《禽生产学》课程思政教学实践与探索

《禽生产学》是动物科学相关专业的专业核心课程,是理论与实践紧密结合的学科,对培养学生分析问题、解决问题的能力和综合素质起着重要作用。为了积极响应新时代对高等院校教育工作的新要求,以"课堂思政"的方式,在专业课程授课过程中融入思想政治教育。明确《禽生产学》课程思政的总体目标,从创新教学内容、改革教学方法并优化课堂教学结构、完善考核制度及注重培养学生的创新能力等方面进行教学改革,初步探索如何在课程教学中落实"立德树人"的根本任务,进而达到教书育人的目的。

基于高光谱图像的鸡种蛋孵化早期胚胎性别鉴定

为了对鸡种蛋孵化早期胚胎进行性别鉴定,构建了高光谱图像采集系统,在400~1 000 nm范围内获取94枚种蛋孵化0~12 d的高光谱透射图像。分别在胚胎的圆头、中间、尖头3个部位选择感兴趣区域（region of interest,ROI）,获取400~1 000 nm波段的响应信号,构建了支持向量机（support vector machine,SVM）、偏最小二乘判别分析（partial least squares discriminant analysis,PLSDA）和人工神经网络（artificial neural network,ANN）的鸡胚胎性别鉴定模型,并比较了不同孵化时间雌雄胚胎的鉴别准确率。试验结果表明,SVM模型、PLSDA模型和ANN模型均对孵化第10天种蛋中间部位检测效果最好。随后通过分析第10天种蛋中间部位光谱响应的差异,选取600~900 nm的光谱值构建胚胎性别鉴定模型,结果发现,3种模型的判别准确率均有上升,SVM模型和PLSDA模型预测集样本判别准确率均为75.00%,ANN模型预测集样本判别准确率达到82.86%。其中,ANN构建的种蛋孵化胚胎性别检测模型的整体效果优于SVM模型和PLSDA模型。结果表明高光谱图像技术在检测鸡种蛋孵化早期胚胎性别方面有一定效果,但种蛋蛋壳的个体差异会对鉴定准确率造成一定影响。

TGF-β/Smad信号通路在Follistatin调节鸭骨骼肌卫星细胞增殖过程中的作用机制

【目的】卵泡抑素(Follistatin)能够调节骨骼肌肥大和脂肪沉积,可促进骨骼肌卫星细胞增殖。拟采用体外重组Follistatin处理增殖期的鸭骨骼肌卫星细胞,阐明TGF-β/Smad信号通路在Follistatin调节鸭骨骼肌卫星细胞增殖过程中的作用机制。【方法】以孵化14 d的鸭胚为试验材料,采用差速贴壁的方法分离骨骼肌卫星细胞,待细胞长到70%—80%时,将培养基换成含有浓度分别为0、1、10、100 ng·m L-1的Follistatin培养基,继续培养36 h后,采用CCK-8检测骨骼肌卫星细胞增殖情况;使用抗pax7抗体染色,DAPI染核,鉴定骨骼肌卫星细胞;采用real-time q PCR方法检测Follistatin对骨骼肌卫星细胞增殖过程中的标记基因PCNA、生肌因子基因Myo D和TGF-β信号通路中TGF-β、Smad2和Smad3的表达的影响。【结果】在倒置显微镜下观察,传代培养12 h鸭骨骼肌细胞一部分未贴壁呈圆形,一部分贴壁呈梭形。24 h后细胞全部贴壁,细胞略有变长。2 d后细胞继续增多,且呈长梭形。3 d后细胞数目增加,个别细胞融合。4 d后细胞数目进一步增加,细胞变粗,个别细胞融合。5 d后有少量细胞开始分化,细胞进一步融合。Pax7免疫荧光染色分析显示,95%以上的细胞中Pax7呈阳性表达;CCK-8检测细胞增殖分析表明,不同浓度的Follistatin处理鸭骨骼肌卫星细胞后,各处理组细胞增殖均显著高于对照组(P<0.01),且10 ng·m L-1 Follistatin处理鸭骨骼肌卫星细胞增殖效果最明显,为最佳处理浓度;与对照组相比,10 ng·m L-1 Follistatin处理组的Myo D基因表达量显著下降(P<0.05),PCNA基因表达量显著升高(P<0.05),Myf5基因表达量显著升高,TGF-β和Smad2基因表达显著升高(P<0.05),且Smad3基因表达量极限著升高(P<0.01);Western blotting检测蛋白表达水平结果表明,与对照组相比,TGF-β、Smad2和Smad3磷酸化水平也显著升高。【结论】10 ng·m L-1 Follistatin能显著促进鸭骨骼肌卫星细胞增殖,这一过程可通过TGF-β/Smad信号通路实现。使用最佳Follistatin处理浓度能够显著促进鸭骨骼肌卫星细胞增殖,该研究为鸭骨骼肌生长发育调控机理研究奠定分子基础。

