大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型的铁状态

目的:动态观察甲硫氨酸-胆碱缺乏(methionine-choline-deficient,MCD)模型饲料诱导的非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)雄性大鼠在不同时间点铁状态以及铁状态改变与NASH进展的关系。方法:48只体质量约150 g的SD大鼠随机分成两组,分别喂MCD模型饲料(模型组)和甲硫氨酸-胆碱充足模型饲料(对照组),每组再按饲养时间分为3个小组(0周组、2周组、4周组)。在不同喂养时间结束时,处死大鼠。通过HE染色观察肝脏标本脂肪变性、炎症变化。血液标本测定红细胞相关指标、血清标本测定肝酶和铁相关指标;取肝脏匀浆测定非血红素铁(non-heme iron,NHI)含量。结果:喂养2周时,模型组肝指数较对照组显著升高,肝脏病理学切片可见明显脂肪变性伴有炎性细胞浸润,血清ALT显著增加,血红蛋白浓度、红细胞比容(Hct)显著降低,平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、红细胞分布宽度(RDW)无显著差异,血清铁、转铁蛋白饱和度(TS)和NHI明显高于对照组;4周时,模型组肝组织炎症程度加深,伴有血清AST显著增加,血红蛋白浓度、Hct和RDW显著降低,TS无显著差异,血清铁显著高于对照组。结论:MCD模型饲料诱导的肝脏NASH进程中,发生肝铁过载,铁过载与NASH形成和发展初期同步,铁过载伴有血液血红蛋白浓度、Hct和RDW降低,这些降低不是铁缺乏性,其机制可能涉及骨髓造血功能抑制。

甜菜碱对大鼠肝癌的作用及其抗氧化机制研究

目的探讨甜菜碱(Bet)在二乙基亚硝胺(DEN)致大鼠肝癌过程中对肝脏病理损伤及肝功能的影响,并分析其抗氧化作用机制。方法44只雄性SD大鼠随机分为正常组(n=12)、DEN组(n=18)、DEN+1%Bet组(n=14),在0.01%DEN诱导大鼠肝癌过程中,DEN+1%Bet组应用1%Bet进行干预,观察大鼠一般情况。肝脏切片用HE染色观察病理改变;全自动生化分析仪检测丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰胺转移酶(GGT)。应用试剂盒测定肝匀浆丙二醛(MDA)含量、谷胱苷肽硫转移酶(GST)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)。结果病理结果显示DEN+1%Bet组肝脏癌变程度比DEN组轻;第8周,DEN组大鼠的肺脏指数和肾脏指数明显高于正常组,DEN+1%Bet组大鼠肺脏指数明显高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);第15周,DEN组大鼠的肝脏指数、脾脏指数、肺脏指数明显高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);第8周和第15周,DEN组大鼠的ALT、AST、ALP、GGT明显高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);第8周,DEN+1%Bet组大鼠的ALP和GGT明显高于正常组,而AST却明显低于DEN组,差异均有统计学意义(P<0.05);第15周,DEN+1%Bet组大鼠的ALT、ALP、GGT明显高于正常组,而ALT、AST却明显低于DEN组,差异均有统计学意义(P<0.05);第8周,DEN组大鼠的MDA含量、GST酶活性、T-AOC水平分别为(0.357±0.152)nmol/mg·prot、(38.62±2.55)U/mg·prot、[0.585(0.481,0.749)]U/mg·prot,明显高于正常组的(0.166±0.055)nmol/mg·prot、(27.37±2.63)U/mg·prot和[0.293(0.208,0.319)]U/mg·prot,而DEN+1%Bet组大鼠的MDA含量为(0.145±0.068)nmol/mg·prot,却明显低于DEN组的MDA含量,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论1%Bet能够减弱DEN对大鼠肝脏的诱癌效应,具有抗脂质过氧化能力,在DEN致大鼠肝癌过程中起到一定作用。

