槐耳颗粒对索拉非尼耐药的肝细胞癌细胞凋亡的影响研究

目的探讨槐耳颗粒对索拉非尼耐药的肝细胞癌(HCC)细胞生长的抑制作用及其分子机制。方法利用梯度浓度槐耳颗粒处理HCC细胞,分析槐耳颗粒对索拉非尼耐药的HCC细胞增殖、迁移和侵袭的效果。采用生物信息学手段分析微小RNA-31-5p(miR-31-5p)与sprouty相关EVH1域蛋白1(SPRED1)的可能互作关系。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HCC细胞中miR-31-5p、SPRED1的表达;采用CCK-8、克隆形成、划痕愈合、Transwell以及流式细胞术实验分别检测细胞活力、增殖、迁移、侵袭和凋亡;采用RNA免疫沉淀(RIP)实验和双荧光素酶实验验证miR-31-5p与SPRED1的结合关系。结果槐耳颗粒可以显著抑制索拉非尼耐药的HCC细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。生物信息学分析发现miR-31-5p在HCC中高表达,而槐耳颗粒可以下调miR-31-5p的表达,抑制索拉非尼耐药的HCC细胞的增殖和转移,并诱导细胞凋亡;miR-31-5p可靶向抑制SPRED1的表达。SPRED1在HCC中表达下调,过表达SPRED1可以逆转miR-31-5p过表达对索拉非尼耐药的HCC增殖和转移的促进作用。结论槐耳颗粒通过miR-31-5p/SPRED1轴抑制索拉非尼耐药的HCC转移,表明槐耳颗粒有潜力作为治疗HCC的新型药物。

血清微RNA-429、肿瘤坏死因子受体相关因子6与肝癌肝动脉化疗栓塞术灵敏度相关性及槐耳颗粒干预作用研究

目的 探讨血清微RNA-429(miR-429)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)与肝癌肝动脉化疗栓塞术(TACE)灵敏度相关性及槐耳颗粒干预作用。方法 选取2016年1月至2021年1月唐山市工人医院收治的80例肝癌病人,采用电脑随机数字表法按照随机、平行、对照原则分为对照组和观察组,各40例。两组均给予TACE治疗,对照组术后1 d起口服甲苯磺酸索拉非尼片,观察组在对照组基础上,于术前1个月及术后3 d开始口服槐耳颗粒,术后3个月评估疗效,比较两组治疗前、术后1个月、术后3个月血清miR-429、TRAF6蛋白表达,应用Spearman分析治疗前后血清miR-429、TRAF6蛋白变化与灵敏度关系,并比较不同灵敏度病人治疗前血清miR-429、TRAF6蛋白变化,采用受试者操作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析血清miR-429、TRAF6蛋白治疗前后变化预测治疗灵敏度的价值,Pearson分析血清miR-429与TRAF6蛋白关系。结果 观察组总有效率为95.00%,高于对照组80.00%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后1个月、术后3个月血清miR-429(0.42±0.11、0.51±0.13)高于对照组(0.33±0.09、0.34±0.10)、TRAF6蛋白(2.49±0.65、2.02±0.57)低于对照组(3.30±0.76、3.18±0.69)(P<0.05);观察组血清miR-429、TRAF6蛋白术后1个月与治疗前差值、术后3个月与治疗前差值大于对照组(P<0.05);血清miR-429、TRAF6蛋白术后1个月与治疗前差值、术后3个月与治疗前差值和灵敏度呈正相关(P<0.05);血清miR-429、TRAF6蛋白术后1个月与治疗前差值、术后3个月与治疗前差值:敏感>一般>较差(P<0.05);血清miR-429、TRAF6蛋白术后1个月与治疗前差值预测敏感的AUC分别为0.78、0.74;治疗前血清miR-429与TRAF6蛋白呈负相关(P<0.05)。结论 血清miR-429、TRAF6与肝癌TACE灵敏度相关,槐耳颗粒可提高miR-429表达,降低TRAF6蛋白,增强肝癌TACE灵敏度,提高疗效。

3-溴丙酮酸对人乳头瘤状甲状腺癌TPC-1细胞迁移和侵袭能力的影响

目的观察3-溴丙酮酸对体外人乳头瘤状甲状腺癌TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法分别用含0、20、40、60、80、100、120、140、160、180和200μmol/L 3-溴丙酮酸的细胞培养液培养TPC-1细胞24 h后,MTT检测细胞增殖活性。含0、100和200μmol/L 3-溴丙酮酸的细胞培养液培养TPC-1细胞24 h或48 h后,划痕实验及transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、MMP-9、人源葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,Glut1)和Ⅰ型膜型基质金属蛋白酶(membrane-type 1 matrix metalloproteinase,MT1-MMP)的表达水平。结果100、120、140、160、180和200μmol/L 3-溴丙酮酸均抑制TPC-1细胞的增殖活性,呈剂量依赖性(均P<0.01)。3-溴丙酮酸作用于TPC-1细胞24和48 h,随着药物浓度的增高,TPC-1细胞迁移越慢,侵袭细胞越少(均P<0.05)。3-溴丙酮酸作用于TPC-1细胞24和48 h,TPC-1细胞内Glut1、MT1-MMP、MMP-2和MMP-9表达水平均随药物浓度增高而减弱(均P<0.05)。结论3-溴丙酮酸可抑制TPC-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力,并可能与下调Glut1、MT1-MMP、MMP-2和MMP-9蛋白表达有关。

