甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌SCCmec耐药元件及其菌株间水平转移机制

金黄色葡萄球菌（金葡菌）是人及动物正常菌群的重要组成成分。部分金葡菌可导致疾病,引起皮肤、黏膜等处的化脓性感染,甚至导致菌血症、中毒性休克综合征等危及患者生命的严重疾病,是医院感染和社区获得性感染的重要病原菌之一。自1961年出现以来,耐甲氧西林金葡菌（MRSA）的感染率逐年攀升[1]。

金黄色葡萄球菌N315T7噬菌体cDNA展示文库的构建

目的构建MRSA N315菌株的T7噬菌体cDNA展示文库，以筛选和鉴定影响N315 ccr基因表达的调节因子。方法 采用Tripure试剂提取N315总RNA，逆转录合成双链cDNA，经末端修平、接头连接、酶切后柱洗脱等处理后，连接T7Select 10-3载体，体外包装扩增获得N315 T7噬菌体cDNA展示文库；通过双层平板实验鉴定所建原始文库及扩增文库的库容；PCR鉴定文库插入片段质量。 结果原始文库重组克隆数为1.335×106 pfu，扩增文库的噬菌体滴度为3.26×1010 pfu/mL。随机PCR扩增显示文库阳性重组率为100%，插入片段在300～1 500 bp之间。结论 MRSA N315的T7噬菌体cDNA展示文库构建成功。

金黄色葡萄球菌转座文库构建与持留突变株研究

目的利用Tn917转座子构建金黄色葡萄球菌(简称"金葡菌")转座突变文库,从构建好的文库中筛选到持留性突变菌株。方法将含有Tn917的pID408质粒电转化入金葡菌Newman株,利用高温及红霉素诱导使其发生转座作用,建立转座子文库并对其进行质量评价;通过对稳定期24 h及36 h菌液予以100 MIC达托霉素处理,之后计数活菌数目的方法,比较文库中筛选到的特定菌株T18、T18s与野生株的持留性差异。结果建立了金葡菌Newman株转座子文库,从中随机挑取19个文库子,进行转座子插入位点测定,证实其插入随机性良好。在培养24 h和36 h两个时相点,野生株、T18及T18s株之间持留性存在不同程度的差异。结论成功构建了插入随机性良好、可用于多种研究的金葡菌转座子文库,并从中得到持留性变化菌株,且不同生长时间点各株细菌之间表现出持留性差异。

细菌Ⅶ型分泌系统的研究进展

细菌分泌系统参与细菌物质转运,是细菌蛋白或DNA胞外分泌的重要途径,与细菌的生长和致病性密切相关。迄今为止,已发现了Ⅰ-Ⅶ型分泌系统。Ⅰ-Ⅵ型分泌系统存在于革兰阴性菌中,其中Ⅳ型也存在于革兰阳性菌中;Ⅶ型则存在于革兰阳性菌中。Ⅶ型分泌系统是近年来发现的一种特殊分泌系统,能介导病原微生物毒力蛋白分泌,与宿主相互作用,并参与细菌体内锌铁平衡等,在革兰阳性菌的生长代谢及致病过程中发挥重要作用。本文综述细菌Ⅶ型分泌系统的类型、功能及表达调控,以增进对这一新型细菌蛋白分泌机制的认识。