利率市场化条件下我国商业银行发展面临的问题及解决措施

利率市场化是提高资本市场资源配置效率,解决国家内部宏观经济发展问题的必然选择。在利率市场化条件下,商业银行业发展存在收入来源过于单一、存款资金价格被低估、贷款定价生成机制不完善、利率缺口管理滞后等诸多不适应的问题。商业银行必须转变发展思路,改变传统的收入结构模式,加强内部成本管理,借鉴成熟的利率成本定价模型和预测机制,加强信贷资源的优化投放。

“贷款难”与“难贷款”的双向困局——中小企业融资问题及对策探析

无论是在发达国家,还是在发展中国家,中小型企业都为国家经济发展做出了巨大贡献。由于中小型企业具有规模小、经营灵活等特点,在一定程度上它能够带动整个经济市场的发展。改革开放以来,特别是进入新世纪以来,我国中小企业不断发展壮大,已成为我国国民经济和社会发展的重要力量,在繁荣经济、增加就业、推动创新、扩大出口、改善民生等方面,发挥着越来越重要的作用。

从客户认知谈受信赖的友好型银行的打造

建立良好的银行与客户的关系是银行生存和发展的必要,银行友好的服务是客户能否产生信赖的重要依据。本文从客户认知角度谈信赖的友好型银行的打造体现了银行以客户为中心的服务宗旨,金融从业人员在工作中不仅要按监管等部门的要求进行,同时也要考虑民众的需求,满足客户不断增长的金融需要,双方友好合作,互相信赖,利益共赢,是银行业长远发展的必由之路。

企业文化建设重在实践

企业文化必须坚持重在实践的原则。企业文化理念的提炼,必须深深植根于企业生存和发展的实践。企业员工应该是企业文化的创造者和体现者。在企业文化建设过程中,必须加强与企业文化理念相适应的制度建设,必须充分发挥企业管理者的示范表率作用。

气肿疽梭菌NanA基因核酸疫苗的免疫效果评价

为了检测气肿疽梭菌NanA基因核酸疫苗的免疫效果,在成功构建pVAX1-NanA真核表达重组质粒的基础上将其转染至Vero细胞,通过间接免疫荧光鉴定其表达,并将成功构建的pVAX1-NanA质粒大量提取后免疫Balb/c小鼠,设置pVAX1-NanA核酸疫苗组、pVAX1空载体组和PBS对照组。对小鼠采血并分离血清,用ELISA测定血清中的IgG、IgG1、IgG2a抗体水平和IFN-γ、IL-4细胞因子水平;第3次免疫2周后,用流式细胞仪测定小鼠脾脏中的CD4^+和CD8^+T细胞水平。结果表明,pVAX1-NanA核酸疫苗免疫Balb/c小鼠后,小鼠血清中IgG、IgG1、IgG2a的抗体水平极显著高于pVAX1空载体组和PBS对照组(P<0.01);IFN-γ和IL-4细胞因子水平极显著高于pVAX1空载体组和PBS对照组(P<0.01);CD4^+、CD8^+T细胞分析表明,pVAX1-NanA免疫组的CD4^+和CD8^+T细胞水平显著高于pVAX1组和PBS对照组(P<0.05),pVAX1-NanA核酸疫苗组的CD4^+/CD8^+T细胞比值高于pVAX1空载体组与PBS对照组(P<0.05),pVAX1空载体组和PBS对照组之间无显著差异(P>0.05)。试验成功制备了pVAX1-NanA核酸疫苗,且pVAX1-NanA核酸疫苗可刺激Balb/c小鼠产生体液免疫和细胞免疫。

