类风湿关节炎合并系统性红斑狼疮临床分析

目的探讨类风湿关节炎(RA)与系统性红斑狼疮(SLE)重叠综合征(Rhupus综合征)临床特点。方法对1例Rhupus综合征患者的临床、实验室、影像学资料、治疗及预后进行回顾性分析,结合文献资料复习,探讨Rhupus综合征的临床特点。结果本例患者为中年女性,先出现RA表现,7年后出现SLE表现。本例患者肾脏损害重,有肾功能不全,糖皮质激素联合环磷酰胺治疗有效。结论Rhupus综合征在临床上罕见,患者往往先出现一种疾病的表现,数年至十余年后出现另一种疾病的表现,激素和免疫抑制剂治疗有效,及时诊断及正确治疗对于改善患者预后具有重要意义。

肾上腺髓质素真核表达质粒的构建及其在大鼠近端肾小管上皮细胞中的表达

目的构建大鼠肾上腺髓质素(ADM)真核表达质粒,观察其在大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)中的表达。方法提取大鼠肾上腺组织总RNA,RT-PCR扩增ADM全长cDNA;将扩增产物连接于pMT-18T载体,双酶切及测序鉴定重组质粒。用限制性内切酶BamHⅠ/EcoRⅠ分别对pMT-18T-ADM和真核表达质粒pcDNA3.1双酶切;将目的基因定向克隆到pcDNA3.1载体上;对重组质粒进行双酶切鉴定。将重组质粒通过脂质体介导转染NRK-52E,RT-PCR检测ADM表达。结果特异扩增出ADM片段,大小为585 bp;片段成功插入pcDNA3.1载体中。RT-PCR方法证明NRK-52E中存在ADM高表达。结论成功构建大鼠ADM真核表达质粒,并将其成功转染NRK-52E。

肾舒胶囊对5/6肾切除大鼠残余肾脏的保护作用及机制

目的 探讨肾舒胶囊对 5 / 6肾切除大鼠残余肾脏的保护作用及机制。方法 制作大鼠 5 / 6肾切除模型 ,1周后随机分为模型组、肾舒胶囊治疗组、苯那普利治疗组 ,同时作假手术对照。肾舒胶囊治疗组及苯那普利治疗组分别给予肾舒胶囊及苯那普利灌胃。术后 12周检测大鼠体重、血压、2 4h尿蛋白定量、肾功能 ,观察肾脏组织病理学改变 ,检测肾组织中血小板源性生长因子 (PDGF)、转化生长因子 β1(TGF β1)、Ⅳ型胶原 (Col Ⅳ )mRNA表达。结果 肾舒胶囊能显著降低 5 / 6肾切除大鼠 2 4h尿蛋白量 ,改善肾功能 ,抑制PDGF、TGF β1、Col ⅣmRNA表达的上调 ,肾脏组织病理显示它能明显抑制残余肾脏的代偿性肥大 ,减轻肾小球硬化及肾间质纤维化 ,其效果和苯那普利相当。结论 肾舒胶囊能延缓 5 / 6肾切除大鼠残余肾脏的病变进展。其作用机制与抑制系膜细胞增殖及细胞外基质积聚有关。

肾舒胶囊对系膜细胞增殖及转化生长因子-β_1和Ⅳ型胶原表达的影响

目的 研究肾舒胶囊对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激的大鼠系膜细胞 (MC)增殖及转化生长因子 - β1 (TGF β1 )、Ⅳ型胶原 (Col Ⅳ )mRNA表达的影响。方法 采用血清药理学方法 ,制备肾舒胶囊含药血清 ,用苯那普利作为阳性对照药 ;将肾舒胶囊含药血清加入AngⅡ刺激的大鼠MC中 ,MTT法测定MC增殖情况 ,半定量RT PCR检测TGF β1 、Col Ⅳ的mRNA表达。结果 肾舒胶囊含药血清可明显抑制AngⅡ诱导的大鼠MC增殖及TGF β1 、Col ⅣmRNA表达 ,其作用效果与苯那普利相当。结论 肾舒胶囊可能通过抑制MC增殖及分泌TGF β1 等生长因子 ,减少细胞外基质积聚 ,防治肾小球硬化。

