我国登革2 型病毒株 N S1 基因的克隆与表达

目的：通过对登革病毒 Ｎ Ｓ１ 基因的表达，研究表达的 Ｎ Ｓ１ 蛋白的抗原性，为研制新型登革疫苗提供依据。方法：采用 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 和分子克隆技术将扩增的 Ｎ Ｓ１ 基因插入到ｐ Ｂ Ｖ２２０ 载体中，通过温控诱导进行外源蛋白的表达，用 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 和蛋白质印迹法分别测定表达产物的相对分子质量及特异性。结果：获得正向插入的 Ｎ Ｓ１ｐ Ｂ Ｖ２２０ 重组质粒，表达产物的相对分子质量约为５１ ０００，与预期大小一致，并且可与登革 ２ 型病毒的腹水抗体起特异反应。结论：构建的 Ｎ Ｓ１ 基因ｐ Ｂ Ｖ２２０ 重组质粒所表达的蛋白为我国登革 ２ 型病毒株所特有。