多能性相关基因PouV、Nanog和Sox2在鸡胚原始生殖细胞中的表达

分离19期鸡胚生殖嵴细胞,采用原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)-体细胞共培养获得PGCs集落,借助PGCs特异性标记基因Dazl和CvhmRNA表达检测、过碘酸雪夫氏(periodic acid-Schiff,PAS)染色、阶段特异性胚胎抗原(stage-specific embryonic antigen,SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4)免疫组化检测均表明所形成的细胞团为PGCs。RT-PCR检测及基因测序结果表明干细胞多能性相关基因PouV(Oct4同源基因)、Nanog和Sox2在鸡PGCs中均有显著表达。在去除饲养层、添加15%血清并采用悬浮培养的条件下,鸡PGCs在体外可分化形成类胚体(embryoid bodies,EBs)。在PGCs体外分化形成EBs第0d、3d、5d和10d分别检测Dazl、Cvh、PouV、Nanog和Sox2mRNA的表达。结果表明:PouV、Nanog和Sox2在体外培养的鸡PGCs中显著表达,并且在PGCs体外分化过程中,其表达量伴随PGCs标记基因Dazl和Cvh一起呈明显下调趋势,提示PouV、Nanog和Sox2在维持鸡PGCs多能性中起着重要的作用。

北京鸭、连城白鸭及其杂交F_(5)资源群体骨骼肌发育差异的研究

[目的]本研究以北京鸭、连城白鸭和杂交F_(5)资源群体(北京鸭♂×连城白鸭♀杂交第5个世代)胸肌和腿肌为研究对象,分析不同品种鸭骨骼肌的发育规律及品种差异,探究基因组DNA甲基化水平变化对骨骼肌发育的影响。[方法]通过HE染色,比较胚胎期骨骼肌生长发育关键时间点(E14、E21、E28)和上市日龄(7周龄,7W)鸭骨骼肌肌纤维的表型特征;分析成肌发育和DNA甲基化调控相关基因的表达差异;DNA dot blot检测骨骼肌中5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)水平。[结果]在胚胎期,北京鸭的胸肌重和腿肌重均显著高于连城白鸭和F_(5)资源群体。HE染色结果显示,胚胎期北京鸭肌细胞核密度最高(P<0.05);7W北京鸭肌肉组织的肌纤维横截面积和肌纤维直径显著高于F_(5)资源群体,而肌纤维密度显著低于F_(5)资源群体。在胚胎期,成肌发育相关基因在F_(5)资源群体胸肌中表达水平较高,而腿肌中则偏低;7W时,F_(5)资源群体肌肉组织中Myf5、Mrf4、MyoG和MyHC的表达水平均显著高于北京鸭(P<0.05)。在E21时,3个品种鸭的胸肌、腿肌组织中全基因组5hmC水平最高,表明处于去甲基化的高峰期。Tet2基因在胚胎期和7周龄F_(5)资源群体骨骼肌中均有较高表达水平;Dnmt1、Dnmt3a、Tet1和Tet3在7周龄北京鸭肌肉组织中的表达水平较高(P<0.05)。[结论]胚胎期肌纤维特性在品种间表现出显著差异,并影响成体肌肉形成。基因组DNA甲基化水平的差异影响肌肉发育相关基因的表达,导致不同品种鸭之间的肌肉发育差异。

