三头摩拉水牛公牛冻精后代初生重与繁殖性能分析

本研究收集了三头摩拉水牛公牛冻精2000-2015年间所有雌性后代F1、F2代的活力、初生重、初产月龄、不同胎次产犊间隔数据,对其进行比较分析,以期为公牛选育和配种计划制定提供数据参考。结果显示,三头公牛后代活力、产犊间隔差异不显著,F1代初生重、初产月龄差异显著,其中B50后代初生重显著高于其他公牛,B36后代初产月龄显著小于其他公牛,B40后代初生重显著低于其他两头公牛,初产月龄显著大于其他两头公牛。可以得出,公牛B50后代初生重较高、初产月龄小,可以作为配种首选。

奶水牛同期发情效果的影响因素研究

本实验旨在探讨不同药物处理、季节和生产阶段对奶水牛同期发情效果的影响,为进一步优化并提高同期发情效果提供依据。选择2~8岁、体重350~700 kg的本地奶水牛90头(后备牛40头、经产牛50头)。试验一:选取33头后备牛,随机分为2组,采用GnRH+PGF_(2α)+GnRH法(GnRH组)和CIDR+PGF_(2α)法(CIDR组)处理,在秋季观察其同期发情效果;试验二:选取40头后备牛,采用GnRH+PGF_(2α)+GnRH法处理,观察春季、秋季和冬季奶水牛同期发情效果;试验三:选用17头后备牛和50头经产牛,采用GnRH+PGF_(2α)+GnRH法处理,观察不同生产阶段奶水牛同期发情效果。结果表明:GnRH组和CIDR组的发情率、排卵率分别为94.12%、81.25%和81.25%、76.92%;冬季、秋季发情率(100.00%、94.12%)均高于春季(58.33%)(P<0.01),秋、冬两季差异不显著;排卵率由高到低依次为冬季(90.91%)、秋季(81.25%)、春季(57.14%)(P>0.05);后备牛和经产牛的发情率分别为94.12%和96.00%(P>0.05),排卵率分别为81.25%和97.92%(P<0.05)。可见,GnRH组和CIDR组的同期发情效果无显著差异;季节会影响奶水牛的同期发情效果,秋、冬季进行同期发情较为适宜;经产牛的同期发情效果比后备牛好,可能是后备牛生殖系统还未发育成熟,一定程度上影响其排卵。

基于GEO数据库筛选与水牛肌内脂肪沉积相关的候选基因及生物信息学分析

【目的】筛选与水牛肌内脂肪沉积相关的关键基因,为挖掘改善水牛肌内脂肪沉积的分子标记提供参考。【方法】通过GEO数据库下载GSE19586数据集,使用limma R语言程序包筛选广西水牛和青海牦牛36月龄背最长肌的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),使用clusterProfiler R语言程序包分别对上调、下调的DEGs进行GO功能和KEGG通路富集分析,使用STRING在线软件对DEGs进行蛋白互作(PPI)网络分析,并使用Cytoscape 3.9.1软件对其结果进行可视化,筛选排名前二十的枢纽基因。【结果】本研究共筛选出254个DEGs,其中61个上调,193个下调。GO功能富集结果显示,上调DEGs主要富集于肌动蛋白-肌球蛋白细丝滑动、肌球蛋白复合体、肌球蛋白结合、甘油三酯代谢、酰基甘油代谢、中性脂代谢、细胞凋亡信号通路调控等过程;下调DEGs主要富集于短链脂肪酸代谢、不饱和脂肪酸代谢、细胞对酮的反应、细胞基质连接、脂蛋白合成及蛋白质的成熟、加工、聚合等过程。KEGG通路富集结果显示,上调DEGs主要参与代谢途径、脂肪细胞因子、胰岛素抵抗、磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、甲状腺激素信号转导途径和碳水化合物消化吸收等信号通路;下调DEGs主要参与代谢途径、吞噬体、溶酶体、黏着斑和细胞凋亡等信号通路。PPI网络中共有116个节点和205条连线,其中上调蛋白26个,下调蛋白90个;筛选出的前20个枢纽基因分别为ACTB、PPARGC 1、NR3C 1、FOS、GOT 2、SERPINE 1、RAC 1、LEP、STAT 5 B、HPRT 1、DDC、FABP 1、HDAC 1、RHOA、EEF 1 A 1、PCK 1、SOD 2、PRKCB、GPX 1和CTGF。【结论】本研究共筛选出广西水牛和青海牦牛36月龄背最长肌DEGs 254个,挖掘到可能与水牛肌内脂肪沉积相关的候选基因MYH 3、GPX 1、LDLR、LEP和PCK 1,为寻找改善水牛肌内脂肪沉积的分子标记提供了理论基础。

