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入世后国有企业现代人力资源管理体系建设的思考 被引量:1
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作者 于晓方 路韦 罗汉卿 《黑龙江科技信息》 2003年第10期25-25,共1页
随着中国加入WTO,随着全球经济市场化、贸易和投资国际化、区域经济合作的步伐加快,人才竞争将愈演愈烈。外国公司在进入中国和本土化的过程中,对中国人才的需求大大超过以往,而中国企业要提高竞争力、拓展国际市场,对人才的渴求也大为... 随着中国加入WTO,随着全球经济市场化、贸易和投资国际化、区域经济合作的步伐加快,人才竞争将愈演愈烈。外国公司在进入中国和本土化的过程中,对中国人才的需求大大超过以往,而中国企业要提高竞争力、拓展国际市场,对人才的渴求也大为增加。一场激烈的人才争夺战已经拉开。但是,国内企业特别是一些国企对人力资源管理的认识还处于传统的人事管理阶段,急需更新观念。这些企业只有树立正确的人力资源管理理念,建立起现代人力资源管理体系,切实做好人才的引入、培养。 展开更多
关键词 入世 国有企业 人力资源管理 中国 人事管理
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广西壮族自治区健康成年人T淋巴细胞亚群分类绝对计数及CD_4/CD_8比值调查 被引量:23
2
作者 刘帅凤 刘伟 +7 位作者 陈杰 梁富雄 郭宁贞 黄达春 黎锋 于晓方 赖声汉 李杰 《中国艾滋病性病》 CAS 2004年第6期413-415,共3页
目的 初步建立广西壮族自治区健康人群外周静脉血CD3 、CD4、CD8T淋巴细胞绝对数值和CD4/CD8比值的参考范围。方法 用流式细胞仪 (FACSCalibur,FCS)、三色免疫荧光试剂和绝对计数管 (TnTEST/Tru COUNT) ,检测 110名广西健康成年人 (16... 目的 初步建立广西壮族自治区健康人群外周静脉血CD3 、CD4、CD8T淋巴细胞绝对数值和CD4/CD8比值的参考范围。方法 用流式细胞仪 (FACSCalibur,FCS)、三色免疫荧光试剂和绝对计数管 (TnTEST/Tru COUNT) ,检测 110名广西健康成年人 (16~ 5 6岁 )静脉全血CD3 、CD4、CD8T淋巴细胞绝对数值和CD4/CD8比值 ,并观察T淋巴细胞亚群分类计数在性别、年龄和民族上的差别。结果  110名健康成年人检测结果平均值 :CD3 为5 2 4± 5 4 1,CD4为 82 3± 30 5 ,CD8为 6 0 1± 2 4 8,CD4/CD8为 1 4 9± 0 5 3。进一步分析发现 ,CD4和CD4/CD8在民族分布上 (汉族 79名、壮族 31名 )的差异有显著的统计学意义 (P <0 0 5 )。结论 这次初步建立CD3 、CD4、CD8T细胞绝对数值和CD4/CD8比值正常参考范围 ,对于指导广西的艾滋病诊断及治疗工作有重要意义。 展开更多
关键词 流式细胞仪 TnTEST/TruCOUNT CD3、CD4、CD8T淋巴细胞 CD4/CD8比值
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土槿皮乙酸B增加活性氧水平诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和衰老的研究 被引量:4
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作者 于静华 张亚宏 +5 位作者 刘春禹 张文艳 田代真一 小野寺敏 于晓方 池岛乔 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第7期63-66,共4页
