多房棘球蚴囊液对沉默DDIT4后小鼠肝细胞生物学功能的影响

目的探讨多房棘球蚴囊液(Hydatid cyst fluid,HCF)对沉默DNA损伤诱导转录因子4(DNA damage-inducible transcript 4,DDIT4)后小鼠肝细胞生物学功能的影响。方法1.采用免疫蛋白印迹法(Western Blot)、实时荧光定量法(RT-qPCR)检测经HCF处理的小鼠肝细胞中DDIT4蛋白的表达量,以检测转染效率;2.选用慢病毒转染小鼠正常肝细胞DDIT4后做HCF处理,采用细胞计数试剂8法(CCK-8)检测各组小鼠肝细胞的细胞活性;3.用Western Blot法检测Beclin-1、Caspase-3、LC3等凋亡自噬相关蛋白水平;4.用透射电镜观察HCF对小鼠肝细胞超微结构的影响。结果1.经HCF作用后慢病毒转染小鼠肝细胞的DDIT4基因及蛋白表达水平检测结果显示,LV-Ddit4-RNAi 1、LV-Ddit4-RNAi 2、LV-Ddit4-RNAi 3组分别与LV-Ddit4-NC组比较,前三组DDIT4蛋白含量显著下降,LV-Ddit4-RNAi 3组尤为显著(P<0.01)。2.LV-Ddit4-RNAi 0.4、0.8 mg/mL组细胞OD值明显大于LV-Ddit4-NC 0.4、0.8 mg/mL组(P<0.01);与HCF共培养48 h后,沉默DDIT4组细胞形态接近正常AML-12细胞的形态,多呈椭圆形或者圆形,且细胞生长密度较LV-Ddit4-NC组明显为高。3.与LV-Ddit4-NC con组比较,LV-Ddit4-NC 0.4 mg/mL HCF组和LV-Ddit4-NC 0.8 mg/mL HCF组的LC3-II、Beclin-1、Caspase-3蛋白表达水平显著增高(P<0.01);分别与LV-Ddit4-NC 0.4、0.8 mg/mL HCF组比较,LV-Ddit4-RNAi 0.4、0.8 mg/mL HCF组的LC3-II、Beclin-1、Caspase-3蛋白表达水平显著降低,均具有统计学意义。4.两对照组细胞胞质未见明显损伤,线粒体基质较均匀,粗面内质网未见明显扩张,自噬水平低;LV-Ddit4-RNAi 0.4、0.8 mg/mL组细胞损伤较轻,未见粗面内质网扩张,胞质内存在较多脂滴,自噬数量增多;LV-Ddit4-NC 0.4、0.8 mg/mL组细胞损伤严重,粗面内质网严重扩张,胞质内存在大量脂滴,可见大量自噬结构。结论HCF对沉默DDIT4后小鼠肝细胞生物学功能的影响:1.AML-12细胞增殖;2.AML-12细胞凋亡、自噬数量减少。

甲状腺全切术治疗原发性甲状腺功能亢进疗效及对患者心脏功能和肝功能的影响

目的:观察临床应用甲状腺全切术治疗原发性甲状腺功能亢进的效果及对患者心脏及肝功能的影响。方法:选取2014年7月至2015年8月在我院进行诊治的98例原发性甲状腺功能亢进患者,按随机平行分组法随机分为对照组和观察组各49例,对照组患者给予甲状腺次全切术治疗,观察组患者则应用甲状腺全切术治疗,对比分析两组患者治疗后的临床疗效及对患者心脏及肝功能影响。结果:治疗后观察组短暂性甲减发生率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),术后复发率及术中出血量、手术时间均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗前两组患者各项心脏功能及肝功能指标比较均无差异,差异具有统计学意义(P>0.05),治疗后均较治疗前下降,差异具有统计学意义(P<0.05);组间比较,观察组患者下降程度高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:临床应用甲状腺全切术治疗原发性甲状腺功能亢进效果显著,可明显改善心脏及肝功能,可在临床推广应用。