异基因骨髓移植后肾病综合征的临床与病理分析

目的探讨异基因骨髓移植后肾病综合征的临床和病理特点。方法对1例异基因骨髓移植后发生肾病综合征患者的临床、病理资料及治疗进行综合分析。结果本例患者在骨髓移植后28个月发生肾病综合征,在此之前患者有皮肤、口腔和肝脏损害表现;肾脏病理表现为膜性肾病。糖皮质激素及霉酚酸酯治疗后肾病综合征完全缓解。结论异基因骨髓移植后肾病综合征是慢性移植物抗宿主病的肾脏表现,可能为自身免疫性疾病,是移植物对宿主产生的一种排斥反应。肾穿刺活检对该病的诊断和预后判断具有重要价值,免疫抑制剂治疗有效。

小剂量环孢霉素A抑制大鼠缺血性急性肾衰竭中肾小管上皮细胞线粒体通透性转运

目的研究小剂最环孢霉素A(CsA)对大鼠缺血性急性肾衰竭诱导的肾小管上皮细胞线粒体通透性转运的影响,探讨其抑制肾小管上皮细胞凋亡的作用机制。方法Wistar大鼠双侧肾动脉夹闭30min诱导缺血性急性肾衰竭。再灌注18h后留取肾组织及血液标本。比色法测定血清肌酐(SCr)浓度,原位末端标记(TUNEL)法检测肾小管上皮细胞凋亡情况,Westernblot测定肾组织中胞浆细胞色素C、caspase-3、9蛋白质表达。结果肾脏缺血30min／再灌注18h后大鼠SCr明显升高[(106．9±19．4)μmol／Lvs(56．5±7．1)μmol／L,P<0．05],肾小管上皮细胞凋亡数目显著增加[(20．14±3．70)％vs(0．99±0．17)％,P<0．05],肾组织胞浆细胞色素c、caspase-3、9表达增加(P<0．05);CsA能显著降低SCr[(87．5±18．5)μmol／L],减轻肾小管上皮细胞凋亡[(14．61±3．39)％],下调胞浆细胞色素C、caspase-3、9表达(P<0．05)。结论小剂量CsA能抑制大鼠缺血性急性肾衰竭引起的线粒体通透性转运,从而减轻肾小管上皮细胞凋亡,保护肾功能。

肾舒胶囊对人系膜细胞增殖及分泌肿瘤坏死因子-α和纤连蛋白的影响

目的 :研究肾舒胶囊对人系膜细胞 (HMC)增殖及分泌肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)和纤连蛋白 (FN)的影响。方法 :采用血清药理学方法 ,将肾舒胶囊含药血清加入培养的HMC中 ,MTT法测定HMC增殖情况 ,ELISA法测定HMC分泌TNF -α及FN情况。结果 :肾舒胶囊含药血清可明显抑制HMC增殖及其分泌TNF -α和FN ,且其抑制作用呈一定的浓度依赖性和时间依赖性。结论 :肾舒胶囊可能通过抑制MC增殖及其分泌TNF -α等炎症介质和FN等细胞外基质 (ECM)

原发性肾病综合征肾小管功能异常与肾小管间质病理损害的相关性分析

目的：探讨原发性肾病综合征（NS）患者临床肾小管功能异常与肾小管间质病理损害的相关性。方法：回顾性分析2006年5月2008年9月确诊并行肾穿刺活检的原发性NS患者82例，观察肾小管间质病理改变，并进行半定量评分；同时测定患者肾小管功能损害指标——尿视黄醇结合蛋白（RBP）、尿α1微球蛋白（α1-MG）、N-乙酰-β-D-尿氨基葡萄糖苷酶（NAG）水平，观察肾小管功能异常与肾小管间质病理损害的相关性。结果：不同病理类型的原发性NS患者肾小管间质病理损害程度及尿RBP、α1-MG、NAG水平均不同（P〈0．05）；肾小管间质病理损害重的患者尿RBP、α1-MG、NAG明显增高（P〈0．05）。结论：原发性NS患者肾小管功能异常与肾小管间质病理损害密切相关，肾小管功能测定能在一定程度上评价患者肾小管间质病理损伤程度。

