鹅源鼠伤寒沙门菌的分离鉴定及遗传进化分析

从发病雏鹅肝脏中分离到1株细菌,根据培养特性、镜检结果、生化特征、血清学分型及PCR检测结果,表明分离菌为鼠伤寒沙门菌。动物试验结果表明,分离菌可致死雏鹅;药敏试验表明,该菌对环丙沙星、痢特灵、菌必治、阿米卡星、链霉素等药物敏感,对利福平和四环素耐药,与其它家禽或水禽来源的沙门菌相比,该分离株耐药性不严重。将分离菌16SrDNA基因进行扩增,PCR产物经胶回收试剂盒纯化后测序,序列Blast分析与血清型鉴定一致。将序列与GenBank上已登录的29株不同来源的鼠伤寒沙门菌序列进行比较,构建系统进化树,结果显示分离菌与美国分离的VDL-SS334株位置最为接近,同源性为95.9%。

蛋源摩氏摩根菌分离、鉴定及遗传进化分析

本研究利用传统细菌鉴定方法、革兰氏阴性细菌生化鉴定系统及16SrDNA序列分析对分离自市售新鲜鸡蛋中的菌株进行形态学、培养特性及生化特性等生物学特性鉴定及遗传进化分析,结果表明分离株为摩氏摩根菌。药物敏感性试验结果表明,该菌株对痢特灵、利福平、四环素、磷霉素、多黏菌素B和阿奇霉素有耐药性,属于多重耐药菌株。序列分析结果显示,该分离菌株与目前已分离的其他食源性摩氏摩根菌菌株高度同源。

猪源奇异变形杆菌的分离鉴定及集群运动分析

本试验从发病猪肝脏中分离到1株细菌,经革兰氏染色镜检、生化试验、药敏分析、16SrDNA测序,确认该菌为1株多重耐药奇异变形杆菌。该菌与GenBank中其他9株不同来源的奇异变形杆菌进行16SrDNA比对分析,从遗传进化规律方面证明不同来源的的奇异变形杆菌亲缘性极其相近。周期性群集运动分析结果表明在含0.5%和1.0%琼脂平板上,该菌不以圆环样周期运动;在含1.5%和2.0%琼脂平板上,该菌以圆环样周期运动。

一株致鸡产蛋下降新城疫病毒的分离与分子鉴定

某鸡场蛋鸡群产蛋大幅下降,采集病鸡不同脏器研磨,接种SPF鸡胚分离病毒,结果发现输卵管研磨液接种的鸡胚死亡,收集死亡胚尿囊液进行血凝和血凝抑制试验鉴定病毒,证实为新城疫病毒。采用RT-PCR方法扩增分离该病毒的F基因,克隆测序,并对该序列进行分析,结果表明该毒株为基因Ⅶ型新城疫病毒,裂解位点序列显示该毒株属强毒。

同时感染雏鹅的两种血清型沙门菌分离鉴定及遗传进化分析

为了解鹅源沙门菌的病原学特性,本研究从一发病雏鹅体内分离到2株细菌,根据培养特性、染色镜检、生化试验、PCR检测及血清学分型结果鉴定,分离菌分别为鼠伤寒沙门菌与印第安纳沙门菌。药敏试验表明,2个沙门菌分离株均为多重耐药菌株,其中鼠伤寒沙门菌耐3种药物(耐药率16.7%),而印第安纳沙门菌耐12种药物(耐药率66.7%);2个分离株均对头孢曲松钠、呋喃唑酮、多粘菌素B及链霉素表现高度敏感。对分离菌株16S r DNA基因进行扩增测序后,与Gen Bank登录的22株不同血清型沙门菌序列进行比较,构建系统进化树,结果显示:2个分离菌株具有较高同源性,与大多数泛嗜性血清型亲缘性较近,而与鸡沙门菌感染密切相关的血清型亲缘性相距较远。本研究为鹅沙门菌病的流行病学调查积累了数据,也为临床防控提供了试验依据。

致鹅卵黄性腹膜炎大肠杆菌外膜蛋白A前体蛋白的克隆表达

以致鹅卵黄性腹膜炎大肠杆菌分离株G8107菌株基因组DNA为模板,用PCR法扩增ompA precursor基因,PCR产物用EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切,酶切产物回收与相同黏性末端的表达载体pET-32a(+)连接构建表达ompA precursor的重组质粒,将此重组质粒转化入表达宿主菌BL21(DE3),抽提质粒,酶切鉴定及测序正确后诱导表达。对转化菌株以IPTG进行诱导后,裂解细菌,离心,上清进行SDS-PAGE鉴定。测序结果显示,ompA precursor基因大小为1 014 bp,编码338个氨基酸残基,蛋白相对分子质量约为36。原核表达产物经SDS-PAGE分析表明,以28℃1.0 mmol/L的IPTG诱导6 h,该基因表达效果最好。经Western Blot检测,表达的重组蛋白可与抗His标签蛋白单抗反应。

