中药(赶黄草+波棱瓜子)提取物对小鼠维生素A急性中毒早期的治疗效果

【目的】研究中药提取物及其组方对小鼠维生素A急性中毒早期的治疗效果,为动物维生素A急性中毒提供有效的治疗手段,进而促进伴侣动物医疗的健康发展。【方法】选取健康成年昆明种小鼠一次性腹腔注射维生素A(按1500 mg/kg计)建立维生素A中毒致骨骼发育不良综合症小鼠模型,4周后采集血液测定生化指标。将维生素A急性中毒小鼠随机分成6组(T1~T6)进行治疗:T1组为空白对照组(不给药);T2组为10.0 mL/kg赶黄草水粗提物;T3组为1.0 mL/kg波棱瓜子粗提油;T4组为5.0 mL/kg赶黄草水粗提物+0.5 mL/kg波棱瓜子粗提油;T5组为5.0 mL/kg赶黄草水粗提物+0.5 mL/kg波棱瓜子粗提油+1.0 g/kg黄芪多糖;T6组为阳性对照,安宫牛黄丸(1/3粒,约1 g)。各给药处理组均连续灌胃给药7 d。在开始给药的第2、4、6和8 d分别采集小鼠静脉血制备血清,用于谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、钙(Ca)、磷(P)和甲状旁腺素(PTH)等血清生化指标测定。【结果】除T1组外,各给药处理组维生素A急性中毒小鼠的血清生化指标均发生明显变化,ALT、AST和ALP活性及Ca和P含量整体上均呈下降趋势,PTH含量则呈上升趋势。综合各项血清生化指标的变化趋势,可确定T5组的小鼠维生素A急性中毒治疗效果最佳,至给药第8 d,维生素A急性中毒小鼠血清ALT活性降至3.78 ng/mL,AST活性降至628.14 pg/mL,ALP活性降至2.35 ng/mL,Ca含量降至3.29 mmol/L,P含量降至1.62 mmol/L,而PTH含量升高到337.95 pg/mL。【结论】赶黄草水粗提物和波棱瓜子粗提油均能有效治疗小鼠维生素A急性中毒,两者联用效果更佳,尤其是与黄芪多糖配伍组合,其作用机理主要是通过修复肝功能及骨组织损伤来实现。

四川规模兔场球虫病流行病学调查

为掌握四川规模化养兔场球虫感染情况,本研究采用麦氏虫卵计数法和PCR方法对四川东、西、南、北及成都附近15个规模化养兔场共450份粪样进行了检测。结果表明,四川规模兔场兔球虫总感染率为71.11%,流行种类达9种,其中巨型艾美耳球虫、中型艾美耳球虫和黄艾美耳球虫场阳性率分别达100%、93.33%和93.33%,其次为穿孔艾美耳球虫73.33%、无残艾美耳球虫60%、斯氏艾美耳球虫46.66%、盲肠艾美耳球虫46.66%、梨形艾美耳球虫40%和小型艾美耳球虫26.67%;1~3月龄幼兔球虫感染率和感染程度明显高于4~6月龄商品兔和6月龄以上种兔,感染率达96%,平均OPG为14913。研究表明,四川规模兔场球虫感染率高,需加强对1~3月龄幼兔的球虫防控。