lncRNA SNHG14通过靶向miR-433-3p调控甲状腺癌SW579细胞的恶性生物学行为

目的:探讨lncRNA SNHG14对甲状腺癌SW579细胞恶性生物学行为的影响及其分子机制。方法:收集2017年10月至2018年12月青海省人民医院收治的20例甲状腺癌患者的癌组织及癌旁组织标本,用qPCR检测甲状腺癌组织和对应癌旁组织中SNHG14与miR-433-3p的表达;根据转染物的不同,将SW579细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-SNHG14组(转染si-SNHG14)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-433-3p mimic组(转染miR-433-3p mimic)、si-SNHG14+anti-miR-NC组(共转染si-SNHG14与anti-miR-NC)和si-SNHG14+anti-miR-433-3p组(共转染si-SNHG14与anti-miR-433-3p)。MTT法、FCM、Transwell实验分别检测转染后SW579细胞的增殖能力、细胞周期、细胞凋亡率、迁移及侵袭能力的改变;利用双荧光素酶报告基因实验检测SNHG14是否可结合miR-433-3p,qPCR法检测SNHG14与miR-433-3p之间的相互调控关系。结果:SNHG14在甲状腺癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.05),而miR-433-3p的表达水平低于癌旁组织(P<0.05)。抑制SNHG14的表达或过表达miR-433-3p可使SW579细胞增殖能力降低(P<0.05)、迁移与侵袭细胞数减少(均P<0.05)、细胞凋亡率升高(P<0.05)、G1期细胞比例升高(P<0.05)且S期细胞比例降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证明SNHG14可结合miR-433-3p,抑制SNHG14的表达可提高SW579细胞中miR-433-3p水平(均P<0.05)。同时抑制miR-433-3p和SNHG14的表达可部分逆转后者对SW579细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用(均P<0.05)。结论:甲状腺癌组织中lncRNA SNHG14呈高表达、miR-433-3p呈低表达,lncRNA SNHG14可通过靶向结合miR-433-3p促进甲状腺癌SW579细胞的增殖、迁移、侵袭而抑制细胞凋亡。

SNHG1/miR-361-3p/MMP-1轴调控乳腺癌细胞迁移和侵袭的机制

目的探讨lncRNA SNHG1(核仁小分子RNA宿主基因1)对乳腺癌细胞侵袭及转移能力的影响,并探索潜在机制。方法利用划痕实验和Transwell实验检测SNHG1和miR-361-3p对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响,利用双荧光素酶报告基因实验检测SNHG1是否可结合miR-361-3p,miR-361-3p是否能够结合基质金属蛋白酶1(MMP-1),利用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印记实验检测SNHG1与miR-361-3p以及MMP-1表达的关系。结果抑制SNHG1和增加miR-361-3p的表达后,细胞迁移和侵袭能力均降低(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果显示SNHG1能够吸附miR-361-3p(P<0.01),miR-361-3p可结合MMP-1(P<0.01)。PCR结果显示SNHG1低表达使得miR-361-3p的表达增加(P<0.01),蛋白免疫印记实验结果显示抑制SNHG1的表达可降低MMP-1的表达(P<0.01)。结论SNHG1/mir-361-3p/MMP-1轴调控乳腺癌细胞迁移和侵袭。

解读大数据时代下档案管理的价值提升

本文分析了大数据时代下档案管理的现状,针对加强大数据时代下档案管理的价值提升进行详细探究。

多房棘球蚴分泌物抗原对脂多糖诱导小鼠骨髓来源的树突状细胞表型及功能的影响

目的探究不同浓度多房棘球蚴分泌物抗原(Em-sAg)对脂多糖(LPS)诱导小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC)表型和功能的影响。方法小鼠骨髓腔中所分离的骨髓前体细胞,经小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)刺激后形成BMDC,于正倒置显微镜下观察细胞形态。用流式细胞术鉴定BMDC纯度后,分为Control组、阳性对照组(LPS 1μg/mL)、LPS+3 mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.375 mg/mL Em-sAg组共6组。流式细胞术检测各组BMDC表面分子(CD80、CD86、MHC-Ⅱ分子)的表达情况,ELISA法检测各组细胞因子IL-12p70的表达水平。满足正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验表示。结果在正倒置显微镜下观察到,培养8~10 d的细胞可见毛刺样突起,细胞呈完全悬浮状态。流式细胞术检测发现,CD11c的阳性率均在70%以上,据此鉴定所培养的细胞大部分为BMDC。流式细胞术的进一步结果表明,与Control组相比,LPS组表面的细胞分子CD80、CD86、MHC-Ⅱ均显著增加(P值均<0.05);与LPS组相比,LPS+3 mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.375 mg/mL Em-sAg组中BMDC的CD80显著减少(F=34.870,P<0.001),CD86、MHC-Ⅱ无明显减少(P值均>0.05)。ELISA法的结果表明,不同组间的IL-12 p70的水平差异均有统计学意义(F=73.140,P<0.05),与Control组相比,LPS组刺激后IL-12p70的表达量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与阳性对照组相比,LPS+3 mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75 mg/ml Em-sAg组、LPS+0.375 mg/mL Em-sAg组均降低IL-12p70的表达量(P值均<0.05),且Em-sAg浓度越高,降低促炎症因子IL-12p70表达量越明显。结论不同浓度Em-sAg均可抑制LPS诱导的BMDC成熟度和促炎症细胞因子IL-12p70的表达。