水牛ACSL基因家族全基因组及表达分析

为鉴定水牛长链脂酞辅酶A合成酶(long-chain fatty Acyl-CoA synthetases,ACSLs)的家族成员并探究该基因家族在泌乳方面的功能,通过生物信息学技术对水牛ACSL基因家族进行了motif、基因结构分析、共线性分析、不同物种系统进化分析,运用qPCR技术检测ACSLs在不同组织的mRNA表达量。结果表明:水牛ACSL基因家族共有5个家族成员并分别命名为bbu.ACSL1、bbu.ACSL3、bbu.ACSL4、bbu.ACSL5和bbu.ACSL6。染色体分布情况结果显示:bbu.ACSL1位于1号染色体,bbu.ACSL3位于2号染色体,bbu.ACSL4位于25号染色体,bbu.ACSL5位于23号染色体,bbu.ACSL6位于9号染色体。这5个ACSL氨基酸数在699~722 aa,所有蛋白的等电点除ACSL6外均大于7.00。Motif分析发现,除ACSL3和ACSL4缺少motif8外,其余均含有预测出的Motif 1~10,且排序相同。物种内共线性分析结果显示,水牛和普通牛中均不存在串联重复和片段重复,种间共线性分析结果显示,水牛ACSL与普通牛ACSL存在4对片段重复基因。不同物种ACSL系统发育分析显示,ACSL基因家族具有较高的保守性,其中水牛与普通牛和牦牛的聚类更为相近。不同组织表达量分析发现ACSL1、ACSL3在乳腺组织的mRNA表达量高于其他组织,ACSL6在大脑的mRNA表达量高于其他组织,ACSL4在肺部的mRNA表达量高于其他组织,ACSL5在肝的mRNA表达量高于其他组织。根据RNA-seq测序结果分析不同泌乳时期表达量结果显示,ACSL1在整个泌乳期均有高表达量,尤其是在泌乳第50、140和280天。ACSL3和ACSL5在泌乳第7天和第50天高表达,但随着泌乳天数增加,表达量降低。ACSL4和ACSL6在泌乳第7天表达量最高,但在整个泌乳期的表达量均远低于该家族的其他3个成员。

伊犁马PRL、POU1F1基因多态性及其与产奶量的关联分析

为了研究伊犁马催乳素(PRL)基因、垂体转录因子(POU1F1)基因多态及其与产奶量之间的关系,试验以新疆伊犁昭苏牧场73头伊犁马母马为研究对象,利用PCR-RFLP技术分析了伊犁马PRL、POU1F1基因序列多态性,并与日均产奶量进行关联分析。结果显示,伊犁马PRL基因第二外显子上存在1个SNP:c.210C>T;POU1F1基因CDS区上没有发现多态,但内含子区存在1个SNP:g.2758G>A。POU1F1基因不同基因型间日均母马产奶量差异不显著(P>0.05),但PRL基因c.210位点多态对伊犁马日均产奶量有显著影响(P<0.05)。因此,PRL基因的多态位点有潜力用作伊犁马产奶量性状选育的分子标记。

