人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)cDNA的克隆

为了研究人碱性成纤维细胞生长因子在治疗神经系统疾病中的作用 ,克隆其 c DN A序列 ,并添加 K ozak序列 ,以用于真核细胞表达。本实验提取我国自建的脑胶质瘤细胞系 BT32 5总 RN A,设计上、下游引物用逆转录 PCR法扩增 c DNA片段 ,然后重组于 p GEM- 3zf( + )载体 ,酶切鉴定插入片段正确后测序。结果 :RT- PCR扩增到 4 73bp的带有 K ozak序列的 c DN A片段。显示 :克隆到碱性成纤维细胞生长因子 c DN A片段 。

人碱性成纤维细胞生长因子基因在COS-7细胞中的表达及活性检测

目的 获得人碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ），用于治疗神经系统疾病；克隆添加 Ｋｏｚａｋ序列的 ｂＦＧＦ ｃＤＮＡ序列，用于真核细胞表达。方法 提取国人脑胶质瘤细胞系 ＢＴ３２５总 ＲＮＡ，ＲＴ－ＰＣＲ法扩增 ｂＦＧＦ ＣＤＮＡ片段，重组于 ｐＧＥＭ－３ｚｆ（＋）载体，测序正确后构建表达载体，转染猴肾成纤维细胞系 ＣＯＳ－７，Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ检测表达，收集培养上清用 ＰＣ－１２进行活性检测。结果ＲＴ－ＰＣＲ扩增到４７３ｂｐ的带有Ｋｏｚａｋ序列的ｃＤＮＡ片段；成功构建了真核表达载体；在ＣＯＳ－７得到了表达，并有一定的生物活性。结论 由克隆到的ｂＦＧＦ ｃＤＮＡ片段构建的真核表达载体能在ＣＯＳ－７中表达、分泌．并具有生物活性。

人GDNF在原代培养的大鼠成纤维细胞中的表达

目的 研究人脑胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)在治疗神经系统疾病中的作用 ,克隆其前体蛋白 c DNA序列 ,并用于真核细胞表达。 方法 提取我国自建的脑胶质瘤 BT32 5细胞总 RNA,用逆转录 PCR法扩增 GDNF全长 c DNA并构建其真核表达载体 p CI- neo- GDNF,然后转染原代培养的成纤维细胞 ,免疫组织化学及原位杂交检测 GDNF在细胞中的表达。 结果 从国人脑胶质瘤细胞中扩增到 5 5 8bp的 GDNF全长 c DNA,并在GDNF转基因原代成纤维细胞中检测到重组 GDNF的转录和表达。 结论 克隆到的 GDNF全长 c DNA片段 ,可用于真核细胞表达 ;其转基因细胞脑内移植后应能治疗包括帕金森病在内的神经系统变性疾病。

测力式汽车制动试验台的应用

测力式汽车制动试验台可测量汽车制动力的大小,同时还可按其测量的制动力与时间的关系曲线来分析检测汽车制动系统的故障.

GDNF在人脑胶质瘤细胞中表达的检测及其cDNA的克隆

为研究人脑胶质细胞源性神经营养因子在脑胶质瘤中的表达及其在治疗神经系统疾病中的作用 ,本研究克隆了其前体蛋白及其成熟多肽的 c DNA序列 ,将之用于真核及原核细胞表达。提取我国自建的脑胶质瘤细胞系 BT32 5总 RNA,设计两对引物用逆转录 PCR法扩增上述两种长度的 c DNA片段 ,然后重组于 p GEM-T载体 ,酶切鉴定插入片段正确后测序。结果表明 ,脑胶质瘤细胞中只扩增出 5 5 8bp的胶质细胞源性神经营养因子全长 c DNA片段 ,未见 6 36 bp片段 ;且扩增效率较成熟多肽 c DNA甚低。提示 ,该细胞合成的胶质细胞源性神经营养因子可能还存在不含有信号肽而只能在细胞内潴留的成熟多肽形式。作为自泌性生长因子 ,它可能调节瘤细胞生长等生物学行为 ;同时克隆到的胶质细胞源性神经营养因子全长及其成熟多肽的 c DNA片段 。

大鼠Fas配体基因的克隆

目的 研究 Fas配体 (Fas ligand,Fas L )在移植免疫方面的作用 ,克隆其编码的全部 c DNA序列 ,并添加 Kozak序列 ,以便在真核细胞高效表达大鼠 Fas L。 方法 从大鼠的睾丸组织中提取总 RNA,设计上、下游引物以 RT- PCR的方法扩增出一 931bp的 DNA片段 ,将这一片段重组于 p BK - RSV载体中 ,酶切鉴定插入片段正确后进行全序列分析。 结果 证实该研究所克隆的 c DNA是编码正确的大鼠 Fas L基因 ,与发表于 Gene Bank上的序列相比 ,完全正确。已构建成用于真核表达的重组质粒 p BK- RSV/r Fas L。 结论 克隆到了编码正确的大鼠Fas L的 c DNA全序列 ,对移植免疫和帕金森病基因治疗的基础研究及临床应用具有重要意义。

