烟台地区EBV相关胃癌临床病理特征及病毒基因分型

目的明确烟台地区EB病毒(EBV)相关胃癌(EBVaGC)的临床病理特征和病毒基因分型,探讨病毒基因变异与EBVaGC发生的相关性。方法收集烟台地区653例胃癌组织标本和116例健康人群咽漱液(TW)标本,分别采用原位杂交和PCR技术检测筛选EBV阳性标本;PCR结合限制性片段长度多态性及测序检测EBV阳性标本中1/2分型、C/D分型和F/f分型。结果共筛选和鉴定EBVaGC标本40例(6.1%)和EBV阳性TW标本42例(36.2%)。与EBV阴性胃癌比较,EBVaGC在男性中的检出率高于女性(χ2=4.998,P<0.05),在胃底贲门、胃体的检出率高于胃窦(χ2=22.766,q=4.290、5.724,P<0.05),低分化腺癌的检出率高于高分化腺癌、中分化腺癌和黏液腺癌(χ2=17.013,q=3.219～5.041,P<0.05)。40例EBVaGC中1/2型、C/D型和F/f型EBV的比例分别为90.0%/10.0%、42.5%/57.5%和97.5%/2.5%,42例TW标本中3种基因分型的比例分别为81.0%/19.0%、69.0%/31.0%和92.9%/7.1%。EBVaGC和健康人群之间1/2型、F/f型的分布差异均无统计学意义,而EBVaGC中D型EBV的检出率高于健康人群,差异有显著性(χ2=5.863,P<0.05);3种基因型综合分析,1DF型在EBVaGC的检出率高于健康人群(P=0.009)。结论烟台地区EBVaGC占胃癌的6.1%,好发于男性,主要发生在胃底贲门区和胃体(中上2/3),以低分化腺癌多见;EBVaGC中以1型、F型和D型EBV为主,D型变异可能与EBVaGC相关。

人工关节置换术感染预防与持续改进分析

目的预防性管理措施改进对人工关节转换术术后感染的影响。方法收集山东省烟台市烟台山医院收治的309例施行人工关节置换术的患者，按改进前后时间将患者分为改进前组（94例）和改进后组（215例）。对2组患者术中空气、主刀人员的手、手术护士的手进行细菌采集，观察改进前与改进后的细菌生长情况。结果改进后组空气培养有细菌生长率与改进前组比较，差异有统计学意义[59．5％（128／215）比73．4％（69／94）]（P〈0．05）。空气培养中的细菌有微球菌、棒状杆菌、溶血葡萄球菌、奈瑟菌、柘草芽孢杆菌、黏质沙雷菌。改进后组主刀人员、护士手培养的有细菌菌生长率与改进前组比较，差异有统计学意义[1．9％（4／215）比6．4％（6／94）]（P〈0．05）。空气、主刀人员、护士手细菌培养中的细菌有微球菌、棒状杆菌、溶血葡萄球菌、奈瑟菌、枯草芽胞杆菌、黏质沙雷菌、表皮葡萄球菌、鲍曼不动杆菌。结论加强手术室感染管理，层流设备定期检测消毒，对人工关节置换术后感染的预防起重要作用。

重视戊型肝炎在医院感染中的预防

随着医学科技的发展和医学检验水平的提高,戊型肝炎的检出率不断提高,我院在1个月内就检出3例戊型肝炎,经临床确认为戊型肝炎.对戊型肝炎目前尚无特殊的治疗方法,对其研究已成热门,因此预防已成为关键.

2型糖尿病家系一级亲属同胞代谢综合征患病状况的研究

研究2型糖尿病(T2DM)家系一级亲属同胞(n=142)和同胞配偶中的无糖尿病家族史的一级亲属同胞(n=138)代谢综合征(MS)的患病状况,结果显示T2DM家系一级亲属同胞MS的患病率显著高于无糖尿病家族史的一级亲属同胞(P<0.01)。

关节手术病人血浆凝血酶-抗凝血酶复合物的研究

目的 通过监测凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）、血凝常规等指标的动态变化，来探讨髋、膝关节手术病人血栓前状态和血液中凝血系统的变化，以及各指标与深静脉血栓形成（OVT）的相关性。方法选取需行髋、膝关节置换术的病人85例，随机分为以下2组：①关节手术组：44例，男23例，女21例，年龄49。82岁，平均65．2±16．4岁；②保守治疗组：41例，男24例，女17例，年龄57—81岁，平均69．1±11．7岁。取我院查体中心健康查体人员为对照组：35例，男19例，女16例，年龄52—82岁，平均66．8±14．8岁。以上各组病例均排除栓塞性疾病，肿瘤，结缔组织病，胃、十二指肠溃疡，严重肝肾疾患，严重心脑血管疾病，血液病以及血小板计数低于正常者；近期（1个月内）无严重感染病史、手术及外伤史；近期（1个月内）无服用抗血小板药、抗凝药及影响凝血一纤溶活性的药物史。每组病人术前及术后1、4、7、10天检测TAT、血凝常规等指标（非手术组入院第3天定为术后1天，依次类推）；术前及术后第7—10天应用彩色多普勒超声仪监测DVT。结果①手术组共有18例（40．9％）术后并发DVT，保守组共有9例（22．0％）并发DVT，对照组无DVT发生；②手术组术后并发DVT者术前及术后TAT均显著升高。结论术后并发DVT者术前平均TAT水平显著高于未并发DVT者，因此术前TAT检测可作为术后是否并发DVT的一项较有意义的预测指标。