摩拉水牛PRKAA2基因多态性与生长性状的关联分析

试验旨在探讨PRKAA 2基因在摩拉水牛群体中的遗传多态性及其与生长性状的关联性,进而得到显著相关的遗传标记,为摩拉水牛的分子标记辅助选择提供理论依据。利用DNA测序法等技术进行候选基因PRKAA 2外显子4及部分内含子3单核苷酸多态性(SNPs)检测,并采用生物信息学方法结合统计软件分析PRKAA 2基因与摩拉水牛生长性状的关联性。结果显示,摩拉水牛PRKAA 2基因中共检测到4个SNPs位点:c.462 G>A、IVS3.557 T>C、IVS3.560 C>T和IVS3.565 G>A,均包含3种基因型,且符合Hardy-Weinberg平衡。4个SNPs位点在水牛群体中均为中度多态,可以构建3种单倍型,T-C-G-G为优势单倍型,其中IVS3.560 C>T与c.462 G>A位点之间存在完全连锁不平衡,关联分析结果显示,单倍型H2与摩拉水牛体斜长和腰角宽呈显著相关(P<0.05)。c.462 G>A位点与摩拉水牛体高、十字部高、尻长、坐骨端宽和腰角宽呈显著相关,其中GG和AA基因型个体的体高和十字部高均显著高于GA基因型个体,GG基因型个体的尻长显著高于GA和AA基因型个体,AA基因型个体的坐骨端宽和腰角宽显著高于GA基因型个体(P<0.05);IVS3.557 T>C位点与摩拉水牛的生长性状指标未达到显著相关(P>0.05);IVS3.560 C>T位点与摩拉水牛体高、十字部高和尻长呈显著相关,其中CC和TT基因型个体的体高和十字部高均显著高于CT基因型个体,CC基因型个体的尻长显著高于CT基因型个体(P<0.05);IVS3.565 G>A位点与体斜长呈显著相关,其中GG和GA基因型个体的体斜长显著高于AA基因型个体(P<0.05)。综上,PRKAA 2基因的c.462 G>A、IVS3.560 C>T和IVS3.565 G>A位点对摩拉水牛部分生长性状均有显著影响,可作为摩拉水牛品种早期选育的候选基因和分子辅助标记。

两种同期发情方法对河流型水牛血液生殖激素的影响

为了解同期发情处理的河流型水牛血液激素变化情况,本试验在夏季选用2种同期发情方案,分别为Ovsynch法(GnRH/PGF/GnRH)和CIDR-Ovsynch法(CIDR/GnRH/PGF/GnRH),对22头健康河流型水牛(摩拉和尼里-拉菲水牛各11头)进行同期发情处理,然后用B型超声波对卵泡发育和排卵进行监测并采集血液测定生殖激素含量。结果显示:Ovsynch法的发情率为91.67%(11/12),排卵率为75.00%(9/12);CIDR法的发情率为100%(10/10),排卵率为40.00%(4/10);摩拉水牛的发情率和排卵率(100%和81.82%)均高于尼里-拉菲水牛(90.91%和36.36%);在不同时间段中,2种方法处理后排卵和不排卵的水牛生殖激素均有一定差异,排卵水牛促卵泡素(FSH)在9~11 d呈逐渐下降趋势,且第11天浓度小于不排卵水牛,雌二醇(E_(2))浓度在7~12 d呈逐渐上升趋势,且第10~11天浓度大幅上升并高于不排卵水牛,胰岛素样生长因子1(IGF-1)浓度总体呈逐渐上升趋势,且第10~12天的浓度高于不排卵水牛;不排卵水牛FSH浓度在9~12 d呈小幅度波动变化,E_(2)浓度在10~12 d呈小幅度波动上升,IGF-1浓度在7~12 d呈波动上升趋势。综上所述,河流型水牛用Ovsynch法比CIDR法的发情排卵效果好,摩拉水牛的同期发情排卵效果优于尼里-拉菲水牛;同期发情处理后正常排卵的河流型水牛在排卵前具有明显的FSH浓度下降以及E_(2)、IGF-1浓度上升规律。

水牛p21基因在卵母细胞体外成熟过程中的表达及其真核表达载体构建

旨在检测p21基因在水牛卵母细胞体外成熟过程中的表达变化,并克隆摩拉水牛p21基因CDs序列,构建真核表达载体。收集体外成熟培养不同时期(0、6、12、24h)和不同形态[有第1极体(first polar body,PB1)PB1和无PB1]的水牛卵母细胞,通过RT-qPCR检测其p21mRNA相对表达量。同时利用RTPCR技术从摩拉水牛卵巢颗粒细胞中扩增出p21基因编码序列,插入pEGFP-N1真核表达载体中,构建出重组质粒。将重组质粒pEGFP-N1-p21转染水牛颗粒细胞,并于培养24h和48h后观察转染细胞的荧光表达情况。收集转染48h后的颗粒细胞,通过RT-qPCR检测p21mRNA相对表达量。结果显示,成熟培养6h的卵母细胞p21mRNA表达量显著高于成熟培养0、12、24h的表达量(P<0.05),有PB1的卵母细胞中p21mRNA的表达量显著高于无PB1的卵母细胞(P<0.05);重组质粒pEGFP-N1-p21转染颗粒细胞后,有绿色荧光蛋白表达,且与转染pEGFP-N1和空白组相比,pEGFP-N1-p21转染组的p21mRNA表达量显著升高。结果表明,在体外成熟培养过程中均能检测到水牛卵母细胞p21mRNA表达量,成功构建了摩拉水牛p21基因真核表达载体,为下一步研究p21基因在水牛卵母细胞成熟和胚胎发育过程中的功能和调控奠定了基础。