小学数学课堂提问策略的探讨

随着新课程改革的不断推进,课堂提问成为课堂教学不可忽略的重要环节。在小学数学课堂进行有效地提问,能激发学生的学习兴趣,促进探究性思维的培养。本文提出了现阶段小学数学课堂提问现存的一些问题,并提出了相应的策略,以促进小学数学课堂提问的进步。

小学数学微课程的应用与实践

近年来,随着科技的日益发展,微课程这种在线教育教学方式也得到迅猛发展。将微课程教学应用于义务教育领域,有十分重要的现实意义。本文着重就微课程在小学的应用,包括如何设计适合小学生学习的微课程和小学微课程内容的开发进行了探讨,并就存在的问题提出了改进建议。

小学数学微课程设计的问题及成效

小学数学微课程在实际的开发设计中难免出现以下问题：第一，微课这种特别的授课方式，并不是所有教师都能适应，需要教师因材施教。第二，微课程在广度和深度方面存在一定的不足，因为微课是提前录制好的，

“入关”对我国汽车工业的机遇与挑战

我国的汽车工业多年来是在国家政策保护控制下发展起来的。改革开放后才加快了步伐,进入'八五',国家把发展轿车工业和汽车零部件工业做为重点,从而使我国的汽车工业发展进入了关键时期。由于汽车工业得以快速发展只是近几年的事,起步晚。

我国轻型汽车发展中的问题及建议

我国已经把汽车工业做为国民经济的支柱产业之一来发展。根据轻型车产品的特点和世界汽车工业发展趋势,轻型汽车所占的比重将大大提高,到2000年我国的规划是7:2:1(即轻、中、重吨位之比)。目前国内各种轻型车产量的总和远远满足不了国民经济发展的需要。

我国北方沙尘暴天气气候特征及成因分析

近几年由于气候的异常变化,沙尘暴天气的频繁出现,导致生态环境的恶化,引起了社会的广泛关注。概述了我国北方沙尘暴天气的成因、源地和移动路径、分布特征及演变规律,并对沙尘暴发生发展、危害机理以及大气环流特征进行分析,为今后更好地预报、预测沙尘暴天气提供一点依据和思路。

朝阳地区大风天气成因及预报方法

本文通过对朝阳地区历史上大风天气的发生演变规律以及影响系统进行初步分析,并利用近十年的大风天气资料,找出了预报大风的要素指标,并结合部分专家的预报经验,研究制作朝阳地区大风预报方法。

朝阳县乡镇预报降水订正方法探讨

乡镇天气预报降水预报是农村公共服务的重要内容之一,是农业生产、农民生活的重要气象保障,对建设社会主义新农村,更好地发挥气象服务的社会和经济效益具有重要作用。该文从降水的气候背景、天气学角度和统计学角度进行订正来总结朝阳县乡镇天气预报降水预报方法,以便更好地提高乡镇天气预报降水预报的准确率。

2012年朝阳县暴雪过程与数值预报分析

对2012年11月10—11日朝阳县暴雪天气的大尺度天气系统、常规物理量、卫星雷达图进行诊断分析,得出此次暴雪天气是在有力的大尺度环流形势下发生的,低层辐合、高层辐散以及强上升运动为暴雪提供了良好的动力条件,同时能量锋区以及水汽的辐合与输送是暴雪产生的主要原因。

朝阳县火箭增雨作业的几点思考

为了提高气象防灾减灾的能力,应对干旱,合理开发云水资源,根据不同天气系统的云层特点,结合火箭人工增雨机理,合理布局,探讨选择人工增雨作业最佳时机,最大限度地提高人工增雨作业效果,发挥人工影响天气在防灾减灾中的作用。

朝阳县灾害性天气预警服务思考

本文结合朝阳县预警服务实际,总结朝阳县灾害性天气预警服务实践,并针对如何增强灾害性天气预警服务能力,提出了几点对策.

气候变化对农作物的影响及气象灾害预警技术研究

随着全球气候的变暖,近年来极端天气频繁出现,气象灾害的种类也在增多。中国作为农业大国,所遭受的损失也越来越严重。因此,做好重大农业气象灾害预测预警工作是重中之重。从多方面探究了重大农业气象灾害预测预警技术。

微信平台在气象服务中的应用——以朝阳县气象服务为例

本文主要介绍了辽宁省朝阳县气象服务微信平台在气象服务中的应用,并与传统气象服务方式进行对比。对比分析得出微信平台在气象服务中的几大优势,进而指出微信平台在朝阳县气象局公众服务中的重要意义。