基于L、a、b色度系统的乌骨鸡肤色规律研究

研究选取乌骨鸡群体,分别于7、10和15周龄随机选取60只(公母各半)进行屠宰测定,收集颈、肩周、髋关节、肛周和胫部皮肤,肌肉、骨膜、嗉囊、肌胃、小肠、心脏、肝脏、脾脏、肾脏等不同位点L、a和b值,阐明肤色分布规律和色度指标之间的关系。结果显示:7周龄时,公母鸡皮肤和肌肉的L、a和b值存在较大差异,10、15周龄公母鸡间差异不显著。L、a和b值在乌骨鸡群体中存在非线性回归关系:L=4.33a^2+0.31b^2-4.59a+4.65b+36.02,说明肤色选育需要同时约束三个指标才能取得比较满意的结果。经因子分析发现,L值解释了31.4%的方差变异且比较有规律可以作为肤色选育的主选指标,其次是肛周和胫部的a、b值比较能够反映肤色的变异,可作为辅选指标。

饲料中使用发酵豆粕对乳鸽生长发育和肉品质的影响

试验旨在探索在亲鸽普通日粮中使用发酵豆粕对乳鸽屠宰性能、器官指数、肠道发育、肌肉品质及肌苷酸含量的影响。试验组使用发酵豆粕,对照组使用普通豆粕。研究发现:试验组全净膛率高于对照组,达到极显著水平(P<0.01);试验组肝脏和肌胃器官指数低于对照组,达到显著水平(P<0.05);试验组十二指肠、空肠、回肠绒毛长度/隐窝深度均高于对照组分别达到显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)水平;试验组胸肌和腿肌肉色黄度b值低于对照组(P<0.05);试验组肌苷酸含量高于对照组(P<0.05),但和肌苷酸合成相关的AMPD1、ATIC和GART基因表达水平不存在显著差异。结果表明亲鸽饲喂含有发酵豆粕的日粮能够提高乳鸽肉用性能,改善乳鸽的肠道发育,改善肉质风味。

萨索鸡与AA肉鸡肌肉脂肪酸组成的比较

为了研究萨索鸡与AA肉鸡肌肉营养品质特点,分别选取4、6、8和10周龄的萨索鸡、AA肉鸡各12只,测定其肌肉脂肪酸组成。结果显示:萨索鸡、AA肉鸡脂肪酸组成随着周龄的增加呈现出相同的规律,2个鸡种胸肌n-3系列脂肪酸(n-3)、n-6系列脂肪酸(n-6)、必需脂肪酸(EFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)、多不饱和脂肪酸/单不饱和脂肪酸(PUFA/MUFA)随周龄的增加呈下降的趋势,n-6/n-3、MUFA随周龄的增加呈上升的趋势;饱和脂肪酸(SFAs)中,2个鸡种胸肌C12:0、C14:0、C16:0随周龄的增加呈上升的趋势,C15:0、C18:0、C21:0随周龄的增加呈下降的趋势;MUFAs中,2个鸡种胸肌C14:1、C16:1、顺式C18:1n9c随周龄的增加呈上升的趋势,C22:1n9随周龄的增加呈下降的趋势;PUFAs中,2个鸡种胸肌顺式C18:2n6c、C20:3n6、C20:3n3、C20:5n3随周龄的增加呈下降的趋势。当2个鸡种达到上市周龄时(AA肉鸡6周龄、萨索鸡10周龄),萨索鸡的肉品质和肌肉风味要优于AA肉鸡。本试验结果揭示了2个鸡种在不同周龄以及上市周龄肌肉的营养特点,为育种和生产提供依据。