阴道分泌物在动物发情鉴定中的研究进展

在家畜及实验动物的繁殖工作中,发情鉴定既是关键也是难点,准确的发情鉴定对于繁殖机制研究和提高繁殖效率都具有重要意义。阴道分泌物是一种较为易于获得的鉴定材料,同时也能更直接地反映动物子宫状况。本文简要介绍了国内外学者通过阴道分泌物鉴定动物发情的研究进展,并对此类研究的应用前景进行探讨。

水牛流行性血尿病诊断与治疗

流行性血尿病又被称为焦虫病及血孢子原虫病,水牛一旦患上此病,其生命健康将受到严重威胁,同时还会波及养殖安全。该文针对水牛流行性血尿病的诊断与预防措施进行分析,为相关养殖场(户)提供参考。

摩拉水牛二酰甘油酰基转移酶2基因的多态性检测

本研究旨在检测水牛二酰甘油酰基转移酶2(diacylglycerolacylt-ransferase,DGAT2)基因的单核苷酸多态性(SNP),探究摩拉水牛多态性位点的群体遗传特征。以广西水牛研究所的57头摩拉水牛为材料,PCR扩增DGAT2基因的部分序列(外显子2及内含子2、3),通过常规测序法检测其SNP,并运用遗传多样性分析软件(POPGENE)和SPSS软件对群体的多态性位点进行基因频率、基因型频率、多态信息含量(PIC)、有效等位基因数(Ne)及遗传杂合度(He)的检测。结果表明,在摩拉水牛DGAT2基因外显子2和内含子2、3上共发现了9个SNPs位点(IVS2.54G>A、IVS2.158A>G、EVS2.191A>G、EVS2.228A>G、IVS3.311C>T、IVS3.444A>G、IVS3.451A>C、IVS3.466C>T、IVS3.521C>T),其中EVS2.191A>G位点的突变导致氨基酸由异亮氨酸突变为缬氨酸,突变位点间存在一定程度的连锁遗传但接近连锁平衡状态。从基因频率上看,IVS2.158A>G、EVS2.191A>G、IVS3.311C>T、IVS3.451A>C、IVS3.466C>T和IVS3.521C>T 6个SNPs位点的两个等位基因频率有较大差异,提示等位基因频率较大的基因个体可能更适合生存。9个SNPs位点在摩拉水牛品种上多处于高度多态,杂合度在0.1744~0.4975之间,说明摩拉水牛群体中DGAT2基因遗传多态性丰富,具有较大的育种价值和性状改良潜力。

CART对FSH诱导下水牛颗粒细胞雌二醇分泌及相关基因表达的影响

本试验采用无血清培养体系培养原代水牛卵巢颗粒细胞,研究了外源可卡因-苯丙胺调控转录肽(exogenous cocaine amphetamine regulated transcript,CART)对促卵泡激素(FSH)诱导下颗粒细胞产生雌二醇(E2)的影响及其相关基因的表达情况。采用Long-term培养方法在无血清培养液中分别添加不同浓度的FSH(0、0.25、0.5、1、2、4 ng/mL)培养7 d,利用双抗体夹心法检测各孔的E2浓度,筛选出最佳添加浓度;将原代颗粒细胞随机分成4组(2组对照组(无FSH)和2组最佳FSH添加组)培养6 d后,其中一组对照组和FSH添加组分别与25μg/mL CART共作用24 h,检测E2浓度的变化并对颗粒细胞中CART受体(CARTPT)和芳香化酶基因(CYP19A1)进行定量检测。结果发现:①在培养液中不添加CART时,颗粒细胞中E2浓度随着FSH添加浓度的升高呈先升高后降低的趋势,当FSH添加浓度为1 ng/mL时,E2浓度达到最高值116.16 pmol/mL,显著高于对照组和其他浓度组(P<0.05);②添加外源CART显著降低了FSH作用下颗粒细胞培养液中E2的浓度(P<0.05),两对照组(0 FSH和0 FSH+CART)差异不显著(P>0.05);③在添加1 ng/mL FSH时,CART作用24 h后显著降低了FSH诱导下颗粒细胞中CYP19A1 mRNA的表达(P<0.05),而细胞中CARTPT mRNA的相对表达量显著升高(P<0.05)。在0 ng/mL FSH下,添加25μg/mL CART作用24 h,颗粒细胞中CYP19A1和CARTPT mRNA的表达与不添加CART组相比差异不显著(P>0.05)。由此推测CART在水牛卵巢发育中是一种负向调控信号,抑制卵泡的健康发育,且需一定量的FSH诱导CART对颗粒细胞增殖分化的负向压力。

