大气细粒子中阴离子表面有机活性物质分析方法的优化

为优化大气细粒子中阴离子表面有机活性物质的亚甲蓝分光光度法和乙基紫分光光度分析法,分别从样品前处理和分析测定两方面对分析方法进行优化,并采用2种优化方案对北京市大气细粒子样品进行分析测定.结果表明：①2种优化方案的最佳超声提取频率、最佳初始水浴温度和最佳超声提取时间均分别为40 Hz、30℃和35 min;②亚甲蓝优化方案的最佳显色剂使用量为0.70 mg,其中中性亚甲蓝和酸性亚甲蓝使用量均为0.35 mg,最佳静置时间为30~45 min;③乙基紫优化方案的最佳显色剂使用量为0.098 mg,最佳静置时间为30 min,最佳辅助性试剂使用量分别为pH=5的醋酸盐缓冲液0.4 mL,乙二胺四乙酸二钠10μmol,硫酸钠0.25 mmol.采用2个优化方案测得的北京市大气细粒子样品中ρ（MBAS）（MBAS为亚甲蓝活性物质）和ρ（EVAS）（EVAS为乙基紫活性物质）分别为0.14~0.39和0.14~0.47μg/m^3.与亚甲蓝优化方案相比,乙基紫优化方案的试验操作更简便、标准曲线线性关系更好,更适合大气细粒子中阴离子表面有机活性物质的测定.

大气细粒子阳离子表面有机活性物质分析方法的优化

分别从样品前处理和分析测定两方面对大气细粒子中阳离子表面有机活性物质的二硫蓝分光光度分析法进行优化,并采用优化方案对北京市大气细粒子进行了分析.结果表明:(1)优化的最佳样品前处理条件中超声提取频率为40 Hz、初始水浴温度为30℃、超声提取时间为30 min;(2)优化的最佳分析测定条件中二硫蓝使用量为1.29 mg(0.5 m L的2.58 g/L二硫蓝溶液)、最佳静置时间为30 min、醋酸盐缓冲液(pH为5)最佳使用量为3 m L.二硫蓝分光光度法优化方案标准曲线的R^2为0.998 6,线性较好.采用该优化方案测得的北京市大气细粒子中阳离子表面有机活性物质浓度的平均值为12.87 pmol/m^3,其浓度水平数量级是阴离子表面有机活性物质的1/10,其浓度水平高于英国诺威奇与爱丁堡,但低于马来西亚吉隆坡.

人参SQE基因干扰载体的构建及转化

目的探讨SQE基因对人参皂苷合成的影响。方法根据SQE基因保守区序列,分别设计合成其正反义片段引物行RT-PCR扩增,扩增产物分别与pMD18-T质粒连接后转化E.coli DH5α,获得的pMD18-T-SQE-S、pMD18-T-SQE-A重组质粒经双酶切后,将正反义片段与质粒pMHZ112反向连接,转化E.coli DH5α,构建SQE基因RNAi双元表达载体pMHZ112-SQE。电击法将鉴定正确的重组质粒pMHZ112-SQE转化农杆菌GV3101感受态细胞,再利用农杆菌介导法转化人参愈伤组织,提取抗性人参愈伤组织细胞基因组DNA,进行PCR检测并计算抗性愈伤转化率;同时提取人参皂苷,采用HPLC方法检测抗性人参愈伤组织的皂苷含量。结果结果显示总RNA较完整无降解,质量较好;RT-PCR扩增产物正反义片段大小与预期一致;重组质粒pMD18-T-SQE-S、pMD18-T-SQE-A和pMHZ112-SQE分别经双酶切进行测序鉴定,结果表明目的基因已插入重组质粒且连接方向正确。人参愈伤组织细胞基因组DNA的PCR检测结果显示1个菌落经2对引物扩增结果均呈阳性,证明构建的pMHZ112-SQE重组质粒已成功整合入植物基因组中,其抗性愈伤转化率为1%。转化pMHZ112-SQE重组质粒后,人参抗性愈伤组织中单体皂苷Rg1、Re、Rc含量明显下降,Rb1略有升高,实验组与对照组(转化空质粒)间Rg1、Re、Rb1、Rc的含量差异显著(均P<0.05);而2组均未检测出Rb2和Rd。结论成功构建了SQE基因RNAi双元表达载体,通过转化人参愈伤组织抑制SQE基因的表达,可以调控人参皂苷含量发生相应的改变。

北京市典型城区PM_2.5中正构烷烃的污染特征与来源

2013年6月在北京及华北平原大城市空气污染联合观测期间,使用大流量PM2.5采样仪分昼、夜采集北京市典型城区环境空气中PM2.5样品,利用GC-MS技术对PM2.5中正构烷烃的污染水平、分布特征与来源进行分析,并且结合后向轨迹分析了远距离传输的影响.结果表明：观测期间ρ（PM2.5）为29.73~275.30μgm3,PM2.5中ρ（总正构烷烃）为50.33~143.49 ngm3.PM2.5中正构烷烃质量浓度随碳数分布呈单峰-后峰型和双峰-后高型2种;Cmax（主峰碳数）为C29或C31;CPI（碳优势指数）为1.34~6.66;LMWHMW〔ρ（C14~C24正构烷烃）ρ（C25~C36正构烷烃）〕为0.10~0.31.观测期间PM2.5中正构烷烃主要来自高等植物蜡,并且主要来自温带植物;其次来自化石燃料和生物质的不完全燃烧.观测期间来自北京市南向气团轨迹出现概率最高,影响最为突出,其次为来自东南沿海方向和内蒙古中西部方向的气团轨迹.