中药提取物对小鼠维生素A急性中毒中晚期的影响

【目的】研究中药提取物及其组方对小鼠维生素A早期急性中毒的治疗效果,为动物维生素A急性中毒提供有效的治疗手段,进而促进伴侣动物医疗的健康发展。【方法】选取健康成年昆明种小鼠36只一次性腹腔注射维生素A(按1500 mg/kg计)建立维生素A中毒致骨骼发育不良综合症小鼠模型,8周后采集血液测定生化指标。将维生素A急性中毒小鼠随机分成6组(T1~T6)进行治疗,T1组为空白对照组(不给药);T2组为10.0 mL/kg赶黄草水粗提物;T3组为1.0 mL/kg波棱瓜子粗提油;T4组为5.0 mL/kg赶黄草水粗提物+0.5 mL/kg波棱瓜子粗提油;T5组为5.0 mL/kg赶黄草水粗提物+0.5 mL/kg波棱瓜子粗提油+1.0 g/kg黄芪多糖;T6组为阳性对照,安宫牛黄丸(1/3粒,约1 g),各给药组均连续灌胃给药7 d。在开始给药的第2、4、6和8天分别采集小鼠静脉血制备血清,用于谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、钙(Ca)、磷(P)和甲状腺旁素(PTH)等血清生化指标测定。【结果】除T1组外,各组的生理生化指标均发生了极其显著的变化,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)各组均有极显著下降(P<0.01),但赶黄草水粗提物+波棱瓜子粗提油+黄芪多糖治疗组下降最多,接近正常水平。钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)各组均有极显著下降(P<0.01),但赶黄草水粗提物+波棱瓜子粗提油+黄芪多糖治疗组下降最多,而阳性对照变化不显著。甲状腺旁素(PTH),除对照组和阳性对照组,各组均有极显著升高(P<0.01),赶黄草水粗提物+波棱瓜子粗提油+黄芪多糖治疗组升高最多。【结论】赶黄草水粗提物和波棱瓜子粗提油均能有效治疗小鼠维生素A急性中毒,两者联合使用效果更佳,尤其是与黄芪多糖配伍组合,其作用机理主要是通过修复肝功能及骨组织损伤来实现。

17味藏药粗提取物对仔猪细菌性腹泻主要病原菌体外抑菌试验

为了研究17味藏药粗提取物对仔猪细菌性腹泻主要病原菌产肠毒素大肠埃希氏菌、猪霍乱沙门氏菌的体外抑菌试验效果,采用琼脂扩散法和试管二倍梯度稀释法,分别测定抑菌圈直径大小、最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:产肠毒素大肠埃希氏菌、猪霍乱沙门氏菌均对余甘子、诃子、多刺绿绒蒿、螃蟹甲4味药物敏感,4味藏药药物MIC分别为1.516mg/mL、6.065mg/mL、41.333mg/mL、94.302mg/mL。结论:4味藏药对产肠毒素大肠埃希氏菌和猪霍乱沙门氏菌均有不同程度的抑制作用,其中余甘子和诃子的作用最强,其次是多刺绿绒蒿,螃蟹甲抑菌效果较弱,为仔猪细菌性腹泻的中药防治提供理论基础。

牦牛病毒性腹泻病病毒E2基因的克隆及序列分析

根据GenBank中已发表的多株牛病毒性腹泻病毒的E2基因序列比较分析设计了3对引物,应用RT-PCR方法首次扩增出牦牛病毒性腹泻病毒的E2基因区637 bp的片段序列,经pMD18-T载体连接后克隆、测序,并与已发表的NADL、Osloss、Oregon C24V等毒株E2基因序列进行系统发育进化树比对分析,结果表明,牦牛病毒性腹泻病毒的E2基因无插入或缺失,系统发育进化分析表明,与其他毒株核苷酸同源性较低,最高仅为68.8%,推导氨基酸序列为68.4%。较低的同源性表明牦牛病毒性腹泻病毒存在较大的基因突变或者可能还具有独立的衍化来源。

坏死梭杆菌QL03株绵羊感染模型的建立及免疫保护性试验

坏死梭杆菌是奶牛腐蹄病的重要致病菌。用奶牛源坏死梭杆菌QL03分离株以不同浓度菌量感染绵羊蹄部,通过观察绵羊蹄部感染情况、病理变化和动物回归试验,建立了坏死梭杆菌分离株绵羊感染模型。并通过绵羊免疫保护性试验验证了绵羊作为奶牛源坏死梭杆菌QL03分离株动物模型的可行性,为进一步研究坏死梭杆菌有效的疫苗奠定实验基础。