乌骨鸡专门化品系皮肤色度规律及FM拷贝数变异研究

肤色遗传研究表明,乌骨鸡的乌度性状主要由纤维黑色素基因(FM)和真皮黑色素抑制基因(ID)共同作用决定。FM基因内的两个基因片段(Dup1和Dup2)的异常复制可能是引起乌骨鸡黑色素过度沉淀的关键因素。试验利用白羽肉鸡与丝羽乌鸡杂交经三代闭锁选育后的群体,7周龄时选取体重相近肤色差异较明显的黑色皮肤公鸡(BS)200只和灰色皮肤公鸡(GS)200只,于7、10、15周龄测定皮肤不同位点的L、a和b值,结合系谱信息估计色度指标的育种值,并挑选肤色差异最极端的个体各50只,利用荧光定量PCR检测Dup1和Dup2基因片段的拷贝数,分析拷贝数与肤色之间的关系。结果显示:L、a和b值育种值分别介于0.31~0.35,0.32~0.38和0.16~0.21之间;肤色差异随周龄增加逐渐减小,该性状的选择宜早不宜晚;肩部和肛门周围裸露皮肤的L值在两组间差异显著,可作为选育的主选指标并综合考虑a和b值;两组个体之间的Dup1和Dup2基因拷贝数没有明显差异,无法用于分子标记辅助选择。

雷贝拉唑、兰索拉唑及奥美拉唑联合治疗Hp感染消化性胃溃疡临床疗效

目的探讨雷贝拉唑、兰索拉唑及奥美拉唑联合治疗Hp感染消化性胃溃疡的临床疗效。方法回顾性分析我院收治的56例Hp感染消化性胃溃疡患者的临床资料,随机分为对照组和研究组,各28例。对照组给予雷贝拉唑、兰索拉唑联合阿莫西林治疗,研究组给予雷贝拉唑、兰索拉唑联合奥美拉唑治疗,比较两组患者的临床治疗效果。结果研究组治疗总有效率为100.00%,高于对照组的75.00%(P<0.05)。研究组的Hp清除率高于对照组(P<0.05),溃疡面积及临床症状积分低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者的IL-6、IL-8水平均明显改善,且研究组IL-6、IL-8水平显著优于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论雷贝拉唑、兰索拉唑及奥美拉唑联合应用能有效提高Hp清除率,降低炎性因子水平,安全可靠。

苯磺酸氨氯地平片联合阿托伐他汀钙片治疗高血压合并冠心病的疗效观察

目的:为高血压合并冠心病患者探讨出疗效确切且安全性高的药物治疗方案。方法:随机将86例高血压合并冠心病患者分为对照组42例与研究组44例,分别使用硝苯地平缓释片、苯磺酸氨氯地平片联合阿托伐他汀钙片治疗。结果:两组均无明显的不良反应,但研究组的总有效率为93.18%,明显高于对照组的73.81%,差异比较具有统计学意义(P<0.05)。结论:高血压合并冠心病患者使用苯磺酸氨氯地平片联合阿托伐他汀钙片治疗可获得颇为满意的效果,临床应用价值高。

禽类胚胎期生殖细胞分化调控的研究

性腺的发育和成熟是各种动物繁殖的基础,禽类性腺的发育和分化与哺乳动物基本相似,但也存在一些明显的不同之处,如激素的调控模式、卵巢的不对称发育和卵泡等级发育等。禽类性腺的组织形态,发生及机能分化的特征和规律为生殖生物学、内分泌学和毒理学研究提供了一个优良的动物模型。在养禽业生产中,很多经济性状都与性腺发育直接相关。

利用shRNA慢病毒载体制备转基因鸡模型

本实验采用RNA干扰(RNAi)的方法,针对Raldh2基因序列的保守区域设计了三对短的shRNA(short hairpin)分子,并构建质粒干涉载体进行慢病毒包装。转染鸡孵化第15.5天的鸡胚卵巢生殖细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,转染效率达到80%~90%。通过qRT-PCR及SCP3免疫荧光染色检测,成功筛选出抑制效率达70%的靶位点。