外泌体源性miRNA在不同寄生虫病中调控巨噬细胞极化的机制研究进展

外泌体是由多种细胞分泌的纳米级囊泡外小体,其可携带多种微小RNA(miRNA)从供体细胞转移至受体细胞,干扰受体细胞基因表达,在调节细胞功能中起着重要作用。巨噬细胞是一种多功能的免疫细胞,在机体不同的周围环境影响下可产生表型和功能的变化,称为巨噬细胞极化。在原虫病、蠕虫病等寄生虫病中,外泌体可携带miRNA通过调节巨噬细胞的极化而影响机体免疫功能,引起宿主免疫逃逸或免疫抑制。深入了解外泌体源性miRNA在寄生虫病中对巨噬细胞极化的调控机制,或可为制定新的寄生虫病防治策略奠定基础。

浅谈办公室管理工作

办公室的职责特点决定了它在推动企业发展中的重要地位,也决定了它的参谋、服务、传送带作用.充分发挥办公室职能,将成为企业发展的动力源泉,也必然是办公室管理工作的理想境界。

肝多房棘球蚴病的临床诊断和治疗研究进展

肝多房棘球蚴病(HAE)是中间宿主误食多房棘球绦虫虫卵后幼虫发育于肝脏而引发的严重寄生虫病,在我国高发,病死率较高。HAE早期无特异性临床表现,因此早期诊断及治疗是防止其进展的关键。临床医生可通过HAE的临床特点及影像学、血清学特征性表现进行诊断,但该病在辅助检查与诊断上有一定的局限性,容易与肝脓肿、肝内胆管癌(ICC)、肝血管瘤等混淆,因此需与多种辅助检查联合来确诊。目前,HAE的治疗方式主要有肝脏离断和门静脉结扎的分阶段肝切除术、肝移植术、超声引导下射频消融术、姑息手术、根治性肝切除术等外科治疗方式及以苯并咪唑类药物为代表的西药、中西医联合用药等内科治疗方式。对HAE的临床诊断和治疗进行深入研究,有助于HAE的早期诊断及治疗,对降低该病的病死率至关重要。

小鼠肝多房棘球蚴感染模型中细胞焦亡NLRP3/Caspase-1通路的初步研究

目的观察小鼠肝多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis,Em)感染模型中细胞焦亡NLRP3/Caspase-1通路中关键蛋白的表达并探讨其相关性。方法选取25只BALB/c小鼠按随机数字表分为对照组和感染组,感染组以0.2 mL原头节悬液(含原头节3000个)注射于肝脏被膜下,建立肝Em感染模型,对照组不予处理,常规饲养。分别于模型建模后1、2、3及5个月处死小鼠,摘取肝脏,观察肝脏大体形态,行HE染色、透射电镜观察组织病理学改变;行免疫组化和免疫印迹法检测肝脏组织中细胞焦亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)/Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)通路中关键蛋白的表达,采用ELISA测定细胞焦亡下游因子IL-1β的表达水平。结果与对照组相比,感染组小鼠肝组织表面囊性病灶随时间延长逐渐增大并凸出于肝脏表面;HE染色可见肝脏病灶出现不同程度的炎性细胞浸润、纤维增生等多种病理改变。Em感染2个月组透射电镜观察可看到肝细胞的细胞膜断裂、不连续,符合细胞焦亡的“打孔”现象。ELISA检测结果显示Em感染1、2、3和5个月后小鼠肝脏组织匀浆中IL-1β浓度均高于对照组的浓度,差异有统计学意义(F=127.2,P<0.05)。免疫组化检测结果显示,Caspase-1和NLRP3在Em感染1、2、3及5个月的小鼠肝脏中阳性细胞比率均高于对照组,差异有统计学意义(F=114.6,P<0.05;F=85.89,P<0.05)。蛋白免疫印迹结果显示,Caspase-1、消皮素D(gasdermin D,GSDMD)和NLRP3蛋白在感染组小鼠肝脏中的相对表达水平呈现先升高(其中Caspase-1和GSDMD的表达于感染1个月时升至最高,NLRP3的表达于感染2个月时升至最高),后降低的趋势,各时相感染组与对照组比较以及各时相感染组之间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论采用“切开皮肤经腹壁肌层肝穿刺法”建立小鼠Em感染模型是可行的;小鼠肝Em感染后存在细胞焦亡现象,可能通过细胞焦亡NLRP3/Caspase-1通路发挥炎症作用。