大肠杆菌磺胺类抗生素耐药基因二重PCR技术的建立

为建立一种一次性检测多个磺胺类抗生素耐药基因的检测方法,用磺胺类抗生素耐药大肠杆菌作为受试生物,根据磺胺类抗生素耐药基因Sul1和dfrA1设计一对引物进行二重PCR检测。结果发现:本方法能有效检测出大肠杆菌Sul1和dfrA1两种磺胺类抗生素耐药基因,检出限为4.5 cfu/μL,对于Sul1和dfrA1两种磺胺类抗生素耐药基因具有较强的检出特异性。此方法对检测大肠杆菌磺胺类抗生素耐药基因提供了有力的技术支撑。

奶牛源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及氟苯尼考耐药基因fexA的克隆

从100个奶牛场环境及脓汁样品中分离、鉴定了9株奶牛源耐氟苯尼考金黄色葡萄球菌,分别提取质粒DNA和基因组DNA,通过特异性引物进行PCR扩增氟苯尼考耐药基因fexA,以质粒DNA为模板的PCR分别扩增出了1 446bp特异性目的片段,而以基因组DNA为模板的PCR未扩增出该目的片段。将该目的片段克隆到pET-32(a)载体上,成功构建了pET-fexA质粒载体,将质粒载体转入BL21中,药物敏感性试验显示构建的pET-fexA/BL21基因工程菌对氯霉素和氟苯尼考高度耐药。同时,fexA阳性金黄色葡萄球菌分离株对氯霉素和氟苯尼考的耐药性显著高于质控菌株,说明fexA基因贡献细菌对氯霉素和氟苯尼考的交叉耐药。成功构建了一个基因背景清楚且对氟苯尼考耐药的细菌模型,排除了细菌中其他氟苯尼考耐药基因或泵出蛋白对fexA基因贡献细菌耐药的影响,为fexA基因编码的蛋白定位研究奠定了基础。

藏猪与长白猪血液生理生化指标差异分析

该研究通过比较藏猪和长白猪发育期血液生理生化指标,以了解地方猪种和外来猪种的种质特性。试验分别采集6月龄藏猪和长白猪血样各30份,检测12项血液生理指标和10项血液生化指标,并对结果比较分析。藏猪血液生理指标整体高于长白猪,其中白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)显著高于长白猪(P<0.05),血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)极显著高于长白猪(P<0.01);藏猪血液生化指标中γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、血糖(GLU)、尿素(UREA)、肌苷(CRE)极显著高于长白猪(P<0.01),碱性磷酸酶(ALP)、尿酸(UA)显著高于长白猪(P<0.05),其他指标无显著差异。结果表明,藏猪表现出比长白猪更强的低氧适应能力、抗氧化应激能力以及高的肌肉活动量,为解析我国地方品种的优良性状提供科学依据。

毛细胞性白血病四例报告

毛细胞性白血病(Hairy Cell Leu-kemia,简称HCL)是一种少见类型的白血病,现已探明HCL属于B淋巴细胞的克隆性变异。对于这种疾病,国外已进行了大量的报道和研究,而国内报告不多见。

四川丘区小农户养猪生产现状和发展建议

1小农户养猪生产的现状1.1基本情况四川盆地北缘深丘,生态环境良好,但由于交通不便、信息不灵,制约了当地经济的发展,仍有部分村民生活在贫困线下。2008年以来,该区域以生态养殖为发展理念,打造出有一定影响的品牌,依托现代信息技术,走出了一条"互联网+小农户"的精准扶贫发展模式,带动了农民增收致富。

一种稳定型过氧乙酸消毒剂的研制及应用效果

过氧乙酸(CH3COOOH)是一种高效广谱消毒剂,广泛用于环境消毒,但通常情况下很不稳定,本试验用双氧水和冰乙酸等为原料,试制了高效稳定性过氧乙酸。用0.2%的本消毒剂溶液对金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(ATCC8099)、产气荚膜梭菌(ATCC 13124)、铜绿假单胞菌(ATCC15442)菌悬液进行杀灭试验,结果显示:作用5 min对各类细菌的杀灭率都达到了100.00%;加速试验法发现本次试制的消毒液经54℃保存12 d后,过氧根含量的下降率仅为6.50%。说明本次试制的新型过氧乙酸消毒剂具有稳定、高效、广谱的特点。