NADC30-like谱系猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为定量检测NADC30-like谱系猪繁殖与呼吸综合征病毒(NADC30-like PRRSV),本研究针对NADC30 PRRSV株的ORF6基因保守区域设计1对特异性引物,通过优化反应条件,建立了一种灵敏度高、耗时短、操作简便且可量化的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。建立的标准曲线结果显示:Ct值与质粒标准品浓度之间存在良好的线性关系,相关系数(R~2)为0.995。该方法特异性强,除对NADC30-like PRRSV有特异性扩增外,对猪圆环病毒2型(PCV2)、猪塞尼卡病毒(SVA)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、猪细小病毒(PPV)、经典型猪繁殖与呼吸综合征病毒(C-PRRSV)和NADC34-like PRRSV等病原均无扩增。对质粒标准品的检测下限可达4.62×10~1拷贝/μL,敏感性为常规PCR方法的100倍。组内变异系数与组间变异系数均小于1%,重复性较好。利用该方法与常规PCR方法同时检测53份血清样品,该方法的阳性检出率为11.3%(6/53),高于普通PCR的阳性检出率(9.4%,5/53),二者的总符合率为89.11%。本研究建立的SYBR Green I荧光定量PCR方法可以用于NADC30-like PRRSV的快速检测,为PRRS的防控提供技术支持。

隧道浅埋偏压段盖挖法施工技术

山体偏压情况下隧洞进口施工,采用明洞暗做有利于施工安全和环境保护,能有效减小山体的纵横向推力,有效地减少对邻洞的扰动,有利于加快了施工进度。

特异性溶瘤腺病毒调控肺癌细胞表达PD-L1及诱导凋亡的研究

目的:探究特异性溶瘤腺病毒(Ad-Mock、Ad-T)对肺癌细胞上PD-L1表达的调控作用及对细胞凋亡的影响。方法:采用荧光定量PCR法及Western blot检测溶瘤腺病毒在24 h和48 h对NCI-H446、NCI-H226、A549细胞表达PD-L1的影响;通过结晶紫染色、WST-1、Hoechst与JC-1法检测溶瘤腺病毒对肺癌细胞的凋亡抑制作用。结果:特异性溶瘤腺病毒在24 h和48 h均可抑制肺癌细胞表达PD-L1,抑制情况为Ad-T>Ad-Mock,且PD-L1表达量与作用时间呈负相关;溶瘤腺病毒对3种肺癌细胞均具有抑制作用并通过降低线粒体膜电位的方式诱导细胞凋亡,且抑制效果为Ad-T>Ad-Mock,抑制作用与时间呈正相关。结论:特异性溶瘤腺病毒可以抑制肺癌细胞PD-L1的表达并可诱导肺癌细胞的凋亡,对肺癌细胞具有抑制作用。

庄河市“三库”灌区水田结构调整与规划思路

庄河市“三库”灌区2001年停止农业供水,实施“三庠”联调向大连城市供水,通过定性、定量分析,在保证城市用水的同时,对“三库”灌区的种植结构调整,并保证盐碱地水田的灌溉用水,保障农民利益不受损失。

35m箱梁真空辅助灌浆密实度检测

真空辅助压浆应用广泛,但施工要求高,施工难度大,保证压浆密实度至关重要,创新性采用PCDA循环,成功解除了真空辅助压浆密实度不够的难题,成功达到了施工质量要求,有推广价值。

气肿疽NanA基因真核表达质粒的构建与鉴定

为构建气肿疽NanA基因真核表达质粒,根据GenBank中已发表的气肿疽梭菌NanA基因序列,设计合成了1对特异性引物,以气肿疽梭菌基因组DNA为模板,扩增出NanA目的基因并克隆至pMD 18-T simple载体,将连接后的pMD 18-T-NanA进行鉴定分析。将克隆质粒pMD 18-T-NanA进行双酶切后,与pVAX1真核表达质粒连接。结果表明:构建的重组克隆质粒pMD 18-T-NanA和重组表达质粒pVAX1-NanA经PCR鉴定和酶切鉴定正确。该试验成功构建了气肿疽NanA基因真核表达质粒,为气肿疽核酸疫苗的制备奠定了基础。

庄河灌区续建配套与节水改造工程质量控制管理

庄河灌区续建配套与节水改造工程质量控制是工程建设的关键,业主单住、监理单位、施工单位、质量监督部门各自建立完善的质量保证体系,使工程建设得到顺利进行,工程质量得到保证。