肾脏缺血/再灌注损伤中肾小管上皮细胞凋亡机制的研究现状

肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤是临床上导致急性肾功能衰竭的常见原因,肾小管上皮凋亡是其重要的发病机制之一。目前肾脏I/R损伤中肾小管上皮细胞凋亡的机制尚未完全阐明,因而缺乏有效的治疗措施。本文就此方面的研究现状作一综述。

北京市月坛社区自我评价健康的中、老年人代谢综合征患病率调查及危险因素分析

目的调查北京市月坛社区自我评价健康的中、老年人代谢综合征(MS)的患病率,并分析其危险因素。方法采用流行病学现场调查和实验室检测相结合的方法,横断面分析196例自我评价健康的中、老年人MS的患病率和危险因素。结果196例中、老年人MS总患病率为16.3%,中年组MS患病率为11.6%,老年组MS患病率为20.0%;196例中、老年人MS的发生与年龄、体质指数相关(P<0.01),而男性仅与体质指数相关(P<0.05),与年龄无关(P>0.05)。结论北京市月坛社区自我评价健康的中、老年人MS的患病率较高,其危险因素为年龄与体质指数,男性MS防治的重点应放在40岁前。

糖皮质激素治疗IgA肾病蛋白尿的meta分析

目的通过meta分析探讨糖皮质激素对IgA肾病蛋白尿的疗效。方法检索Science Direct、EBSCO、Wiley、PubMed、CBMdisc、CNKI等数据文献库,收集1995-2013年国内外公开发表的以糖皮质激素作为随机对照试验治疗IgA肾病相关文献。采用固定效应模型计算标准化均数差(SMD)及95%置信区间(95%CI)。用Revman5.0软件从总体疗效、不同蛋白尿程度、不同疗程、不同肌酐值水平及联合ACEI等亚组进行Meta分析。结果共纳入9篇文献,包括256例激素组和273例对照组进行meta分析,结果显示:①糖皮质激素治疗IgA肾病蛋白尿的总体疗效优于对照组(P=0.000 01);②蛋白尿大于1.5 g/d和小于1.5 g/d的IgA肾病患者,糖皮质激素治疗蛋白尿的疗效均优于对照组(P<0.01);③对于血肌酐小于1.5mg/dl的IgA肾病患者,糖皮质激素治疗蛋白尿的疗效优于对照组(P<0.01);④糖皮质激素短程治疗(<1年)和长程治疗(≥1年)对于蛋白尿的疗效均优于对照组(P<0.01);⑤激素联合ACEI类药物对于蛋白尿的疗效更为显著(P<0.01)。结论糖皮质激素治疗IgA肾病蛋白尿总体疗效确切,对于不同程度蛋白尿的IgA肾病,激素治疗均有效,考虑不同疗程对于蛋白尿的疗效无明显影响,建议可适当缩短激素治疗疗程。激素联合ACEI较单纯应用ACEI类药物能更有效降低蛋白尿。

大鼠肾脏缺血再灌注损伤中Intermedin及其受体表达的变化

目的观察大鼠肾脏缺血/再灌注损伤(IRI)模型中,血管活性肽Intermedin(IMD)及其受体系统降钙素受体样受体(CRLR)、受体活性修饰蛋白(RAMPs)在肾组织表达的变化。方法健康雄性Wistar大鼠16只随机分为假手术组和IRI组,双侧肾动脉夹闭45min、再灌注12h制备IRI模型。比色法测定血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)的浓度;放射免疫分析法测定血浆、肾组织IMD及血浆肾上腺髓质素(ADM)的含量;半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肾组织IMD、ADM、CRLR、RAMPs的mRNA表达。结果与假手术组相比,IRI组大鼠SCr和BUN明显升高(P<0.05);血浆和肾组织的IMD含量增加(分别升高了53.76%、36.85%),血浆ADM含量升高了143.22%(均P<0.05);IRI组大鼠肾组织IMD、ADM、CRLR、RAMP1、2、3的mRNA表达较假手术组均上调(分别升高了22.1%、41.1%、32.8%、33.7%、35.9%、29.4%,均P<0.05)。结论肾脏IRI过程中IMD及其受体系统表达增加,可能参与了肾脏IRI的病理生理过程。

