CCN1基因肺特异性条件敲除小鼠模型的构建和鉴定

目的:构建Cre重组酶系统调控的肺特异性的富半胱氨酸血管生成诱导因子61(CYR61,又称CCN1)基因条件敲除小鼠,为肺组织内CCN1在炎症中扮演的角色和作用机制的体内实验研究提供更特异的动物模型。方法:将引进的CCN1^(flox/flox)转基因小鼠和肺上皮细胞特异性表达Cre重组酶工具鼠分别进行繁殖和鉴定,然后将2种小鼠进行杂交并对其子代小鼠的基因型进行鉴定,其子代基因型为Cre^(+/-)CCN1^(flox/flox)的小鼠为本研究所构建的肺上皮细胞特异性CCN1基因条件敲除小鼠。结果:Cre^(+/-)CCN1^(flox/flox)的小鼠被成功繁殖并鉴定。使用他莫昔芬腹腔注射处理Cre^(+/-)CCN1^(flox/flox)实验组及Cre^(-/-)CCN1^(flox/flox)对照组,分别使用RT-PCR、免疫荧光、免疫组织化学、Western blot检测肺组织中CCN1的mRNA和蛋白表达,与对照组比可见实验组肺组织中CCN1的mRNA和蛋白表达均明显下降。结论:本研究基于Cre-Lox P技术成功构建了肺上皮细胞特异性CCN1基因条件敲除小鼠,并能稳定传代,可为进一步研究CCN1在肺组织内炎症中调控作用和机制奠定了动物模型的基础。