捻转血矛线虫虫卵体外培养观察

为了解捻转血矛线虫虫卵在体外发育过程中的形态变化,对分离自绵羊和山羊的捻转血矛线虫成虫进行了短暂体外培养并获得纯种成熟虫卵,同时在室温16℃~29℃条件下的生理盐水中培养虫卵,并进行形态测量和胚胎发育观察。结果表明:捻转血矛线虫虫卵呈短椭圆形,浅灰或黄褐色,多数对称,少数不对称;虫卵长81.27 μm±5.59 μm,宽54.34 μm±6.63 μm,长宽比1.51±0.14。虫卵在体外发育依次经历桑葚期、蝌蚪期和幼虫期;培养至第6 d虫卵中幼虫开始逸出,9 d后幼虫全部逸出。分离自绵羊和山羊的捻转血矛线虫虫卵在体外发育至各阶段所需时间差异不大,但在长、宽和长宽比上差异显著,具有统计学意义。

奶牛场常用乳头药浴剂抑菌效果观察

采用平板细菌计数法对四个牛场奶牛乳头药浴前、后的细菌总数进行统计分析。结果显示A、B、C三个牛场乳头药浴前与药浴后的细菌总数差异极显著(P<0.05),D牛场乳头药浴前与药浴后的细菌总数无统计学差异(P>0.05)。表明A^C场奶牛乳头药浴剂效果较好,D场效果欠佳。此外,对培养的细菌进行革兰氏染色和镜检,结果显示主要有沙门氏菌、大肠杆菌、葡萄球菌和枯草芽孢杆菌,与文献报道相符。

急性白血病患者脂质过氧化水平及抗脂质过氧化酶活力的测定

对16例初治未缓解急性白血病患者及10例正常对照者外周血红细胞超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(G-Px)、过氧化氢酶(CAT)及血浆丙二醛(MDA)进行了测定。结果发现16例急性白血病患者外周血红细胞中SOD、G-Px、CAT及血浆MDA水平(分别为62.24±13.00u/mg·protein、34.57±6.91 u/mg·protein、762.21±54.67 u/g·protein和10.63±1.73 nmol/ml)均显著高于10例正常对照者(分别为42.53±18.02u/mg·protein、26.41±7.01u/mg·protein、688.75±50.25u/g·protein和6.78±1.58 nmol/ml)。在急性淋巴细胞和急性非淋巴细胞性白血病患者不同组别中,6例急性淋巴细胞性白血病患者的SOD、G-Px、CAT及MDA水平与10例急性非淋巴细胞性白血病患者相比较均无显著性差异(P值均>0.05)。急性白血病患者外周血红细胞SOD、G-Px、CAT及血浆MDA水平均高于正常,不同类型病人之间无显著性差异。

14例狼疮性肾炎病人自然杀伤细胞活性的观察

应用^(125)Ⅰ-UdR释放法,对14例狼疮性肾炎病人及14例正常对照者外周血自然杀伤细胞活性进行了观察,结果发现狼疮性肾炎病人杀伤细胞活性显著低于正常对照者。其中2例病人应用强的松治疗后,自然杀伤细胞活性明显提高。

成人神经母细胞瘤骨髓淋巴结转移一例

患者男,28岁,以全身酸痛3月,加重伴面黄乏力20 d为主诉于1992年8月31日入院。3月前患者出现全身酸痛,以双下肢为重,无发热,关节肿胀,咽痛等症状,在当地应用青霉素针80万u 2次/d肌注,共用半月,自觉症状稍有缓解。20