甲状腺内甲状舌管囊肿误诊为甲状腺腺瘤1例报道

1病例资料患者,女,43岁,以“发现颈前肿物3周”为主诉入住青海省人民医院(简称“我院”)。现病史:自诉入院前3周因受凉后发现右侧颈前有肿物突出,约3 cm×2 cm大小,伴轻微颈部异物感,遂前往我院就诊。专科查体:右侧颈前可触及一直径约3 cm类圆形肿物,质韧,边界清楚,无压痛,可随吞咽运动上下移动,肿物不随伸舌活动。甲状腺功能(简称“甲功”)检测5项和甲状旁腺激素均正常。

细胞焦亡在人体寄生虫病中的研究进展

细胞焦亡是近年发现的一种依赖半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)的新型细胞死亡方式,活化后的caspase以剪切消皮素(GSDM)蛋白家族为途径,使细胞膜发生破裂,同时释放炎性细胞因子及其内容物,最终导致细胞死亡,其发生、形态学特征及调控机制与凋亡、坏死、自噬、铁死亡等细胞死亡方式有明显不同。细胞焦亡信号通路可分为经典途径、非经典途径和其他途径。目前大量研究证实,细胞焦亡参与寄生虫病的发展历程。本文就细胞焦亡的定义、不同途径机制及其在多种人体寄生虫病中发挥的作用作一综述,以期为开拓细胞焦亡与寄生虫疾病之间的作用提供依据。

探讨乳腺疾病优势化筛查诊断的应用现状

探讨乳腺X线摄影、乳腺超声、乳腺触诊成像系统、临床乳腺检查及乳腺磁共振成像等筛查方法在当今妇女乳腺疾病普查中的应用现状,通过分析各方法在临床诊断中的优势及劣势,总结出在临床应用中具有优势化的筛查方法,为早期乳腺癌患者提供个体化选择。现将以上各种筛查方法应用现状进行总结。

树突状细胞在棘球蚴感染所致免疫耐受中作用的研究进展

树突状细胞(dendritic cells,DCs)是一种抗原提呈细胞(antigen-presenting cells,APC),是免疫应答和免疫耐受的重要调节者,在机体固有免疫和适应性免疫中发挥关键作用。既往研究表明,棘球蚴在宿主体内长期寄生的原因与DCs诱导机体免疫耐受密切相关。本文旨在总结DCs在棘球蚴感染导致的免疫耐受中作用的研究进展,以期为棘球蚴感染防治及棘球蚴病免疫治疗提供理论基础和研究思路。

脑多房棘球蚴病误诊为脑梗死1例

患者,男,47岁,喇嘛,青海省班玛县人。于2014年12月4日因"行走不稳50 d伴言语不清20 d"入住青海大学附属医院。患者50 d前无明显诱因突然出现行走不稳,左右摇晃,20 d前上诉症状进行性加重,偶有跌倒,同时伴言语不清,就诊于班玛县人民医院,给予改善血液循环的药物治疗(具体不详),上诉症状未改善。患者既往体健,无慢性病史,长期居住于青海省班玛县,无牧区生活史。入院后查体:血压100/60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),常规内科查体未见明显异常。

浅谈对绩效管理的认识

在日益激烈的市场竞争环境下,企业要得以生存和发展,就必须有一套行之有效,而且完善的绩效管理体系,本文就绩效管理展开了较为深入的讨论,解析绩效管理在企业中所起到的作用,以及其应当注意的三个环节。