二甲双胍与顺铂联合诱导人结肠癌HCT-8细胞凋亡的研究

目的研究二甲双胍联合顺铂对HCT-8人类结肠癌细胞凋亡的影响及其可能机制。方法将HCT-8人类结肠癌细胞分成二甲双胍组(MET)、顺铂组(DDP)、二甲双胍联合顺铂组(MET+DDP)、空白对照组(CK) 4组,MTT实验观察4组细胞于24 h、48 h、72 h时的增殖能力;流式细胞术观察各组细胞48 h的凋亡比例;Western blotting观察各组细胞48 h时凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3(激活型)以及AKT/GSK-3通路蛋白的表达水平。结果该实验中MET+DDP组的细胞增殖能力弱于其它三组(P<0. 05);细胞凋亡比例高于其它三组(P<0. 05); Bax、caspase-3(激活型)表达量高于其它组群,Bcl-2、P-AKT、P-GSK-3表达量低于其它组群,AKT、GSK-3在4组中表达量相对恒定(P>0. 05)。结论二甲双胍、顺铂可能通过下调AKT/GSK-3信号通路,改变Bcl-2家族蛋白的表达活性从而促进HCT-8人类结肠癌细胞的凋亡,并促进p-caspase-3剪切转化为caspase-3(激活型);二甲双胍与顺铂可协同发挥促HCT-8人类结肠癌细胞凋亡的作用。

二甲双胍对Eca-109食管癌细胞迁移能力的影响及机制研究

目的:研究二甲双胍对Eca-109食管癌细胞迁移能力的影响及其可能机制。方法:MTT实验观察在盐酸二甲双胍作用下Eca-109食管癌细胞的增殖能力;划痕实验观察盐酸二甲双胍作用24、48h时Eca-109食管癌细胞的迁移能力;Western blotting观察细胞侵袭、迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9及GLUT1、MMP-14的表达。结果:盐酸二甲双胍可在一定程度上抑制Eca-109食管癌细胞的迁移能力,并降低GLUT1、MMP-14、MMP-2、MMP-9的表达(P<0.05)。结论:二甲双胍可以降低Eca-109食管癌细胞的迁移能力,可能是通过抑制GLUT1、MMP-14、MMP-2、MMP-9通路而实现的。

姜黄素对甲状腺乳头状癌TPC?1细胞侵袭和迁移的影响

目的姜黄素对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞株TPC-1的侵袭和迁移影响研究较少。文中旨在探究姜黄素对PTC TPC-1细胞侵袭和迁移的影响,并探讨可能的机制。方法将TPC-1细胞制成单细胞悬液,分别给予含不同姜黄素浓度的培养基干预分为:0μmol/L组(DMSO溶剂)以及10、20、40、60、80、100μmol/L组。CCK8法检测各组细胞存活率的抑制效应;采用划痕和Transwell实验检测姜黄素对TPC-1细胞迁移和侵袭的影响;采用RT-PCR和Western blot方法检测各组细胞葡萄糖转运蛋白1(Glut1)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)mRNA及蛋白的表达水平。结果各组间细胞存活率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。24 h后,0、10、20、40μmol/L组细胞迁徙力分别为:[(0.842±0.096)、(0.911±0.049)、(0.926±0.107)、(1.076±0.093)mm],两两组间比较差异有统计学意义(P<0.05);48 h后,组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。0、10、20、40μmol/L组迁移的细胞数量分别为196、142、57和17个/100倍视野,两两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。各组间Glut1和MT1-MMP mRNA及蛋白的相对表达量组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素具有抑制PTC TPC-1细胞侵袭和迁移能力,可能与降低Glut1和MT1-MMP蛋白表达有关。

高中语文教学与班级管理的巧妙结合研究

班级管理实质上是针对学生这一课堂主体进行教育教学的管理,想要切实的帮助学生实现长期稳定的发展目标,构建完善的教育教育管理体系是很有必要的。为了最大程度满足学生的教学需求必须要贯彻落实“以人为本”的教育方针,抓住全员育人的根本理念,准确的认识到学生是整个教育体系的核心组成部分,积极主动地为学生营造良好的学习氛围,从而提高语文教学质量。