伊犁马GHR基因多态性及其与泌乳性能的关联分析

马奶具有较高的营养价值,但目前关于马泌乳性能方面的研究很少。本实验对伊犁马生长激素受体(GHR)基因外显子和启动子设计13对引物,以DNA混合池为模板,采用PCR-RFLP法检测188匹伊犁马GHR基因多态基因型,并分析有产奶量记录的73匹伊犁马GHR基因多态性与泌乳性状之间的关系。结果表明:在伊犁马中检测到GHR基因启动子T-562C突变,CC、TC、TT 3种基因型,其基因型频率分别0.309、0.676、0.016;C为优势等位基因,频率为0.646,T基因频率为0.354;虽然各基因型间产奶量并没有显著差异(P>0.05),但各基因型的产奶量依次为TT>CC>TC,基因C突变为T可使产奶量有上升趋势,研究结果可为我国乳用马的选育提供一定的参考。

摩拉水牛和尼里-拉菲水牛PRKAA2基因SNPs检测及遗传多样性分析

为研究水牛蛋白激酶AMP活化的催化亚基α2(protein kinase AMP-activated catalytic subunit alpha 2,PRKAA2)基因多态性,本试验以摩拉水牛和尼里-拉菲水牛基因组DNA为模板,扩增PRKAA2基因外显子4及内含子3部分序列,通过常规测序法检测其SNP并进行遗传多样性分析。结果发现,PRKAA2基因外显子4内存在1个SNP位点(c.462G>A),PRKAA2基因内含子3部分序列存在3个SNPs位点(IVS3.557T>C、IVS3.560C>T和IVS3.565G>A)。经遗传多样性分析表明,在c.462G>A位点的野生纯合型和杂合型比突变纯合型更有优势,IVS3.557T>C和IVS3.560C>T位点的突变纯合型为非优势基因型,IVS3.565G>A位点杂合型为优势基因型。IVS3.565G>A位点在摩拉水牛群体中处于Hardy-Weinberg非平衡状态;c.462G>A位点在尼里-拉菲水牛群体中处于Hardy-Weinberg非平衡状态。4个SNPs位点在摩拉水牛群体中均为中度多态;c.462G>A、IVS3.557T>C位点在尼里-拉菲水牛群体中为低度多态,IVS3.560C>T、IVS3.565G>A位点为中度多态。IVS3.557T>C位点在两个水牛群体中杂合度较低。说明摩拉水牛IVS3.565G>A位点和尼里-拉菲水牛c.462G>A位点的基因型频率和基因频率遗传状态不平衡,尼里-拉菲水牛群体中IVS3.557T>C位点遗传变异小,选择潜力不高。4个多态位点可以构建5种单倍型,其中T-C-G-G是摩拉水牛群体和尼里-拉菲水牛群体的优势单倍型。综上,本研究检测的摩拉水牛和尼里-拉菲水牛PRKAA2基因上4个SNPs位点可为水牛标记辅助选择育种提供参考。

不同品种河流型水牛血清生化指标的研究

实验旨在研究摩拉、尼里和地中海水牛之间的血清生化指标差异。实验选取5~6岁,体重为600~650 kg的健康母水牛96头(摩拉水牛47头、尼里-拉菲水牛24头、地中海水牛25头),于颈静脉采血进行血清生化指标分析。结果显示:尼里-拉菲水牛的总蛋白(68.89 g/L)和球蛋白(36.04 g/L)含量最低,而谷丙转氨酶(44.12 U/L)含量最高(P<0.05),其总蛋白低于其他2个品种(P<0.05);地中海水牛的总胆红素(1.50μmol/L)、直接胆红素(0.98μmol/L)、总胆汁酸(36.899μmol/L)含量最高(P<0.05);在尿酸浓度上,地中海水牛(131.88μmol/L)最高(P<0.05);尼里-拉菲水牛的总胆固醇(1.83 mmol/L)、高密度脂蛋白(1.10 mmol/L)、低密度脂蛋白(0.65 mmol/L)含量高于其他2个品种(P<0.05);地中海水牛的总胆固醇(1.56 mmol/L)、高密度脂蛋白(0.78 mmol/L)低于其他2个品种(P<0.05),其余指标差异不大。综上所述,尼里水牛可能在机体蛋白质合成与代谢、机体免疫等肝功能方面不如摩拉和地中海水牛,但其在肾功能和血脂方面较好;地中海水牛可能在肝脏代偿等肝功能方面强于摩拉、尼里水牛,而在肾功能、血脂方面较差。