吡格列酮对非酒精性脂肪性肝病大鼠血小板源生长因子-B和基质金属蛋白酶抑制因子-2表达的影响

目的:观察吡格列酮对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织血小板源生长因子B(PDGF-B)和基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响,并研究吡格列酮防治NAFLD发病和进展的疗效及作用机制。方法:选用雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型对照组和吡格列酮组,每组20只。正常对照组大鼠给予普通饲料,其余组均给予高脂饲料;吡格列酮组大鼠在高脂饮食8周后吡格列酮10ml.kg-1.d-1灌胃。于第20周结束时将3组动物处死,取材备检。结果:①肝组织病理变化:模型对照组动物肝细胞均出现中、重度大泡性脂肪变、有明显的炎细胞浸润聚集,吡格列酮组肝细胞也出现较明显的脂肪变和炎症表现,但较模型对照组病变轻。②TIMP-2染色指数3组分别为1.22±0.31,4.52±0.61,1.89±0.45,PDGF-B表达面积3组分别为(0.82±0.13)、(3.79±0.32)、(0.91±0.27)μm2,模型对照组明显高于其他两组(P<0.05),吡格列酮干预后TIMP-2染色指数和PDGF-B表达面积明显降低(P<0.05)。结论:在高脂饮食诱导的NAFLD模型中PDGF-B和TIMP-2表达增强,吡格列酮可以明显改善模型动物肝脏脂肪变性、炎症活动、纤维化变性程度,同时能降低PDGF-B和TIMP-2表达水平,有抗炎、抗纤维化作用。

肺炎支原体黏附蛋白P30的高效表达及初步应用

目的:克隆表达肺炎支原体黏附蛋白P30,为临床诊断试剂和疫苗研制打下基础。方法:采用大肠杆菌优势密码子设计P30蛋白优化基因序列,采用Genscript软件评价设计基因的密码子适应指数(CAI),并利用载体p BVIL1实现P30优势表位基因在大肠杆菌中的表达,采用ELISA法对纯化的P30抗原活性进行测定。结果:野生P30基因的CAI为0.59,优化P30基因的CAI为0.84;在大肠杆菌中表达的IL1-P30融合蛋白的相对分子质量为43.5×103,纯化后的重组抗原能与肺炎支原体感染者血清发生特异性免疫反应,灵敏度和特异性分别为82.35%和89.36%,ROC曲线下面积为0.9088。结论:采用密码子优化技术实现了肺炎支原体黏附蛋白P30在大肠杆菌中的高效表达,获得的重组P30蛋白具有很好的抗原性,可用于肺炎支原体诊断试剂的研究。

甲胎蛋白异质体AFP—L3鉴别良恶肝病及预警肝癌的研究

目的研究微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体（AFP—L3）用于鉴别良恶性肝病及对肝细胞癌的预警。方法147例AFP升高（主要为低浓度阳性）的肝病患者血清，同时检测AFP-L3％含量，对AFP—L3%异常升高者、正常者进行临床病理核对，分析AFP—L3%升高作为鉴别良恶性肝病的新指标是否比单纯检测AFP更为准确有效；并对疑似HCC的19例肝病患者结合6个月后临床诊断结果，分析AFP-L3％〉10％对肝癌的预警作用。结果AFP升高的患者中AFP—L3％值与AFP值无相关性；AFP—L3％〉10％对肝癌诊断敏感度为89．1％；诊断特异度为94．4％；总有效率为90．6％。AFP—L3〉10％发生肝癌的危险性比AFP—L3％〈10％增加了6．88倍。结论以AFP-1．3％〉10%做为诊断标准对区分良恶肝病具有良好的临床意义；AFP—13％〉10％可以做为肝细胞癌的预警。

AFP、AFP-L3、GP73联合检测在肝癌诊断中的应用

目的 检测不同患者样本中甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白异质体（AFP-L3）以及高尔基体蛋白73（GP73）的含量,研究AFP、AFP-L3、GP73在肝癌诊断中的应用.方法 收集肝癌患者样本、肝炎肝硬化样本以及正常健康人员样本,用电化学发光法检测AFP、AFP-L3及用ELISA法检测GP73含量.结果 1.本研究显示：AFP-L3%〉10%对肝癌诊断敏感度为89.1%;诊断特异度为94.4%[1];2.在101例肝癌标本中,GP73的阳性率为72.28%,AFP的阳性率37.62%,经过卡方检验,两者具有显著性差异（χ2=18.86,p〈0.01）;3.在所有非肝癌患者中,GP73的诊断特异性为93.44%;AFP的诊断特异性为86.48%.结论 AFP-L3、GP73 用于诊断肝癌效果明显优于AFP,可以显著提高对肝癌诊断的灵敏度和特异性,而且AFP-L3、GP73 相比AFP更不容易受到肝部炎症和其他部位肿瘤的影响.结合本人早期研究结果,将GP73、AFP-L3、AFP联合起来检测,能更好更快的对肝癌做出早期诊断.

