马尾松和云南松花粉的特异性分子鉴定

松花粉是指松科植物马尾松、油松或同属数种植物的干燥花粉,但不同树种来源的松花粉在活性成分的含量上有所差别。因此,准确鉴定松花粉的树种来源对保证松花粉产品质量的稳定性、规范松花粉市场具有重要意义。针对传统性状及化学法在检测松花粉原料的树种来源上的局限性,通过比较不同松树树种的叶绿体基因组序列,在accD基因中挖掘了马尾松和云南松的单核苷酸多态性位点。根据其特异性位点,通过人为引入错配碱基的方式分别设计了马尾松和云南松的特异性引物,并利用多重PCR对不同松树的花粉进行了鉴定。除了松树的特征性条带外,马尾松和云南松的花粉样品还分别产生了168 bp和342 bp的特异性条带。实验建立的多重PCR方法不仅可以将活性成分含量较高的马尾松、云南松的花粉与其他松树花粉及混淆品蒲黄区分,而且可以鉴定市售松花粉产品的原料来源。结果表明,采用叶绿体基因可以对花粉的DNA进行扩增并实现对花粉来源的鉴定。该方法可以作为松花粉原料来源的鉴定体系,保证松花粉产品质量的稳定性,也为松花粉及产品质量的检测标准的完善和补充提供了新的DNA分子标记手段。

小茴香及其常见混伪品的分子标记鉴定

小茴香与孜然、莳萝子、葛缕子、蛇床子在外观形态上相似,存在掺假及混淆使用的现象。准确鉴别小茴香及其混伪品对维护小茴香产品质量和保护消费者利益具有重要意义。针对传统的形态学和理化鉴别方法的不足,文章通过比较小茴香及其混伪品的叶绿体全基因组,在accD基因中发掘了小茴香可区别于其他混伪品的单核苷酸多态性位点,并分别设计了小茴香及其混伪品的位点特异性引物。在建立的多重位点PCR体系下,小茴香产生了336 bp的特异性条带,其混伪品则产生了168 bp的特异性条带。方法同时验证了小茴香及其混伪品的2个SNP位点,可以在一个反应体系中同时将小茴香与其4种混伪品区分,鉴定结果准确可靠。因此,文章建立的多重PCR体系为小茴香鉴定提供了新的DNA分子标记方法,也为其他香辛料产品来源的鉴定提供了方法借鉴。