本研究旨在研究土槿皮乙酸B(PAB)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和衰老与活性氧的关系。在相差显微镜下观察4μmol/L PAB在36 h诱导细胞凋亡小体的出现;LDH方法显示PAB时间依赖性的增加凋亡比率;SA-β-半乳糖苷酶显示4μmol/L PAB作用3 d后... 本研究旨在研究土槿皮乙酸B(PAB)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和衰老与活性氧的关系。在相差显微镜下观察4μmol/L PAB在36 h诱导细胞凋亡小体的出现;LDH方法显示PAB时间依赖性的增加凋亡比率;SA-β-半乳糖苷酶显示4μmol/L PAB作用3 d后,去药再作用5 d,96%的细胞蓝染,细胞变大且扁平;流式细胞仪检测用DCFH-DA染色后4μmol/L PAB时间依赖性增加细胞内活性氧水平。所以4μmol/L PAB通过增加细胞内活性氧水平促进细胞凋亡和衰老。 展开更多
关键词 土槿皮乙酸B(PAB) 凋亡 衰老 人乳腺癌MCF-7细胞 活性氧
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科技人才绩效评估方法研究 被引量:12
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作者 刘振华 于晓方 武春友 《科研管理》 CSSCI 北大核心 2007年第z1期90-94,共5页
科技人才绩效评估是科技管理体制的重要组成部分,是保证科技工作顺利进行的基本运行机制。近年来,许多单位和部门都在探索科学、客观、公正的科技人才绩效评估方法,本文研究了科技人才绩效评估的含义和重要意义,对科技人才绩效评估的指... 科技人才绩效评估是科技管理体制的重要组成部分,是保证科技工作顺利进行的基本运行机制。近年来,许多单位和部门都在探索科学、客观、公正的科技人才绩效评估方法,本文研究了科技人才绩效评估的含义和重要意义,对科技人才绩效评估的指标体系和常见的评估方法进行了研究和论述。 展开更多
关键词 科技人才 绩效评估
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广西宾阳和凭祥吸毒人群队列细胞免疫研究分析 被引量:1
5
作者 刘帅凤 刘伟 +6 位作者 梁富雄 朱秋映 郭宁贞 黄达春 黎锋 于晓方 赖声汉 《应用预防医学》 2011年第2期69-72,共4页
目的回顾性研究分析广西宾阳和凭祥吸毒人群细胞免疫功能状况。方法对广西凭祥和宾阳两个队列456个吸毒者采集静脉全血进行HIV、HCV、全血细胞记数(白细胞、淋巴细胞)及T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8T淋巴细胞)和CD4/CD8检测分析。结果 (... 目的回顾性研究分析广西宾阳和凭祥吸毒人群细胞免疫功能状况。方法对广西凭祥和宾阳两个队列456个吸毒者采集静脉全血进行HIV、HCV、全血细胞记数(白细胞、淋巴细胞)及T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8T淋巴细胞)和CD4/CD8检测分析。结果 (1)HIV及HCV阳性吸毒人群、HIV阴性而HCV阳性吸毒人群均与健康人群比较,全血细胞记数(白细胞、淋巴细胞)及T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8)和CD4/CD8在统计学上差异都有显著性意义(P<0.01);(2)在以下两组比较中:HIV阴性而HCV阳性吸毒人群和HIV及HCV阴性吸毒人群比较;HIV及HCV阴性吸毒人群和健康人群的CD8+T淋巴细胞比较在统计学上差异有显著性意义(P<0.01),但CD4+T淋巴细胞、WBC、LY没有差异。(3)进一步分别分析在宾阳和凭祥两个点的HIV及HCV阳性吸毒人群,CD4+T淋巴细胞、CD4/CD8、WBC在统计学上有差异,但在HIV阴性而HCV阳性吸毒人群和HIV及HCV阴性吸毒人群,凭祥和宾阳队列组间的T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8+T淋巴细胞、CD4/CD8)和全血细胞记数(白细胞、淋巴细胞)在统计学上没有差异。结论感染HIV、HCV会导致人淋巴细胞免疫功能变化。即使没有感染HIV、HCV病毒,吸毒成瘾也会导致CD8+T淋巴细胞的改变,从而导致CD4/CD8改变。CD4+T淋巴细胞水平和HIV感染时间有关,和分布地区不一定有关。 展开更多
关键词 吸毒人群 HIV HCV LY T淋巴细胞亚群
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CaMKⅡ_γ通过上调NFκB信号通路促进结直肠癌细胞的增殖 被引量:3