维生素E对大鼠肾脏缺血再灌注损伤诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨维生素E对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响及可能的机制。方法健康雄性Wistar大鼠18只随机分为对照组、IRI组和维生素E组。动物右肾切除1周后,夹闭左肾动脉制作IRI模型,24h后取肾标本,维生素E组右肾切除后给予维生素E50mg/d灌胃至再灌注24h。半定量分析肾脏病理损伤、TUNEL检测肾组织凋亡、比色法测肾组织caspase-3活性。结果①与对照组相比,IRI组肾脏病理损伤严重、肾小管上皮细胞凋亡明显增加、caspase-3活性明显增高(P<0.01);②与IRI组相比,维生素E处理组肾脏病理损伤明显减轻、肾小管上皮细胞凋亡明显减少、caspase-3活性明显减少(P<0.01)。结论维生素E能抑制肾脏IRI诱导的肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能是通过抑制caspase依赖的细胞凋亡途径实现的。

糖尿病尿毒症病人血液透析进食时间的观察分析

血液透析过程中发生低血压是透析中常见且严重的并发症,常发生在血液透析的中后期,发生率高达20%～40%[1],不仅影响透析质量,给病人带来痛苦,而且增加护理工作量。低血压最主要的发生原因是血容量不足,与进食时引起的血液再分布有关[2],血液透析一般4h～5h,大部分病人有饥饿感,对于糖尿病病人,可能会出现低血糖,往往需要进食。

阿霉素诱发局灶节段性肾小球硬化肾病大鼠模型的建立

目的建立临床表现和病理特点与人类肾小球疾病相似的阿霉素肾病大鼠模型。方法将40只SD大鼠完全随机分为造模组（32只）和对照组（8只），造模组完全随机分为首次注射阿霉素后2周组、4周组、8周组、12周组，每组各8只。造模组大鼠尾静脉分2次注射阿霉素，第1次注射按6mg／kg给药，第2次于1周（7d）后按4mg／kg给药；对照组按照造模组方法经大鼠尾静脉2次注射等量生理盐水。检测各组大鼠24h尿蛋白量、血清总蛋白、白蛋白、CH、TG、BUN、Cr的变；双抗体夹心酶联免疫吸附方法检测各组大鼠血清基质金属蛋白酶（MMP）2、MMP-9、转化生长因子（TGF）-β1；免疫组化方法检测各组大鼠纤维连接蛋白（FN）和层粘连蛋白（LN）的表达化；光镜、电镜观察2组大鼠肾脏病理变化。结果造模组24h尿蛋白定量明显增加，8周末达高峰。造模组大鼠2周、4周、8周和12周组与对照组相比，血清总蛋白、白蛋白明显降低[（50．7±3．6）、（42．2±3．4）、（40．4±3．1）、（41．7±3．3）g／L比（62．8±2．8）g／L、（22．2±1．8）、（16．4±1．7）、（14．8±2．1）、（13．0±2．2）g／L比（29．0±1．3）g／L]；TG、CH明显升高[（5．2±1．4）、（6．1±1．5）、（7．3±1．5）、（7．2±1．2）mmol／L比（0．6±0．3）mmol／L，（3．8±1．7）、（5．6±1．9）、（8．6±2．7）、（9．6±1．6）mmol/L比（1．3±0．1）mmol／L]；MMP-2、MMP-9降低[（151．4±2．4）、（100．5±3．1）、（76．5±3．6）、（83．7±3．1）μg／L；（73．4±2．7）、（58．9±2．2）、（35．4±2．0）、（33．3±1．5）μg／L]，血清TGF-β1含量升高；肾组织FN、LN的表达和分布范围均明显增加。造模12周在可见部分肾小球出现局灶节段性硬化。结论采用阿霉素首次大剂量（6mg／kg）冲击诱导，1周后小剂量（4mg／kg）给药的方法，大鼠在12周末可见部分肾小球出现局灶节段性硬化。