代谢组学在奶牛上的应用研究进展

奶牛代谢产物的变化可以直接反映其体内各种生命活动的变化,利用代谢组学技术能够清晰并且直观地表征奶牛在不同生理状态下的全局代谢变化。代谢组学自2008年首次应用于奶牛后,其在奶牛的生殖生理研究、营养生理学研究、胴体品质和牛奶质量、预测饲料效率、疾病检测的生物标记开发等方面的文献不断出现。本文通过综述代谢组学在奶牛疾病、营养、繁殖育种和生产管理几个方面的应用,旨在为进一步利用代谢组学开展奶牛的重要经济性状基础研究提供参考。

水牛繁殖性状相关基因研究进展

在畜牧生产中,繁殖性状是一个非常重要的经济性状,繁殖性能的高低与动物生产效益密切相关。水牛是我国南方重要的物种资源,它具有耐粗饲、适应性强和易饲养等特点。而且水牛肉肉质鲜美,易于消化;水牛奶更是营养丰富全面,是制作高档奶制品的优质原料,一直以来,深受广大消费者青睐。然而,尽管我国水牛存栏量多,但水牛繁殖力低,一直是制约水牛产业发展的重要因素。如何提高水牛繁殖性能已成为当下研究的重点。为此,本文主要从分子水平上对近年来水牛繁殖性状相关基因的研究进展做一概述,并展望其应用前景。

同期发情对乏情期水牛黄体与血液激素的影响

为了研究水牛黄体发育与溶解过程,试验采用促性腺激素释放激素结合氯前列烯醇法对乏情期水牛进行了同期发情处理,比较同期发情与自然发情状态下水牛黄体溶解时间、黄体最大直径和血液中促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)、免疫抑制素(INH)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平的差异,并对所有水牛的黄体最大直径和6种激素水平进行了偏相关分析。结果表明:同期发情组黄体溶解时间短于自然发情组,差异极显著(P<0.01);黄体最大直径两组之间差异不显著(P>0.05);同期发情组血液中INH水平平均值显著低于自然发情组(P<0.05),P4水平显著高于自然发情组(P<0.05),6种激素水平均与黄体最大直径不显著相关(P>0.05)。说明INH可能与水牛乏情期不发情、静默发情有关,但该激素可能并不直接调控水牛黄体发育与溶解。

RAPD标记鉴别四个水牛品种的初步研究

为进一步保护和开发中国本地水牛和国外引进水牛的遗传资源,建立快速区分鉴别本地和引进水牛品种的方法。设计57条随机扩增多态性(randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)引物,对本地沼泽型水牛和国外引进的河流型(摩拉,尼里拉菲和地中海)水牛之间的遗传差异进行了调查。以128头水牛DNA样本为模板,通过PCR扩增从57条RAPD引物中筛选并优化反应条件。实验结果显示,筛选得到了5条可用于区分本地沼泽型水牛与引进河流型水牛的引物(OPG6,OPG7,S11,S40和S1013),建立了RAPD鉴别区分沼泽与河流水牛的方法。本实验的结果为中国水牛的杂交改良、良种培育和本地水牛种质资源的保护等工作提供了理论和实验依据。

水牛CART基因的克隆测序及蛋白质结构与功能预测

为探讨水牛可卡因-苯丙胺调节转录肽(cocaine-and amphetamine-regulated transcript,CART)基因功能,以水牛卵巢组织RNA转录的cDNA为模板,参考GenBank预测的水牛CART基因组序列设计引物,采用PCR和在线生信分析软件对CART基因进行克隆和蛋白质结构预测分析。结果显示:水牛CART基因CDS区全序列长为351 bp,编码116个氨基酸;对所得核酸序列和蛋白质结构分析预测显示,水牛CART基因与美洲野牛、野牦牛、普通牛、羊、双峰驼、单峰驼、野猪、马、非洲野驴、人类及猕猴相似程度分别为100%、98%、100%、98%、91%、91%、78%、85%、85%、81%、90%;Mega分析显示在多胃反刍动物间有较高同源性;蛋白质结构预测显示,CART蛋白含有N端信号肽,是分泌蛋白,功能与神经、辅酶和离子结合相关。