基于科学发展观的商业银行网点运营研究

商业银行作为重要的金融服务机构，承担着资金融通和满足客户金融需求的重要任务。作为基本业务单元的商业银行网点，如何围绕经济建设中心强化自身建设，加快网点功能转型．对商业银行健康稳定运行发挥着极其重要的作用。因此，积极贯彻落实科学发展观，深入研究商业银行网点所面临的内外部环境，寻找出其中的问题和不足，制定出相应的运营对策，具有十分重要的理论和现实意义。

猪圆环4型病毒Cap蛋白的原核表达

以本实验室扩增的内蒙猪圆环4型病毒(PCV4)毒株的ORF2基因序列为参考,对其密码子进行优化并送往公司进行质粒合成,通过设计特异性引物,扩增出Cap蛋白基因。将目的基因克隆至pET-28a载体,构建出pET28a-PCV4-Cap重组表达质粒。将重组质粒转化至表达宿主菌BL21(DE3)pLysS中进行诱导表达,制备PCV4 Cap重组蛋白。优化表达条件和SDS-PAGE分析结果显示,Cap重组蛋白能够在沉淀中大量表达且在IPTG终浓度为0.2 mmol/L、37℃诱导6 h条件下表达量最高,其约为27 kDa。经Western blot验证,条带单一,与预期结果相同。本试验结果为了解PCV4 Cap蛋白及建立PCV4血清流行病学快速检测方法奠定了基础。

气肿疽梭菌NanA基因克隆及生物信息学分析

为了对气肿疽梭菌NanA基因进行克隆及生物信息学分析,试验根据GenBank中已发表的气肿疽梭菌NanA基因序列设计并合成1对特异性引物,以气肿疽梭菌总DNA为模板,扩增出NanA目的基因并克隆至pMD18-T载体中,对测序正确的NanA基因进行序列对比分析,对NanA蛋白进行理化性质分析与二级结构预测,同时使用在线软件预测NanA蛋白三级结构。结果表明:成功扩增出气肿疽梭菌Nan A基因,与参考序列相比,共存在3处核苷酸突变,核苷酸序列和氨基酸序列与NCBI公布的JF4135 NanA基因序列的同源性均为99.8%。NanA蛋白分子质量约为71 ku,具有较高的抗原指数,二级结构以β-折叠和无规则卷曲为主,有多个抗原表位区域。

广西JXA1-like谱系PRRSV分离株的致病性研究

目的探讨广西地区猪繁殖与呼吸综合征的流行毒株特征,了解JXA1-like谱系猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病特性。方法取广西分离的JXA1-like谱系PRRSV毒株17-10-PI接种于4周龄健康仔猪,观察其临床表现、体温变化和病毒血症,并进行细胞因子检测和病理组织学分析,了解该毒株的致病性。结果17-10-PI组试验仔猪出现典型的病毒感染症状,体温在攻毒后6~10 d体温持续高于40.0℃,9 d时达到峰值40.8℃,15 d时有1头试验仔猪死亡。17-10-PI株能在试验仔猪体内快速复制引起病毒血症,相关细胞因子不同程度升高,以IFN-α和IL-2升高更为显著。剖检和病理学检查显示,17-10-PI株可致明显的间质增生性肺炎和炎性细胞大量浸润等病理损伤。结论17-10-PI株具有较强的致病性,能引起相关细胞因子升高和肺组织损伤。该研究可为JXA1-like谱系毒株的防控与疫苗的研发提供理论基础。

广西PRRSV分离株Y12018全基因组扩增和遗传进化分析

为监测广西地区猪繁殖与呼吸系统综合征病毒(PRRSV)的流行和变异情况,本研究从广西某猪场采集样本成功分离获得PRRSV毒株并命名为Y12018,并参考扩增全长所需的10对特异性引物对其全基因组序列分段扩增后连接,为进一步鉴定Y12018毒株,将Nsp2与GP5等序列分别与参考毒株进行对比,分析该分离株与国内外典型毒株的遗传进化关系从而探究其基因组来源。结果显示,Y12018毒株基因组全长为15 017 bp(除去polyA尾),与NADC30毒株遗传关系最为接近,全基因组同源性为94.4%;Nsp2同源性为96.8%,与NADC30相比缺失的2个氨基酸,对应VR-2332为587~588位点;GP5同源性为93.5%,对应氨基酸序列有31个位点发生改变;其余各开放阅读框的同源性为92.9%~97.1%;遗传演化分析结果表明分离株Y12018属于类NADC30毒株。