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作者 徐菲 齐海燕 +1 位作者 于晓方 徐荣臻 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期649-653,共5页
目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)体内外促进结直肠癌细胞增殖的作用并探讨其机制。方法半定量RT-PCR法测定5种结直肠癌细胞系及20对结直肠癌组织及其配对癌旁组织中CaMKⅡγmRNA表达水平。用慢病毒载体pLenti6.3-M... 目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)体内外促进结直肠癌细胞增殖的作用并探讨其机制。方法半定量RT-PCR法测定5种结直肠癌细胞系及20对结直肠癌组织及其配对癌旁组织中CaMKⅡγmRNA表达水平。用慢病毒载体pLenti6.3-MCS-IRES2-eGFP制备慢病毒颗粒Lenti-CaMKⅡγ,转染SW620细胞,建立稳定表达CaMKⅡγ结直肠癌细胞系SW620-CaMKⅡγ。测定SW620-CaMKⅡγ细胞的生长曲线及克隆形成能力。Western blotting检测SW620-CaMKⅡγ细胞IKKα、IKKβ、IKKγ、p-IKKα/β、P-IκB和IκB表达水平。免疫荧光检测SW620-CaMKⅡγ细胞NF-κB p65核浆及核内的表达情况。检测裸鼠移植瘤的瘤体积。结果 CaMKⅡγ在5种结直肠癌细胞系中的mRNA水平均高,在20对组织中有18对癌组织mRNA水平比癌旁组织高。慢病毒转染的CaMKⅡγ过表达细胞系增殖能力增强(P<0.05)。CaMKⅡγ能够激活细胞内的NF-κB信号通路,促进NF-κ3 p65进核。CaMKⅡγ过表达细胞的裸鼠移植瘤瘤体积大于阴性对照(P<0.05)。结论 CaMKⅡγ体内外均能促进结直肠癌细胞的增殖,并激活NF-κB通路。 展开更多
关键词 钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ_γ 结直肠癌 核转当因子κB 细胞增殖
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SAMHD1抗肿瘤的作用机制 被引量:2
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作者 刘盼盼 翟辰洋 +2 位作者 高文英 王少华 于晓方 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第11期2656-2658,共3页
目的通过测定结肠癌中SAMHD1(109aa-626aa)相关突变体的表达情况探索其在抗肿瘤方面的作用。方法选择SAMHD1(109aa-626aa)在结肠癌中的5个典型突变体检测它们的表达量、活力大小及被Vpx降解的情况。结果所选择的SAMHD1(109aa-626aa)的5... 目的通过测定结肠癌中SAMHD1(109aa-626aa)相关突变体的表达情况探索其在抗肿瘤方面的作用。方法选择SAMHD1(109aa-626aa)在结肠癌中的5个典型突变体检测它们的表达量、活力大小及被Vpx降解的情况。结果所选择的SAMHD1(109aa-626aa)的5种突变体在结肠癌中的表达量、活力大小均有统计学差异(P<0.05)。结论与野生型相比SAMHD1(109aa-626aa)在结肠癌中的表达量下调、活力降低,更有利于肿瘤的发生。 展开更多
关键词 SAMHD1 DNTP 结肠癌 酶活
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1株新型肠道病毒的生物学特性鉴定 被引量:3
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作者 胡燕 侯俊 +4 位作者 沈宏辉 白冰珂 王志杰 于晓方 貌盼勇 《传染病信息》 2009年第3期140-142,共3页