中介素对缺氧/复氧大鼠肾小管上皮细胞增殖作用及细胞周期的影响及其机制

目的探讨中介素(intermedin,IMD)对大鼠近端肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧/复氧(H/R)后细胞增殖、细胞周期的影响。方法 NRK-52E细胞随机分为对照组,模型组:缺氧/复氧组(H/R)、H/R+空质粒组、H/R+IMD质粒组。MTT法检测细胞增殖,比色法检测培养基上清LDH含量,流式细胞术检测细胞周期,Real time-PCR法和Western blot法检测cyclin D1、CDK、p57 mRNA及蛋白表达,间接免疫荧光染色检测cyclin D1亚细胞定位。结果 1与对照组相比,H/R组培养基中LDH含量升高了106%,同时细胞存活率明显下降,与H/R组比较,H/R+IMD组培养基中LDH含量下降了33.85%(P<0.01),而细胞存活率增高(79.15%±1.42%vs 61.22%±1.63%,P<0.05),2细胞周期结果显示,与对照组相比,H/R组细胞G0/G1期比例增加,S期细胞比例降低(P<0.05);与H/R组比较,H/R+IMD组G0/G1期细胞比例明显降低,而S及G2期细胞比例增加(P<0.05)。3H/R可增加cyclin D1、CDK4及p57的表达也增加(与对照组比较,P<0.05);而IMD可进一步上调cyclin D1、CDK4的表达,同时下调p57的表达,与对照组及H/R组相比差异具有显著性(P<0.05)。4免疫荧光检测结果可见,cyclin D1呈红色荧光,在NRK-52E细胞内主要表达在细胞核中。结论 IMD可以上调cyclin D1、CDK4蛋白表达,下调p57的表达,促进细胞周期进展,从而加速肾组织IRI后细胞增殖和修复。

抗氧化剂和内质网钙释放阻滞剂对老年大鼠肾脏缺血/再灌注损伤中凋亡的影响

目的探讨联合应用抗氧化剂BHA(Butylated Hydroxyanisole,叔丁基羟基茴香醚)和内质网钙释放阻滞剂TMB-8〔8-(N,N-diethyl-amino)-noctyl-3,4,5-trimethoxybenzoate)〕对老年大鼠肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤时肾组织中细胞凋亡蛋白酶-3(caspase-3)表达及活性的影响。方法27月龄Wistar大鼠分别随机分为假手术组、I/R模型组、I/R+BHA+TMB-8组,双侧肾动脉夹闭30min/再灌注18h制作模型。观察肾功能改变,原位末端标记(TUNEL)法检测肾小管上皮细胞凋亡情况,Northern blot检测肾组织中caspase-3mRNA表达,比色法测定肾组织中caspase-3活性。结果肾脏I/R损伤时,老年大鼠肾功能明显减退,大量肾小管上皮细胞凋亡,肾组织caspase-3mRNA表达及活性增加;BHA+TMB-8能显著改善老年大鼠肾功能,减轻肾小管上皮细胞凋亡,降低肾组织caspase-3表达及活性。结论BHA+TMB-8联合治疗能明显抑制老年大鼠肾脏I/R损伤时肾组织caspase-3表达及活性,从而减轻肾小管上皮细胞凋亡,保护肾功能。