慢性肝病患者自然杀伤细胞活性观察

应用^(125)I—UdR释放法对25例正常人及50例慢性肝病患者外周血NK活性进行了观察.发现男性NK活性(平均为59.8±10.5%)显著高于女性者(平均为41.0±6.5%)P<0.05.慢性肝病患者NK活性(平均为31.8±18.8%)显著低于正常对照者(平均为57.4±11.0%)P<0.001.且肝硬化病人NK活性(平均为31.6±16.5%)显著低于慢性肝炎者(平均为35.8±18.5%)P<0.05。推测慢性肝病患者NK活性降低可能与乙肝病毒感染有关系。

一株NADC34-like猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组序列的分析

2017年,NADC34-like猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)自北美传入我国后,迄今未见该类病毒与我国本土HP-PRRSV发生重组的报道。为监测该类病毒在四川地区的流行变异情况,本研究从该地区某疑似感染PRRSV发病猪场采集肺脏样品,经ORF5基因分型RT-PCR检测并测序结果显示,该猪场为NADC34-like PRRSV感染。将阳性样品接种至猪肺泡巨噬细胞(PAMs)进行病毒分离,并通过RT-PCR扩增、测序及间接免疫荧光试验(IFA)鉴定结果显示,分离到一株NADC34-like PRRSV,并命名为SCcd2020株。经PCR分段扩增病毒全基因组,测序、拼接后的结果显示,病毒基因组全长15 020 bp。为进一步分析SCcd2020株的遗传演化特征,利用MegAlign分析SCcd2020株全基因组及ORF5基因序列与GenBank中12株PRRSV参考株相应基因的核苷酸及其编码氨基酸序列的相似性;采用MEGA X软件利用NJ法构建SCcd2020株的全基因组及ORF5基因的系统发育树;采用MegAlign分析SCcd2020株Nsp2氨基酸序列的缺失特征;分别利用RDP4、SimPlot软件对SCcd2020株进行重组分析。相似性分析结果显示,SCcd2020株与12株代表PRRSV ORF5基因序列及其编码氨基酸序列的相似性分别为84.4%~97.0%与84.6%~97.0%,其中与IA/2014/NADC34株相似性最高为97%;SCcd2020株与12株PRRSV代表株全基因组序列的相似性为79.8%~89.2%,其中与NADC30株相似性最高为89.2%;ORF5基因进化树结果显示,SCcd2020株与NADC34-like PRRSV聚为一大支;而全基因组进化树结果显示,SCcd2020株与NADC30-like PRRSV聚为一大支。Nsp2氨基酸序列分析结果显示,SCcd2020株该区域存在“111+1+19aa”缺失模式,而NADC34-like PRRSV为“100 aa”缺失模式;上述结果表明,SCcd2020株基因组可能发生了重组。重组分析结果结果显示,SCcd2020株是由NADC30-like PRRSV、HP-PRRSV以及NADC34-like PRRSV之间形成的重组病毒。综上所述,SCcd2020株为国内首次报道与我国本土HP-PRRSV发生复杂重组的NADC34-like PRRSV,表明我国PRRSV遗传多样性进一步增加,应高度重视。本研究结果有助于深入了解我国NADC34-like PRRSV的遗传演化特征,为科学防控该类病毒的感染提供参考依据与数据支持。

调节性T细胞在移植物抗宿主病免疫治疗中的研究进展

移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GvHD)是异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)后供者免疫活性细胞介导的攻击宿主细胞和器官的一种过度炎症反应,它是allo-HSCT后最常见的并发症,也是影响移植效果的主要障碍[1]。调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)是一类具有免疫调节作用的CD4+T细胞亚群,自从被Sakaguchi等[2]发现以来,一直是免疫学领域研究的热点。Tregs通过细胞间直接接触并分泌抑制性细胞因子,调节CD4+和CD8+T细胞的活化和增殖,进一步抑制Th1和Th17细胞;Tregs是维持自身免疫耐受与T细胞免疫稳定的关键因素,它在维持机体免疫稳定、预防自身免疫性疾病方面具有重要作用[3-7]。近年来CD4+CD25+Foxp3+Tregs在allo-HSCT后GvHD免疫调节中的作用成为研究热点,本文就Tregs在GvHD免疫治疗中的研究进展做一综述。