目的从1例急性肝炎患儿粪便标本中分离到1株新型肠道病毒,鉴定其生物学特性。方法采用细胞培养、动物试验、中和试验、电子显微镜观察和分子生物学等技术进行鉴定。结果该病毒对乙醚不敏感,在pH3.0及37℃60min条件下稳定,56℃30min可以... 目的从1例急性肝炎患儿粪便标本中分离到1株新型肠道病毒,鉴定其生物学特性。方法采用细胞培养、动物试验、中和试验、电子显微镜观察和分子生物学等技术进行鉴定。结果该病毒对乙醚不敏感,在pH3.0及37℃60min条件下稳定,56℃30min可以被灭活;能在A549和RD细胞中稳定传代,并致细胞病变;不能被已有肠道病毒免疫血清中和;小白鼠乳鼠对该病毒不敏感;电子显微镜下可见27~30nm的肠道病毒样颗粒;部分核苷酸序列分析表明,病毒VP1区核苷酸序列与肠道病毒89型的同源性为87%,与其他病毒无有意义的同源性。结论该病毒的生物学特性与肠道病毒相似,但其抗原性和核苷酸序列等与已知肠道病毒有较大差异,可能属于肠道病毒89型的1个新亚型。 展开更多
关键词 肠道病毒 生物学特性 鉴定
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SAMHD1蛋白抗病毒作用机制研究的新进展
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作者 侯靖威 杜娟 +1 位作者 郑雯雯 于晓方 《生命科学研究》 CAS CSCD 2016年第1期76-81,共6页
作为新发现的抗病毒因子,SAMHD1蛋白是近年来分子生物学界研究的热点,但是其抗病毒作用机制尚不明确。已经报道的可能的抗病毒作用机制包括d NTP水解酶活性和T592位点的磷酸化状态。随着近两年来研究的不断发展,SAMHD1蛋白的RNA酶活性... 作为新发现的抗病毒因子,SAMHD1蛋白是近年来分子生物学界研究的热点,但是其抗病毒作用机制尚不明确。已经报道的可能的抗病毒作用机制包括d NTP水解酶活性和T592位点的磷酸化状态。随着近两年来研究的不断发展,SAMHD1蛋白的RNA酶活性和维持基因组稳定性的重要作用相继被发现。与此同时,SAMHD1蛋白的多聚体结构也受到了广泛的关注,从最初得到的二聚体晶体,到最近证实了GTP作为激活剂才能形成有抗病毒活性的同源四聚体,SAMHD1蛋白的多聚体结构及形成机制都得到了新的阐释。综合各种已知的生物学功能以及结构方面的信息,结合最新发表的研究成果,深入而全面地分析了SAMHD1蛋白复杂的抗病毒作用机制。 展开更多
关键词 SAMHD1蛋白 抗病毒作用机制 多聚体 晶体结构
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大型化工国有企业研究院所与高校合作构建创新团队的思考与实践 被引量:1
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作者 王刚 张喜文 +3 位作者 于晓方 刘建锟 王宁 陈标华 《当代化工》 CAS 2022年第4期967-970,共4页
国有化工大型企业研究院所在化工生态文明建设中,以国家重大科研项目为载体,与高校组构建创新团队。以基础、应用基础为先导,构建知识、技术创新的平台,开发共性、关键技术,为行业科技进步服务,依靠现代化工技术,改造传统化工企业,建立... 国有化工大型企业研究院所在化工生态文明建设中,以国家重大科研项目为载体,与高校组构建创新团队。以基础、应用基础为先导,构建知识、技术创新的平台,开发共性、关键技术,为行业科技进步服务,依靠现代化工技术,改造传统化工企业,建立新型化工产业。学科交叉的力度和广度是源头创新发展的关键性因素之一,团队带头人的作用、目标、运行的机制及其结构是创新团队的保障。 展开更多
关键词 科技创新 合作机制 创新团队
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能源化工领域国有企业科研单位青年科技人才队伍建设与实践 被引量:7
11
作者 姚新武 桂兴华 +1 位作者 于晓方 陈高升 《当代化工》 CAS 2019年第2期380-383,共4页