高脂饮食与1,2-二甲基肼对大鼠肠道的作用及抗氧化机制研究

目的研究高脂饮食与1,2-二甲基肼(DMH)对回肠及结肠的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将30只SD大鼠按照随机分组的方法分为对照组、DMH组和DMH+高脂组,每组10只。除对照组外,另外两组大鼠颈部皮下注射0.4%的DMH溶液,对照组和DMH组给予普通饲料,DMH+高脂组给予高脂饲料,实验第15 d,处死大鼠后制作回肠及结肠切片,采用HE染色法观察肠道病理;制作回肠和结肠匀浆,按试剂盒说明方法,分别检测各组大鼠肠组织匀浆的总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量,超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性。结果DMH组大鼠体质量增长缓慢,第6天后低于对照组和DMH+高脂组,差异均有统计学意义(P<0.05);实验第15天,注射DMH的两组大鼠均见回肠和结肠损伤,DMH组大鼠回肠湿重和结肠湿重分别为(40.54±4.15)mg/cm和(63.79±5.07)mg/cm,DMH+高脂组分别为(41.60±5.06)mg/cm和(62.47±4.96)mg/cm,明显低于对照组的(47.96±4.69)mg/cm和(69.25±3.61)mg/cm,差异均具有统计学意义(P<0.05);对照组、DMH组、DMH+高脂组大鼠回肠T-AOC分别为(1.939±0.546)U/mg、(2.669±0.737)U/mg、(3.338±0.539)U/mg,结肠T-AOC分别为(0.5637±0.054)U/mg、(0.7846±0.094)U/mg、(0.7886±0.100)U/mg,回肠MDA分别为(1.542±0.357)nmol/mg、(2.028±0.443)nmol/mg、(2.472±0.560)nmol/mg,结肠MDA分别为(1.502±0.350)nmol/mg、(2.217±0.629)nmol/mg、(2.368±0.406)nmol/mg,回肠SOD分别为(32.68±3.915)U/mg、(32.17±3.447)U/mg、(29.85±2.261)U/mg,结肠SOD分别为(37.58±3.583)U/mg、(33.92±3.756)U/mg、(30.73±2.697)U/mg,回肠MPO分别为(0.5938±0.059)U/mg、(0.5938±0.059)U/mg、(0.6809±0.079)U/mg,结肠MPO分别为(0.6218±0.036)U/mg、(0.7756±0.066)U/mg、(0.7649±0.086)U/mg,回肠NO分别为(1.513±0.389)μmol/g、(2.237±0.523)μmol/g、(2.113±0.620)μmol/g,结肠NO分别为(1.561±0.243)μmol/g、(2.094±0.545)μmol/g、(2.372±0.435)μmol/g,注射DMH的两组大鼠回肠和结肠中T-AOC、MDA、MPO和NO明显高于对照组,而结肠中SOD明显低于对照组,其中DMH+高脂组大鼠的T-AOC、MDA明显高于DMH组,而SOD水平明显低于DMH组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高脂饮食可加重DMH所致的肠道损伤,促进肠道氧化-抗氧化系统失衡,在诱发大鼠结肠癌的过程中可能起重要作用。

长期运动和不同铁含量饮食对大鼠海马中NO含量及NOS活力的影响

目的通过分别给予大鼠不同铁含量的饮食,观察长期运动和不同铁含量饮食对大鼠海马中一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活力的影响。方法采用刚断乳雌性SD大鼠105只,随机分为3组:ID组(低铁含量12 mg/kg)、CN组(标准铁含量45 mg/kg)和SU组(高铁含量1 000 mg/kg),用相应的铁含量饲料喂养1个月后,每组取15只大鼠,测定海马NO含量及NOS诱导型NOS(i NOS)和结构型NOS(c NOS)活力。其余的大鼠每组再进一步分为运动组和静息组,运动组大鼠进入游泳期(运动强度为120 min/d,5 d/周,持续1个月);静息组除不进行运动外,其余处理与相应的运动组相同。在末次运动后,所有大鼠禁食24 h,戊巴比妥钠麻醉下取全脑,冰上快速分离出海马,测定NO含量及i NOS、c NOS活力。结果 1大鼠在3种不同铁含量饮食1个月后,与标准铁组对比,海马高铁组NO含量、c NOS活力差异均无统计学意义(P>0.05);低铁组NO含量和c NOS活力均降低(P<0.05),而高铁组和低铁组i NOS活力差异均无统计学意义(P>0.05)。2高铁含量饮食时,与静息组比,运动组NO含量(t=2.262,P<0.05)和c NOS活力(t=5.651,P<0.01)均升高,而i NOS活力升高但差异无统计学意义(t=0.622,P>0.05)。标准铁含量饮食时,与静息组对比,运动组NO含量(t=2.935,P<0.01),c NOS活力(t=5.257,P<0.01)显著升高,i NOS活力(t=1.001,P>0.05)。低铁含量饮食时,与静息组对比,运动组NO含量升高(t=2.731,P<0.05)、i NOS活力(t=6.118,P<0.01)、c NOS活力(t=8.423,P<0.01)升高。结论饮食铁缺乏可使海马中c NOS活力降低,NO合成减少。不同铁含量饮食下长期运动均会引起海马中c NOS活力升高,NO合成增多。而在饮食铁缺乏的情况下,长期运动会使i NOS活力升高,对机体造成毒性作用。