他克莫司与西罗莫司根据细胞周期序贯用药对阿霉素肾病大鼠的影响

目的观察他克莫司、西罗莫司根据细胞周期序贯联合用药对阿霉素肾病大鼠的治疗效果。方法将24只雄性SD大鼠模型完全随即分为正常对照组、肾病组及治疗组，各8只；测定3组大鼠的尿蛋白定量、血生化指标；免疫组化、定时定量聚合酶链反应检测肾组织Nephrin、Podocin表达以及肾组织结缔组织生长因子（CTGF）的表达。结果①肾病组在12周末可见肾小球出现局灶节段性硬化，治疗组病理变化明显减轻。②肾病组4、8、12周末尿蛋白定量[分别为（276．41±11．12）、（355．76±14．10）、（338．92±15．87）rng]均明显高于对照组[分别为（12．184-1．38）、（12．98±2．07）、（13．56±2．70）mg，P〈0．01）]，治疗组大鼠尿蛋白定量在8、12周末[分别为（160．64±13．72）、（126．30±14．65）mg]均明显低于肾病组（P〈0．05），但高于对照组；肾病组TP、ALB明显低于对照组（P〈0．01），肾病组TG、胆固醇明显高于对照组（P〈0．01），治疗组TP、ALB明显高于肾病组（P〈0．05）。③在12周末肾病组大鼠Nephrin、Podocin蛋白和mRNA表达明显减少（P〈0．01），治疗组表达较肾病组上调（P〈0．05）。④在12周末肾病组CTGF蛋白表达较对照组明显增加（P〈0．01），治疗组较肾病组明显减少（P〈0．05）。结论他克莫司、西罗英司根据细胞周期序贯联合用药对阿霉素肾病大鼠肾组织病理学变化均有明显改善，可有效减少阿霉素肾病大鼠的尿蛋白；升高TP和ALB，降低TG和胆固醇；并可恢复足细胞相关蛋白的表达，改善肾脏纤维化。

中介素真核表达质粒的构建及其在大鼠近端肾小管上皮细胞中的表达

目的构建带有绿色荧光蛋白的中介素(IMD)真核表达质粒pIRES2-EGFP/IMD,并转染大鼠近端肾小管上皮细胞系(NRK-52E)。方法合成带有IMD基因片段的pMD19-TSimple/IMD质粒,将pMD19-TSimple/IMD质粒和pIRES2-EGFP载体双酶切之后进行高效连接,将IMD亚克隆至pIRES2-EGFP上,对重组表达载体进行酶切、测序鉴定。采用FuGENEHD转染试剂转染NRK-52E细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白。提取细胞mRNA和蛋白,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测基因表达,Western检测IMD蛋白表达。结果经限制性酶切鉴定及测序分析证实pIRES2-EGFP/IMD载体序列正确;荧光显微镜下可见转染的NRK-52E细胞有绿色荧光蛋白的表达,经RT-PCR和Western测定分析,转染细胞IMD基因及蛋白的表达增加。结论pIRES2-EGFP/IMD载体构建成功,并在NRK-52E细胞内成功表达。

Omi/HtrA2 shRNA重组真核表达质粒的构建及其在大鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧模型中的作用

目的构建在哺乳动物细胞中表达的Omi/HtrA2短发夹RNA(shRNA)的表达质粒,观察其对大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧/复氧模型中Omi/HtrA2表达的影响。方法根据Genbank中Omi/HtrA2 mRNA分别设计2对多聚核苷酸序列,退火形成互补双链DNA,分别克隆至经双酶切后的载体Pgenesil-1上,构建Omi/HtrA2特异性的shRNA表达载体PGP1和PGP2,进行酶切和测序鉴定。制作NRK-52E缺氧/复氧模型,将表达质粒通过脂质体介导转染NRK-52E,Western blot检测Omi/HtrA2蛋白质表达。结果将合成的DNA片段退火后克隆至Pgenesil-1载体上,构建Omi/HtrA2特异shRNA表达载体PGP1和PGP2;经酶切和测序证实构建成功,无碱基突变发生。将表达质粒介导转染NRK-52E缺氧/复氧模型后,细胞Omi/HtrA2蛋白质表达显著降低。结论成功构建针对大鼠Omi/HtrA2基因的shRNA表达载体PGP1和PGP2,它们能有效抑制NRK-52E缺氧/复氧模型中Omi/HtrA2表达。