论考试成绩、技能操作成绩及问卷调查结果进行比较。结果:观察组的理论考试、技能操作和问卷调查成绩均明显高于对照组(P<0.01)。结论:临床路径教学法能提高肿瘤内科临床实习医生的带教效果,值得推广。

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白介导细胞自噬在肿瘤中的研究进展

自噬与肿瘤细胞的恶性转化和分化有关。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路和细胞自噬关系密切,其可通过调控细胞自噬而在肿瘤的发生和发展中发挥重要的作用。目前mTOR抑制剂(靶向抑制信号通路)的开发已成为抗肿瘤研究的重要领域,这将会是潜在的肿瘤治疗方法。本文就自噬通路中mTOR信号通路与肿瘤关系以及mTOR抑制剂的研究进展进行综述,希望能为肿瘤的研究及靶向药物的研制提供信息。

PBL模式下肿瘤学科学型研究生培养计划和目标的探索

PBL模式是一种以问题为切入点、以学生为主体的教学方式,将PBL模式引入科学型研究生培养过程是提高研究生培养质量的一个有效方法。本文倡导用PBL模式指导肿瘤学科学型研究生培养的全过程,包括科研能力、临床技能及学术交流三个方面,从而真正达到临床医学科学型研究生的培养目标。

阿伐麦布对人卵巢癌SK-OV-3细胞株抑制作用的研究

目的观察阿伐麦布(10μM)对人卵巢癌SK-OV-3细胞株增殖能力、侵袭和迁移能力的抑制作用,以及对人卵巢癌SK-OV-3细胞株中ACAT-1蛋白表达的影响,从而反映阿伐麦布对人卵巢癌SK-OV-3细胞株抗肿瘤作用的影响。方法采用阿伐麦布(10μM)作用于人卵巢癌SK-OV-3细胞株,建立SK-OV-3细胞株实验模型(ACAT-1组),该实验模型通过阿伐麦布(10μM)诱导时间的不同分为几个亚实验模型(ACAT-1-24,48,72,96组);通过CCK8实验筛选出阿伐麦布(10μM)作用于SK-OV-3卵巢癌细胞株最佳实验组(72 h),即ACAT-1-72组;通过划痕实验测定对照组(亲代卵巢癌SK-OV-3细胞株)与ACAT-1-72组相同时间内增殖能力以及侵袭转移能力的差异;通过Western blotting实验测定对照组与ACAT-1-72组中ACAT-1蛋白的表达差异;通过免疫荧光实验检测对照组与ACAT-1-72组中ACAT-1蛋白的表达差异。结果①与对照组比较,实验组(ACAT-1组)相同时间内肿瘤细胞的增殖能力减弱,呈时间依赖性(P<0.05),且实验组中的ACAT-1-72组增殖能力减弱最明显,作为后续3组实验的最佳实验组;②与对照组比较,实验组(ACAT-1-72组)相同时间内肿瘤细胞的侵袭和迁移能力减弱(P<0.05);③与对照组比较,实验组(ACAT-1-72组)中ACAT-1蛋白表达下降(P<0.05)。结论阿伐麦布(10μM)对人卵巢癌SK-OV-3细胞株可有效发挥抗肿瘤作用,其主要机制与抑制ACAT-1蛋白的表达有关。

Avasimibe对Lewis肺癌小鼠抗肿瘤作用研究

[目的]观察Avasimibe对Lewis肺癌小鼠模型肿瘤生长及转移的抑制作用,探索其可能的作用机制。[方法]选择24只C57BL/6小鼠,左前肢腋下接种Lewis肺癌细胞(LLC)构建Lewis肺癌小鼠模型,随机分成对照组、环磷酰胺(CTX)组、Avasimibe组、CTX+Avasimibe四组,每组6只。于接种肿瘤后第10d分别向Lewis肺癌小鼠模型腹腔注射生理盐水、CTX溶液、Avasimibe、CTX+Avasimibe溶液。至造模后35d,观察各组小鼠生存状态及移植瘤生长情况,称量小鼠体重、瘤重、胸腺重,计算抑瘤率、胸腺指数,观察肝肺转移情况,Western blot检测瘤组织ACAT-1的表达。[结果]与对照组比较,小鼠未出现体重减轻,各组瘤重均降低,CTX+Avasimibe组瘤重低于CTX组及Avasimibe组。四组抑瘤率分别为0、53.45%、51.51%和62.22%,与对照组比较,其余三组抑瘤率升高;与CTX组及Avasimibe组比较,CTX+Avasimibe组抑瘤率升高;与对照组比较,CTX组胸腺重显著性降低,Avasimibe组胸腺重显著性升高,CTX组胸腺指数显著性降低,与CTX组相比,Avasimibe组及CTX+Avasimibe组的胸腺重及胸腺指数均显著性增加。对照组小鼠出现肝肺转移,CTX组、Avasimibe组及CTX+Avasimibe组未见肝肺转移情况;与对照组和CTX组比较,Avasimibe组及CTX+Avasimibe组ACAT-1蛋白表达降低。[结论] Avasimibe在Lewis肺癌小鼠体内可有效发挥抑制肿瘤生长及转移的作用,而且还可以提高小鼠的免疫功能,这为肺癌治疗提供一个新靶点。