能源化工领域国有企业正处于转型发展关键时期,迫切需要发挥科研支撑引领作用。青年作为中国石化践行"爱我中华,振兴石化,为美好生活加油"初心和使命的生力军,是科技创新与传承发展的中坚力量。中国石油化工股份有限公司大连... 能源化工领域国有企业正处于转型发展关键时期,迫切需要发挥科研支撑引领作用。青年作为中国石化践行"爱我中华,振兴石化,为美好生活加油"初心和使命的生力军,是科技创新与传承发展的中坚力量。中国石油化工股份有限公司大连石油化工研究院结合"人才强院"工程,通过创新开展青年科技人员综合能力的培养与提升,在青年科技人才队伍建设方面取得了有益成效,将持续为中国石化实施创新驱动发展战略和打造世界一流进程提供不竭动力,也为系统内、领域内乃至国内科研单位青年科研人才队伍建设积累了可推广经验、提供了可借鉴样本。 展开更多
关键词 能源化工 国有企业 科研单位 青年科技人才队伍 建设与实践
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柯萨奇病毒A组16型感染性滴度检测用国家参考品的制备及标定 被引量:1
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作者 杜加亮 刘悦越 +5 位作者 于晓方 张文艳 贾双双 刘艳 赵岩 国泰 《国际生物制品学杂志》 CAS 2016年第6期275-280,共6页
目的 制备柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)感染性滴度检测用国家参考品,为CA16疫苗生产过程中的病毒滴度控制和CA16疫苗的免疫效果评价提供国家参考品.方法 将验证合格的CA16(C1亚型)培养液分装(0.5 ml/支)制成候选... 目的 制备柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)感染性滴度检测用国家参考品,为CA16疫苗生产过程中的病毒滴度控制和CA16疫苗的免疫效果评价提供国家参考品.方法 将验证合格的CA16(C1亚型)培养液分装(0.5 ml/支)制成候选参考品.3个独立实验室分别对候选参考品进行协作标定,用细胞培养法检测CA16感染性滴度,用Behrens-K(a)rber法计算半数细胞感染量(50% cell culture infective does,CCID50).同时,将CA16参考品分别置于-20、4、22~25(室温)和37℃条件下或反复冻融,进行热稳定性、长期稳定性和冻存稳定性研究.结果 制备的CA16参考品的病毒滴度为(6.80±0.95) lgCCID50/ml.CA16参考品于-60℃保存12个月、-20℃保存6个月和4℃保存28 d后的病毒滴度无显著下降,表明稳定性较好;在22~25℃(室温)和37℃条件下,CA16参考品每天的病毒滴度损失率分别为3.4%和4.4%,而且分别保存27和21 d后病毒滴度无明显下降;对CA16参考品反复冻融的病毒滴度损失率为4.8%/次.结论 成功制备了CA16感染性滴度检测用候选国家参考品,将CA16参考品赋值确定为(6.80±0.95) lgCCID50/ml. 展开更多
关键词 肠道病毒属 病毒感染性滴度 国家参考品
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胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过G→A突变抑制乙型肝炎病毒的复制 被引量:3
13
作者 张伟 张旭照 +4 位作者 方永明 何智文 应松成 徐荣臻 于晓方 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期135-139,共5页
目的 研究胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G(A3G)对HBV复制的影响及作用机制。方法 利用脂质体介导A3G和HBV的真核表达质粒瞬时共转染人肝癌细胞株HepG2,以空载体pcDNA3.1与HBV真核表达质粒共转染为对照,同时转染含增强型绿色荧光蛋白(EGFP... 目的 研究胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G(A3G)对HBV复制的影响及作用机制。方法 利用脂质体介导A3G和HBV的真核表达质粒瞬时共转染人肝癌细胞株HepG2,以空载体pcDNA3.1与HBV真核表达质粒共转染为对照,同时转染含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的质粒载体以判定转染效率。