维甲酸对鸡胚生殖细胞减数分裂调控作用的研究

减数分裂是生殖细胞特有的、分化形成配子的过程,且在雌雄两性的发生时间不同。在胚胎期,雌性卵巢内生殖细胞即开始进入减数分裂,但在胚胎期睾丸中,RA被CYP26B1降解,使生殖细胞停滞在有丝分裂G0/G1期。在本实验中,我们结合胚胎期卵巢的体外培养和RNA干扰等手段,探索RA对鸡胚胎期生殖细胞减数分裂中的调控作用及其机制。

siRNA干扰Wnt11对鸭成肌细胞增殖的影响

为了探究Wnt11(无翅型MMTV整合位点家族成员11)对鸭骨骼肌成肌细胞增殖的影响以及可能与Wnt11相关的信号通路,采用体外分离培养鸭骨骼肌成肌细胞,脂质体介导siRNA(小干扰RNA)转染干扰基因的表达,qRT-PCR(实时荧光定量PCR)检测基因表达变化,Ed U(5-乙炔基-2'-脱氧尿苷)染色分析细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期变化及信号通路抑制剂处理。结果显示:干扰Wnt11的表达后,增殖相关基因CCND1(细胞周期蛋白D1)、CDK6(周期蛋白依赖性激酶6)和PCNA(增殖细胞核抗原)的表达量极显著降低(P<0.01),Ed U阳性细胞数极显著降低(P<0.01),处于S期的细胞数显著降低(P<0.05);当用Akt(蛋白激酶B)抑制剂处理鸭成肌细胞后,Wnt11表达量显著降低(P<0.05),而干扰Wnt11表达后,PI3K(磷脂酰肌醇-3-羟激酶)和Akt的表达量显著升高(P<0.05)。提示:Wnt11在鸭成肌细胞增殖过程中有重要调控作用,Wnt11发挥调控作用需要PI3K/Akt信号通路参与,且二者间存在反馈作用。

不同品种鸡蛋品质及孵化期发育变化的比较研究

为了比较不同品种鸡种蛋在孵化期间外部品质和胚胎发育的差异性,以白羽鸡、红标鸡和温氏麻鸡为研究对象,在相同的孵化条件下,分析不同孵化期(9、12、15、18、20胚龄)蛋外部品质的差异。结果表明:白羽鸡蛋孵化初始(0 d)蛋重明显高于红标鸡和温氏麻鸡,但蛋形指数显著低于红标鸡(P<0.05),极显著低于温氏麻鸡(P<0.01),红标鸡的蛋形指数显著低于温氏麻鸡(P<0.05)。在发育进程上,品种间存在显著差异,在孵化9~12 d时温氏麻鸡胚重显著高于红标鸡和白羽鸡(P<0.05);在孵化15~20 d期间白羽鸡的生长速度加快,显著高于红标鸡和温氏麻鸡(P<0.05)。并且不同性别鸡胚在相同孵化期发育存在差异,雄性比雌雄发育稍快,但差异性不显著(P>0.05)。在孵化的前15d,温氏麻鸡的失重率显著高于白羽鸡和红标鸡;而在孵化18 d后,红标鸡的失重率显著高于白羽鸡(P<0.05)。此外,孵化过程中蛋壳厚度逐渐降低,不同孵化期蛋壳厚度的减少程度存在差异;同一品种内,白羽鸡和温氏麻鸡在孵化9~12 d和15~20 d蛋壳厚度变化不大,差异性不显著(P>0.05);但孵化15~20 d的蛋壳厚度显著低于9~12 d的蛋壳厚度(P<0.05)。研究表明,温氏麻鸡胚胎早期发育速度较快,而红标鸡在胚胎发育后期有追赶趋势,且3个品种种蛋在孵化后期蛋外部品质的差异显著。

