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红花DHDPS基因全长cDNA的克隆及植物表达载体构建 被引量:1
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作者 王艳芳 张玲 +15 位作者 韩红祥 于洋 臧埔 毛欣欣 马吉胜 买地努尔.买合木提 方阔 丁玲 杨小萍 蒋杰 雷锋杰 包京姗 王壮 尹春梅 李海燕 李校堃 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1629-1634,共6页
目的克隆红花赖氨酸生物合成途径关键酶二氢吡啶二羧酸合酶(dihydrodipicolinate synthase DHDPS)基因的全长c DNA序列,构建植物超表达载体。方法根据红花转录组文库注释信息获得红花DHDPS(CtDHDPS)基因的中间序列,通过RT-PCR与RACE技... 目的克隆红花赖氨酸生物合成途径关键酶二氢吡啶二羧酸合酶(dihydrodipicolinate synthase DHDPS)基因的全长c DNA序列,构建植物超表达载体。方法根据红花转录组文库注释信息获得红花DHDPS(CtDHDPS)基因的中间序列,通过RT-PCR与RACE技术从红花种子中克隆CtDHDPS基因全长c DNA序列。采用DNA重组技术构建p BASTA-CtDHDPS植物超表达载体。结果分离CtDHDPS基因全长1 309 bp,开放阅读框954 bp,编码317个氨基酸,编码蛋白理论等电点为5.93,相对分子质量约为34 750.79。通过DNA重组技术成功构建了植物超表达载体p BASTA-CtDHDPS。结论获得CtDHDPS基因全长c DNA序列并成功构建植物超表达载体,为阐明CtDHDPS基因的生物学功能及其在红花赖氨酸生物合成途径中作用机制提供科学依据。 展开更多
关键词 红花 二氢吡啶二羧酸合酶 RACE 生物信息学分析 植物表达载体
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