奶牛乳房炎凝固酶阴性葡萄球菌耐药性分析

本研究对江苏部分奶牛场致隐性乳房炎病原进行流行病学调查，采样并进行细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化鉴定，共分离到35株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）。用常规药敏纸片法对CNs分离菌株的抗生素耐药情况进行分析，结果显示分离培养到的35株CNS对临床常用抗生素万古霉素、左氟沙星、克拉霉素、苯唑西林、诺氟沙星、氯霉素、环丙沙星、头孢噻肟、磷霉索和呋喃妥因等高度敏感，高敏率在60％～80％之间；而对青霉素G、复方新诺明和多黏菌素B有一定的耐药性，耐药率为70％～100％。分离菌株表现了较强的多重耐药性，耐20种药物的细菌有3株，耐15种药物的细菌有1株，耐14种药物的细菌有1株，62．9％的CNS分离菌株能耐5种以上抗生素，表明导致奶牛隐性乳房炎CNS菌株耐药情况不容小视。

江苏地区奶牛乳房炎凝固酶阴性葡萄球菌耐药基因分析

对江苏地区多个奶牛场采样,并对奶牛乳房炎(Bovine mastitis,BMT)检测阳性奶样进行病原菌分离、鉴定。对分离出的凝固酶阴性葡萄球菌(Coagulase-negative Staphylococci,CNS)分别进行20种药物的敏感性试验和相关耐药基因检测。结果显示,BMT检测阳性的奶样有610份,528份检出细菌,共检出细菌802株,鉴定为CNS的217株;大部分CNS对万古霉素、左氟沙星、氯霉素、磷霉素、呋喃妥因敏感,对青霉素、大观霉素具有较强耐药性;CNS对β-内酰胺类(blaZ)、大环内酯类(ermC)和四环素类(tetK、tetM、tetL、tetO)耐药基因的检出率分别为29.95%、2.30%、24.88%、1.84%、1.84%和0.00%。

419株奶牛源葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素耐药性分析

对江苏部分奶牛场采集的奶样所分离的419株葡萄球菌分别进行青霉素、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟、苯唑西林等5种β-内酰胺抗生素的敏感性试验和相关耐药基因检测。结果表明:试验中分离的葡萄球菌对5种药物表现出不同程度的耐药性,其中对青霉素的耐药率最高,达到85.20%;其次是头孢他啶,耐药率为52.98%;苯唑西林耐药率为37.95%;头孢曲松和头孢噻肟耐药率较低分别是4.53%和2.63%。419株葡萄球菌β-内酰胺类抗生素耐药相关基因blaZ、mecA的检出率分别是22.37%和1.08%。证明对部分奶牛场进行耐药监测有助于临床抗生素的选用,为奶牛乳房炎控制提供科学依据。

江苏省七个县域猪嵴病毒感染的流行病学调查

根据猪嵴病毒3D基因保守序列设计1对特异性引物,用RT-PCR方法对从江苏省7个县域采集的220份猪腹泻肛拭样品进行检测,调查猪嵴病毒在江苏省的流行情况,以进一步丰富猪嵴病毒在我国的流行病学调查数据。所有样品猪嵴病毒感染阳性率达52.73%(116/220),阳性猪场占79.41%(27/34)。对5个不同来源阳性样品中获得的3D基因序列进行测序分析,结果显示,5株猪嵴病毒3D序列与GenBank中已知的国内外猪嵴病毒的相应序列在核苷酸水平具有较高同源性。调查结果表明,猪嵴病毒在江苏省部分县域腹泻猪群中有较高感染率,但猪嵴病毒在其中的作用尚有待进一步的研究。

雏鸡脑炎型鸡白痢沙门氏菌感染的诊断与防治

某黄鸡养殖农户4条大棚雏鸡总存栏量40 000只左右,在12日龄免疫后发病。临床症状表现为出现有神经症状的"扭头鸡",采食量下降,病鸡在跑动后有后蹲的姿势。第一条棚雏鸡先发病,随后3条棚雏鸡相继发病,病症相似。病程持续近10天,总死亡量约1 000只。根据发病背景、症状观察、病理变化、细菌分离及PCR试验、生化试验和血清型鉴定等一系列工作,诊断为由鸡白痢沙门氏菌引起的细菌性疾病。同时进行了病原菌的动物回归试验,在雏鸡体内成功复制出该临床疾病。根据药敏试验结果对发病鸡群进行治疗,使病情得到迅速的控制。

光热催化氧化VOCs的研究进展

挥发性有机污染物(volatile organic compounds,VOCs)是加重大气复合污染的重要前体物之一。催化氧化技术是在催化剂的作用下,将VOCs氧化分解为无毒的CO 2和H 2O,是目前最有效的治理手段之一。综述了国内外VOCs催化氧化技术的研究进展,针对传统的热催化氧化技术的高能耗和光催化净化技术的低效率等问题,重点总结了光热催化剂的设计理念和对其作用机制的认知,展望了VOCs光热催化氧化技术未来的发展应用方向。