共转染两天后用荧光定量PCR方法定量细胞内核壳体(cofe)相关HBV DNA水平,用Western blot检测细胞内A3G和HBcAg的表达,并对细胞内cofe相关HBVDNAX基因进行PCR扩增、T.A克隆和测序,分析X基因中的碱基突变。结果 经EGFP判定的转染效率平均为29%。共转染0.5PgA3G和0.5μg HBV的HepG2细胞内core相关HBVDNA量平均下降为对照的8.9%,共转染2μgA3G和0.5μgHBV的平均下降为对照的0.6%。共转染A3G和HBV表达质粒后,HepG2细胞内HBV的X基因中发生G→A突变的数目明显增多,33个克隆中有9个克隆检测到了16-37个G→A突变,突变总数达254个,而对照的33个克隆中仅有2个克隆各检测到2个G→A突变。进一步的分析发现,共转染A3G后发生的G→A突变大多集中于几个热点区域,突变靶点常在GG二核苷酸中的第一个G上。结论 胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过诱导HBVDNA的X基因发生G→A超突变,抑制HBV在人肝癌细胞HepG2中的复制。 展开更多
关键词 APOBEC3G 胞嘧啶脱氨酶 乙型肝炎病毒 突变
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PD-1相关免疫调节应用的研究进展 被引量:3
14
作者 董燕 王涛 于晓方 《生命的化学》 CAS CSCD 2015年第6期709-714,共6页
程序性细胞死亡因子1(programmed cell death 1,PD-1)是一种共刺激分子,属于CD28家族,呈诱导性表达于活化的T细胞、B细胞和NK细胞表面,与其配体作用传递抑制性信号,发挥负向调控作用,这一信号通路在自身免疫性疾病、肿瘤发生、慢性病毒... 程序性细胞死亡因子1(programmed cell death 1,PD-1)是一种共刺激分子,属于CD28家族,呈诱导性表达于活化的T细胞、B细胞和NK细胞表面,与其配体作用传递抑制性信号,发挥负向调控作用,这一信号通路在自身免疫性疾病、肿瘤发生、慢性病毒感染中具有重要的生物学意义。通过研究PD-1及其配体与临床疾病的相关性,阐明其作用机理后,利用信号调节可以达到维持自身耐受、抑制肿瘤、抗病毒和提高机体免疫应答等免疫治疗的目的。本文对PD-1及其配体的生物学功能,免疫治疗等方面的进展进行回顾。 展开更多
关键词 PD-1 PD-L1/2 抗肿瘤 抗病毒 疫苗 免疫调节
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HIV-1疫苗免疫原设计的研究进展 被引量:2
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作者 张晓红 王涛 于晓方 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期88-92,共5页
至今,艾滋病仍是人类历史上最严重的传染病之一。设计和生产具有保护效力的预防型HIV-1疫苗一直被认为是战胜艾滋病的最佳途径。虽然经过了数十年的努力,但有效的HIV-1疫苗仍未研制成功。在进入临床试验的5种疫苗中,只有RV144实验显示出... 至今,艾滋病仍是人类历史上最严重的传染病之一。设计和生产具有保护效力的预防型HIV-1疫苗一直被认为是战胜艾滋病的最佳途径。虽然经过了数十年的努力,但有效的HIV-1疫苗仍未研制成功。在进入临床试验的5种疫苗中,只有RV144实验显示出31%的保护效力,但并不能控制已感染者病情进程。通过临床实验数据和体外实验分析,目前主要有两种免疫原设计策略:诱导广谱中和抗体(bNAb)和有效的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答。诱导bNAb可以阻止病毒感染或者降低感染率,其主要免疫原包括:病毒样颗粒、天然包膜蛋白三聚体和稳定的bNAb结合表位等。而诱导有效的CTL应答可以减缓病毒感染进程,其主要免疫原包括:"马赛克"疫苗、保守区免疫原和病毒适应性图谱指导的免疫原等。本文将主要阐述这两种免疫原设计策略及其研究进展。 展开更多
关键词 艾滋病 免疫原设计策略 bNAb CTL
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宿主抗病毒因子BST-2抑制HBV释放的研究进展 被引量:1
