大黄酚对慢性乙型病毒性肝炎大鼠肝功能损伤及肝脏纤维化作用及机制研究

目的探讨大黄酚对慢性乙型病毒性肝炎(CHB)大鼠肝功能损伤及肝脏纤维化的影响,并分析相关作用机制。方法60只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组及大黄酚低、高剂量(7.5、30 mg/kg)组和拉米夫定(10 mg/kg)组,每组12只。除对照组外,其余各组均尾iv乙型肝炎病毒(HBV)抗原构建CHB模型,造模成功后个给药组ip相应药物。采用全自动生化分析仪检测大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、羟脯氨酸(HYP)水平;苏木精–伊红(HE)染色及Masson染色观察大鼠肝脏组织病理形态学及纤维化;Western blotting法检测大鼠肝脏组织中相关蛋白表达。结果与模型组比较,大黄酚7.5、30 mg/kg组和拉米夫定组大鼠血清中ALT、AST、TBIL、HA、LN、HYP水平均降低(P<0.05),大鼠肝组织病理性损伤和胶原纤维沉积显著改善,肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原α1基因(COL1A1)、葡萄糖调节蛋白(GRP)78、GRP94及磷酸化真核生物翻译起始因子2α(p-eIF2α)/eIF2α、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)/PERK均显著降低(P<0.05);且大黄酚30 mg/kg组、拉米夫定组大鼠血清和肝组织中上述指标均显著优于大黄酚7.5 mg/kg组(P<0.05)。结论大黄酚可能通过调控内质网应激减轻CHB大鼠肝功能损伤,改善大鼠肝纤维化。

川芎嗪通过AMPK/SIRT1通路介导的自噬在急性肝衰竭中的作用及其机制研究

目的 探讨川芎嗪对脂多糖(LPS)/D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导的急性肝衰竭小鼠的作用及其机制。方法 将C57BL/6J小鼠随机分对照组、模型组、川芎嗪组、川芎嗪联合SIRT1抑制剂(EX527)组,每组10只。通过ip LPS/D-GalN构建急性肝衰竭小鼠模型,检测血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的水平;苏木精–伊红(HE)染色检测肝组织病理学变化;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β和环氧化酶-2(COX-2)mRNA水平;检测肝组织中氧化应激因子谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;Western blotting检测肝组织中沉默调节蛋白1(SIRT1)、磷酸化单磷酸腺苷活化蛋白激酶α(p-AMPK)α/AMPKα蛋白和自噬相关蛋白人微管相关蛋白1轻链3(LC3)-II/LC3-I、p62的水平。结果 与模型组比较,川芎嗪组小鼠血清ALT和AST水平均显著降低,肝细胞坏死区域以及炎症细胞浸润明显减少,肝组织中MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β、COX-2 mRNA和p62蛋白水平均显著降低,SOD、GSH、SIRT1、p-AMPKα/AMPKα、LC3-II/LC3-I蛋白水平显著升高(P<0.05)。EX527处理后显著逆转了川芎嗪对急性肝衰竭小鼠的作用。结论 川芎嗪通过抑制LPS/D-GalN诱导的急性肝衰竭小鼠炎症反应发挥肝脏保护作用,其机制可能与AMPK/SIRT1信号通路和自噬有关。