急性脑卒中病人血浆肾素活性与血管紧张素Ⅱ水平测定的意义

急性脑卒中病人血浆肾素活性与血管紧张素Ⅱ水平测定的意义于群涛于传亭祁学文（烟台市烟台山医院２６４００１）为了解急性脑卒中病人血浆肾素活性（ＰＲＡ）与血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）水平及其与植物神经功能紊乱的关系，自１９９５年１月以来，我们对３７例急性脑血管病...

关节手术病人血浆凝血酶-抗凝血酶复合物、纤溶酶-α_2抗纤溶酶复合物的研究

目的探讨髋、膝关节手术病人血栓前状态和血液中凝血-纤溶系统的变化。方法每组病人术前及术后1、4、7、10天检测TAT、PAP、血凝常规等指标;术前及术后第7天￣10天应用彩色多普勒超声仪监测DVT。结果①手术组共有18例(40.9%)术后并发DVT,保守组共有9例(22.0%)并发DVT,对照组无DVT发生;②手术组术后并发DVT者术前及术后TAT均显著升高,而PAP水平较低;③术后并发DVT者与术前PAP/FB比值相关。结论①术前TAT检测可作为术后是否并发DVT的一项较有意义的预测指标。②术前较低的纤溶水平可能成为髋、膝关节置换术后DVT发病率高的原因之一。③术前血浆PAP/FB比值有望成为预测术后DVT的有用指标。

烟台市新生儿苯丙酮尿症的筛查及基因突变分析

目的:分析细菌抑制法、荧光法、串联质谱法对烟台市新生儿苯丙酮尿症筛查的结果,并对阳性患儿的基因突变情况进行分析。方法:选取2005年6月-2021年6月烟台市辖区各级医院送检进行苯丙酮尿症筛查的695178例新生儿作为研究对象,筛查方法:细菌抑制法267950例,荧光免疫法424753例,串联质谱法2475例。比较3种方法的阳性确诊率。在确诊为苯丙酮尿症的阳性患儿中随机抽取40例做质谱基因分析,寻找可能的致病突变位点。结果:苯丙酮尿症筛查的3种方法中,串联质谱法阳性确诊率高于其他2种方法,差异有统计学意义(P<0.05);40例阳性患儿中,发现31个致病基因突变;80条染色体上共发现75个突变位点,基因突变检出率达93.75%。结论:串联质谱法可降低假阳性率,提高准确性。烟台市苯丙酮尿症患儿基因突变存在多样性,基因突变谱与其他地区的报告不完全相同。

探讨串联质谱技术在遗传代谢病诊断中的应用价值

目的:探讨串联质谱技术联合丙酰肉碱(C3)、乙酰肉碱(C2)、C3/C2和蛋氨酸(Met)检测在遗传代谢病诊断中的应用价值。方法:选取2014年1月-2022年11月在烟台市烟台山医院检验科筛查并确诊的甲基丙二酸血症患儿14例为研究组,选取同期健康儿童30例为对照组。比较两组C3/C2和Met水平,苯丙酮尿症单一检测和联合检测可疑阳性[苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)、Phe/Tyr],原发性肉碱缺乏症患儿初筛时与治疗后水平[游离肉碱(C0)、C2]。结果:研究组C3/C2比值高于对照组,研究组Met水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验方法Phe、TYr、Phe/Tyr联合检测阳性预测值高于Phe检测,差异具有统计学意义(P=0.021);治疗后C0、C2水平高于初筛时水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:甲基丙二酸血症C3/C2和Met联合判读对甲基丙二酸血症诊断精准;苯丙酮尿症Phe、Tyr、Phe/Tyr联合指标判读有效降低了可疑患儿的召回率;原发性肉碱缺乏症治疗前与治疗后C0、C2值比对有利于鉴别与原发性肉碱、母源性肉碱。串联质谱技术在遗传代谢病诊断中具有应用价值。

Stat3-siRNA表达质粒在AFP阳性肿瘤基因治疗中的应用

目的设计和构建针对stat3基因的siRNA表达框架,并在肝癌细胞中观察其干扰效果。方法 stat3合成并修饰靶序列后PCR扩增siRNA表达框架,通过脂质体介导,直接将扩增产物转染至肝癌细胞HepG2中,48 h后提取细胞总RNA进行RT-PCR和Western blot检测干扰效果。结果 RT-PCR结果显示HepG2细胞内靶基因sTAT3 mRNA水平比空白组和阴性对照组明显下降(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,转染stat3-siRNA的细胞与阴性对照组、空白对照组比较在G1期出现明显阻滞,在G1期出现的阻滞为(78.17±21.73)%,凋亡率达(21.39±9.47)%,与空白组和阴性对照组比较有明显差异(P<0.01)。结论本实验成功设计并构建的siRNA表达框架能干扰人肝癌HepG2细胞内sTAT3基因的表达。