二甲双胍对部分恶性肿瘤细胞增殖能力的影响

(1)目的探讨二甲双胍对TPC-1人乳头瘤状甲状腺癌细胞、Eca-109人食管癌细胞、SHSY5Y人神经母细胞瘤细胞、PC-3人前列腺癌细胞、HT-29人结肠癌细胞及HCT-8人结肠癌细胞增殖能力的影响,分析二甲双胍的抗肿瘤作用。(2)方法将6种恶性肿瘤细胞均匀地种植于96孔板内,37℃、双气、饱和湿度下常规培养;MTT实验检测各肿瘤细胞在不同浓度盐酸二甲双胍作用48小时的细胞增殖能力及1.5mg/mL盐酸二甲双胍作用24小时、48小时、72小时的细胞增殖能力。(3)结果盐酸二甲双胍抑制了TPC-1人乳头瘤状甲状腺癌细胞、Eca-109人食管癌细胞、SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞、PC-3人前列腺癌细胞、HT-29人结肠癌细胞及HCT-8人结肠癌细胞的增殖(P <0.05),且呈剂量及时间依赖性。(4)结论二甲双胍可降低实验中各种肿瘤细胞的增殖能力,抑制细胞增殖,提示二甲双胍可能具有广泛的抗肿瘤作用。

二甲双胍对体外PC-3人前列腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响及机制

目的探讨二甲双胍对体外PC-3人前列腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并探究其可能作用机制。方法不同浓度(0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 mg/mL)盐酸二甲双胍作用于PC-3人前列腺癌细胞24h时,采用MTT法选择最佳药物作用剂量。将3.0 mg/mL盐酸二甲双胍作为实验药物剂量(观察组)作用于PC-3人前列腺癌细胞,并设不予进行药物处理的对照组,作用24、48、72 h时,采用MTT法检测各组细胞的增殖能力。另取PC-3人前列腺癌细胞,分别给予含有0、3.0、6.0、9.0 mg/mL盐酸二甲双胍的培养液(设置为CK、MET1、MET2、MET3组),于37℃恒温箱中培养24、48 h后,采用细胞划痕试验及Transwell试验检测各组细胞的迁移、侵袭能力;培养48 h后,采用Western blotting法检测各组细胞迁移、侵袭能力相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及人源葡萄糖转运蛋白1(Glut1)、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP,也称MMP-14)的表达活性。结果不同浓度盐酸二甲双胍作用于PC-3人前列腺癌细胞24 h时,细胞增殖能力随盐酸二甲双胍浓度增高而递减(P<0.05)。与对照组比较,观察组24、48、72 h时细胞OD值均低(P均<0.05)。划痕后0 h,CK、MET1、MET2、MET3四组无细胞区域占比比较,P>0.05,划痕后24、48 h,四组无细胞区域占比比较,P<0.05。CK及MET1组于划痕后0、24、48 h时无细胞区域占比比较,P均<0.05。CK组细胞迁移指数于划痕后24 h、48 h时大于MET1、MET2组(P均<0.05);划痕后48 h时,MET2组的迁移指数低于MET1组(P<0.05); MET3组的迁移指数为负数。侵袭细胞数比较,MET1<MET2<MET3<CK组(P均<0.05)。MMP-2、MMP-9、MMP-14、Glut1蛋白表达水平比较,CK组<MET1组<MET2组<MET3组(P均<0.01)。结论二甲双胍可抑制体外PC-3人前列腺癌细胞的迁移及侵袭能力,可能是通过下调Glut1/MMP-14/MMP-2、MMP-9信号通路实现的。

关于3-溴丙酮酸抗癌机制的探讨

3-溴丙酮酸是常见的化学药剂,属于强烷化剂,主要用作杀菌剂噻菌灵的中间体;近年来,有相关学者指出3-溴丙酮酸具有抗肿瘤的作用,并已通过实验得到证实。根据相关研究结果,3-溴丙酮酸可通过多种机制实现抗癌作用;就国内外关于3-溴丙酮酸的最新实验结果,探讨3-溴丙酮酸抗癌作用的可能机制,为3-溴丙酮酸在临床上的抗癌新应用提供理论依据。

二甲双胍联合奥沙利铂对人结肠癌细胞HCT-8迁移及侵袭的影响

目的探讨二甲双胍联合奥沙利铂对人结肠癌细胞HCT-8迁移及侵袭的影响,并研究其可能的机制。方法将HCT-8细胞分为四组:对照组、二甲双胍组、奥沙利铂组和联合用药组,分别用不含药物、含20mmol/L二甲双胍、含20μg/ml奥沙利铂以及20mmol/L二甲双胍+20μg/ml奥沙利铂的培养基培养。应用MTT法检测二甲双胍联合奥沙利铂对人结肠癌细胞的生长抑制作用;划痕实验和侵袭实验观察结肠癌细胞迁移和侵袭能力的改变;Western blot实验检测迁移、侵袭相关因子基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测结肠癌细胞中MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA的表达水平。结果MTT结果显示,二甲双胍及二甲双胍联合奥利沙铂均具有抑制HCT-8细胞增殖的作用,并呈时间-剂量依赖性,20mmol/L二甲双胍处理HCF-8细胞48h,抑制率为50%。依对照组→二甲双胍组→奥沙利铂组→联合用药组之序,OD值逐渐降低,HCT-8细胞的迁移和侵袭作用逐渐降低,MMP-2、MMP-9及VEGF蛋白表达量逐渐降低,MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA表达量逐渐降低,且两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍联合奥沙利铂能够显著抑制人结肠癌细胞HCT-8的迁移和侵袭,两者具有协同作用。