塞尼卡病毒VP1蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体制备

目的利用原核表达系统表达塞尼卡病毒(Seneca Valley virus,SVV)VP1蛋白,并用纯化的蛋白免疫小鼠,制备VP1多克隆抗体。方法PCR扩增SVV VP1蛋白基因,并将其克隆至pET-28a(+)载体,构建pET-28a-VP1重组质粒。将重组质粒转化至BL21(DE3)pLySs大肠埃希菌,使用IPTG诱导表达目的蛋白并优化表达条件,利用His标签镍离子蛋白纯化柱纯化蛋白。用纯化后的蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,并用接毒后的BHK-21细胞进行Western blot验证。结果PCR扩增SVV VP1目的基因片段为792bp,与预期相符。成功构建pET-28a-VP1重组质粒,转化至DE3后经IPTG诱导表达相对分子质量单位约为35×10^3的目的蛋白,以37℃、0.8mmol/L诱导剂诱导4h表达量最高,且重组蛋白以包涵体形式表达。用His标签Ni^2+-NTA金属螯合蛋白质纯化柱纯化蛋白并免疫小鼠,制备的抗血清能与接毒后的BHK-21细胞裂解产生及纯化的VP1蛋白反应。结论原核表达了塞尼卡病毒VP1蛋白,制备了抗小鼠多克隆抗体,该抗体具有免疫反应性。

塞尼卡病毒VP1蛋白亚单位候选疫苗小鼠免疫评价

用纯化的塞尼卡病毒(Seneca Valley virus,SVV)VP1蛋白,辅以不同佐剂免疫小鼠,分别从体液免疫及细胞免疫对小鼠的免疫效果进行评估。结果表明,VP1-AL组与VP1-FCA组的特异性抗体一免后7 d均呈显著上升趋势,PBS组变化不明显。二免后14 d,VP1-FCA组特异性抗体效价达到最高值(1∶163840),PBS组抗体效价是1∶16(P<0.01);VP1-AL组特异性抗体效价达到最高值(1∶5120),PBS组抗体效价是1∶16(P<0.01)。中和抗体效价,二免后7 d VP1-FCA组达到最高值(1∶512),PBS组抗体效价是1∶8(P<0.01);二免后14 d VP1-AL组达到最高值(1∶1024),PBS组抗体效价是1∶16(P<0.01)。小鼠T淋巴细胞亚群CD3^(+)CD4^(+)与CD3^(+)CD8^(+)在二免后VP1-FCA组显著升高(P<0.05),VP1-AL组极显著升高(P<0.01)。淋巴细胞增殖试验表明各试验组均显著升高(P<0.05)。对免疫小鼠血清中细胞因子检测结果表明,IL-4的分泌显著提高(P<0.05),IL-2与IFN-γ变化不明显。本研究利用SVV VP1重组蛋白联合佐剂,VP1-AL组是有前景的候选疫苗,可诱导小鼠体内产生免疫应答且效果良好,为SVV疫苗猪体免疫研究奠定理论基础。

插入BC株V蛋白的重组新城疫病毒(LaSota株)毒力鉴定及对先天性免疫的影响

为探究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的V蛋白拮抗宿主干扰素(interferon,IFN)信号通路对先天性免疫的影响,本试验测定了低毒力LaSota株插入BC株V蛋白的重组病毒rL-BC的毒力和感染后4,8,12h的感染效率,病毒感染后上清的IFN-β生成情况和P-STAT1、MDA5蛋白的表达水平,并检测感染后DF1、A549细胞先天性免疫分子的转录水平。结果显示,重组病毒的颅内致病指数(intracerebral pathogenicity index,ICPI)升高,不同时间的感染效率均高于亲本毒。此外,V蛋白的插入使上清中IFN-β生成量降低,P-STAT1和MDA5蛋白的表达水平下降,LGP2、TLR3等多种模式识别受体及ISG15、IFN-α等IFN通路相关分子的转录水平下降。以上均表明NDV的V蛋白通过抑制先天性免疫反应从而提高病毒毒力。