萨索鸡与白羽鸡及其杂交F1代生长和屠宰性能比较研究

试验旨在探索萨索鸡与白羽鸡(AA鸡)杂交对其生长和屠宰性能的改良作用,并研究体尺性状与屠宰性状间的相关性。选取萨索鸡、白羽鸡及其杂交F1代各500只,在一栋鸡舍内分栏饲养,饲喂相同日粮,自由采食和饮水。第10周时,每个组合随机取12只鸡(公母各半)进行体尺测量和屠宰测定。结果显示:杂交F1代公鸡、母鸡的体重和生长速度均大于萨索鸡,体尺性状极显著(P<0.01)高于萨索鸡。屠宰性状中与产肉性状相关的屠体重、半净膛、全净膛、翅膀重、胸肌重、腿重、腿肌重均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于萨索鸡。萨索鸡和杂交F1代的体斜长、胫长、胸宽、胸深与活体重、屠体重、半净膛、全净膛、翅膀、腿重表现出正相关关系,体尺与屠宰性状的相关性显著(P<0.05)或极显著水平(P<0.01)高于白羽鸡。萨索鸡与白羽鸡杂交F1代生长性状和屠宰性能较萨索鸡有较大的提高。

低聚木糖对乳鸽生长和免疫性能的影响

在保姆鸽日粮中添加不同浓度的低聚木糖(XOS),观察低聚木糖对乳鸽生长和免疫功能的影响,寻找作用于乳鸽生长及免疫调节的最适低聚木糖添加量。结果显示:添加低聚木糖能显著提高1-14日龄乳鸽日增重、降低乳鸽死亡率(P<0.05);显著改善15-28日龄乳鸽免疫器官指数(P<0.05);在乳鸽1-14日龄,当保姆鸽日粮中添加100 mg/kg和150 mg/kg低聚木糖时,乳鸽血液中血清总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量显著高于对照组(P<0.05);在乳鸽15-28日龄,试验各组IgG含量均显著高于对照组(P<0.05),添加150 mg/kg组IL-2含量显著高于对照组(P<0.05),添加100 mg/kg组、150 mg/kg组和250 mg/kg组IgM含量显著高于对照组(P<0.05),添加100 mg/kg组、150 mg/kg组和200 mg/kg组IgA含量显著高于对照组(P<0.05)。结果表明:在保姆鸽日粮中添加浓度为150 mg/kg的低聚木糖时,对乳鸽的生长和免疫功能的增强有显著的促进作用。

TET蛋白质在动物原始生殖细胞发育过程中的作用

原始生殖细胞(primordial germ cell,PGC)是指能发育成精子或卵子的祖先细胞。PGC在向生殖细胞发育过程中会经历原有基因印记的去除、新印记的形成和维持,而DNA去甲基化是维持这一过程的主要机制。研究发现,TETs(ten-eleven translocations)蛋白质可以通过不同机制调控DNA去甲基化过程,在原始生殖细胞的形成和胚胎发育过程中发挥重要作用。该文综述了TET家族的结构、调控去甲基化的机制及其在动物原始生殖细胞发育过程中的作用。

萨索鸡、涟水土鸡及其杂交F1代生长曲线的拟合分析

为了研究萨索鸡,涟水土鸡及其杂交F1代(萨索鸡♂×涟水土鸡♀)的生长发育规律,为其科学饲养管理及后期选育提供理论依据,本试验测定了萨索鸡,涟水土鸡及其杂交F1代(萨索鸡♂×涟水土鸡♀)0~12周体重数据,利用Logistic、Von Bertalanffy和Gompertz三种非线性生长模型拟合其生长曲线,并比较各生长模型的拟合效果。结果显示,3种模型均能较好地拟合三个群体的生长曲线(R2>0.99),但综合考虑拟合度和E值及成熟体重后发现,Gompertz模型拟合效果最佳;萨索鸡、涟水土鸡及其杂交F1代相比,具有较大的出雏重,成熟体重、拐点体重、最大周增重、绝对生长速度和相对生长速度,杂交鸡的成熟体重、拐点体重、最大周增重、绝对生长速度和相对生长速度比涟水土鸡都有很大幅度的提高,拐点时间也有提前,显著优于涟水土鸡。Gompertz模型对三个群体的的拟合效果最佳,杂交F1代的生长性能与涟水土鸡相比具有较大幅度的提高。