芫花根醇提颗粒联合甲基泼尼松龙对脊髓损伤大鼠BDNF、NMDA表达及行为学的影响

目的研究芫花根醇提颗粒（金腰带）联合甲基泼尼松龙对脊髓损伤（spinal cordinjury,SCI）大鼠行为学、脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）表达及N-甲基-D-门冬氨酸（N-methyl-D-aspartate,NMDA）水平的影响。方法 SD成年雄性大鼠,随机分为假手术组、脊髓挫伤组（模型组）、金腰带组[灌胃金腰带50 mg/（kg·d）,共5天]、甲基泼尼松龙组（脊髓钝挫伤术后8 h内肌肉注射50 mg/kg甲基泼尼松龙,此后甲基泼尼松龙剂量每天减少10 mg/kg,共5天）及联合组（金腰带和甲基泼尼松龙联合干预）。各组大鼠均在术后（0、3、7、28天）进行后肢行为学评价[神经行为学（Basso Beattie and Bresnahan,BBB）评分]。术后13天,每组取8只大鼠,麻醉后取损伤脊髓T（8-10）液氮中保存,采用[-3H]MK-801放射性配基分析法测定NMDA受体亲和力（Kd）和最大结合数量（Bmax）;取术后28天大鼠损伤脊髓,采用免疫组织化学法检测BDNF表达。结果与假手术组比较,模型组腹角和背角BDNF阳性神经元数量升高,Bmax（470±34）升高,Kd降低,术后3-28天BBB评分降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。与模型组比较,各给药组BDNF阳性神经元数量及Kd升高,术后3-28天BBB评分升高（P〈0.05）,Bmax[甲基泼尼松龙组：660±15,金腰带组：646±25,联合组：510±21]降低（P〈0.05）。与甲基泼尼松龙组比较,金腰带组及联合组BDNF阳性神经元数量及Kd升高（P〈0.05）,术后7-28天BBB评分升高（P〈0.05）,Bmax降低（P〈0.05）。与金腰带组比较,联合组BDNF阳性神经元数量及Kd升高（P〈0.05）,Bmax降低（P〈0.05）。结论金腰带能有效改善SCI大鼠后肢运动功能,增加脊髓组织中BDNF的表达,通过影响脊髓NMDA受体减轻脊髓继发性损伤,对SCI有一定的治疗与保护作用,效果优于甲基泼尼松龙且与其有协同作用。

金腰带治疗对大鼠损伤脊髓BDNF、NMDA受体表达及行为学的影响

目的研究中草药金腰带治疗对脊髓损伤(SCI)大鼠行为学、脑源性神经营养因子(BDNF)表达及N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体水平的影响。方法 SD成年雄性大鼠,随机分为假手术组、脊髓挫伤组(SCI组)、脊髓挫伤后金腰带治疗组〔每日1次胃内灌服金腰带50mg/(kg.d),共7次〕。各组大鼠均在术后(0d、3d、10d、28d)进行后肢行为学评价(BBB运动功能评分)。术后13d,每组取8只大鼠麻醉后取损伤脊髓T10液氮中保存,采用[3 H]MK-801放射性配基分析法测定NMDA受体亲和力(Kd)和最大结合数量(Bmax);取术后28d组大鼠损伤脊髓进行免疫组织化学染色,观察BDNF在脊髓的定位及表达变化。结果 BBB评分SCI组大鼠各时间点均低于假手术组(P均<0.05),而金腰带治疗组术后各时间点均高于SCI组(P均<0.05)。SCI后13d,脊髓内NMDA受体Bmax较假手术组增高(P<0.05),金腰带组较SCI组减少(P<0.05);SCI后28d损伤处脊髓腹角、背角BDNF阳性神经元数量较假手术组增加(P<0.05),金腰带治疗组BDNF阳性神经元数量较SCI组进一步增加(P<0.05)。结论金腰带治疗能有效改善SCI大鼠后肢运动功能,增加脊髓组织中BDNF的表达和通过影响脊髓NMDA受体减轻脊髓继发性损伤,对SCI有一定的治疗与保护作用。

骨髓单个核细胞移植对大鼠损伤脑组织BDNF表达的调节

目的探讨骨髓单个核细胞移植对创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、脑外伤组(TBI组)和TBI+单核细胞移植治疗组。建立自由落体TBI大鼠脑损伤模型,取骨髓分离纯化单个核细胞(5×106/mL),经颈动脉注射移植(单核细胞移植治疗组大鼠每只注射1mL)。各组动物分别于TBI后第1、3、7、10d进行神经功能缺损评分(NSS)。TBI后7d取损伤处脑组织行RT-PCR检测BDNF mRNA表达,TBI后10d取损伤处脑组织行原位杂交和免疫组化染色,确定BDNF mRNA和蛋白的细胞定位,计数BDNF阳性细胞数量变化。结果骨髓单个核细胞移植治疗明显减少TBI大鼠NSS评分,与TBI组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。BDNF主要分布于皮质神经元,移植组BDNF mRNA和蛋白表达水平均明显上调(P均<0.05)。结论单个核细胞移植能改善TBI大鼠神经功能,减少神经功能缺损。其机制可能与BDNF表达上调有关。