16
作者 韩珠 于晓方 张文艳 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期215-221,共7页
BST-2(Bone marrow stromal antigen 2,BST-2)一种宿主内天然抗病毒因子,自2008年首次报道其具有抗人类免疫缺陷病毒(HIV-1)释放的功能,一直认为BST-2主要在细胞膜上限制病毒释放。最近发现BST-2对在细胞内部组装的乙型肝炎病毒(HBV),... BST-2(Bone marrow stromal antigen 2,BST-2)一种宿主内天然抗病毒因子,自2008年首次报道其具有抗人类免疫缺陷病毒(HIV-1)释放的功能,一直认为BST-2主要在细胞膜上限制病毒释放。最近发现BST-2对在细胞内部组装的乙型肝炎病毒(HBV),同样具有抑制作用,扩大了BST-2抗病毒作用的范围。并且BST-2在多囊泡体(MVB)中抑制HBV的释放与抑制HIV-1在细胞膜中释放的作用机制相似。同时发现HBV能够拮抗BST-2的限制作用,而HBV病毒中发挥作用的拮抗因子,目前有两个观点,一是HBV在肝细胞的特定条件下利用调节蛋白HBx拮抗BST-2的限制作用,另一观点认为包膜蛋白HBs对BST-2存在拮抗作用。本文重点概述和讨论了BST-2限制HBV病毒的最新研究进展。 展开更多
关键词 BST-2 HBV 研究进展
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人肠道病毒D68研究新进展 被引量:1
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作者 尹璐 于晓方 张伟 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期936-944,共9页
人肠道病毒-D68是小RNA病毒科、肠道病毒属D组成员,于1962年首次被分离鉴定,2005年以来在全球多个地区频繁暴发,引发严重的呼吸系统和中枢神经系统症状,危害公众健康。目前对EV-D68的研究主要集中在流行病学,其病毒学特征及发病机制仍... 人肠道病毒-D68是小RNA病毒科、肠道病毒属D组成员,于1962年首次被分离鉴定,2005年以来在全球多个地区频繁暴发,引发严重的呼吸系统和中枢神经系统症状,危害公众健康。目前对EV-D68的研究主要集中在流行病学,其病毒学特征及发病机制仍有待进一步探究。本文就近期EV-D68病毒流行的基因特征、感染机制、与宿主相互作用及其与新发神经系统疾病关系的研究进展做一综述,期望为EV-D68致病机制的研究及抗病毒治疗提供有效信息。 展开更多
关键词 人肠道病毒(EV-D68) 感染机制 免疫拮抗 急性迟缓性脊髓炎(AFM)
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人APOBEC3H hap Ⅱ在昆虫表达系统中的表达及其纯化
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作者 李婷 王虹 +4 位作者 张晓红 董燕 王涛 于晓方 韩雪 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第3期262-265,269,共5页
目的构建重组人APOBEC3H hapⅡ(A3H hapⅡ)杆状病毒表达载体,在昆虫细胞表达系统中表达,表达产物经Ni-NTA亲和层析柱纯化。方法采用PCR方法扩增A3H hapⅡ基因并加入His标签后,克隆至杆状病毒转移载体p Fast Bac1中,转化E.coli DH10Bac... 目的构建重组人APOBEC3H hapⅡ(A3H hapⅡ)杆状病毒表达载体,在昆虫细胞表达系统中表达,表达产物经Ni-NTA亲和层析柱纯化。方法采用PCR方法扩增A3H hapⅡ基因并加入His标签后,克隆至杆状病毒转移载体p Fast Bac1中,转化E.coli DH10Bac感受态细胞进行重组,构建质粒Bacmid-A3H hapⅡ-His。将质粒转染昆虫细胞sf9获得P1病毒,扩增后获得P3病毒,感染sf9细胞表达目的蛋白,并进行Western blot鉴定。经Ni-NAT树脂亲和层析柱对表达的蛋白进行纯化,并通过免疫共沉淀试验检测A3H hapⅡ-His与其相互作用蛋白HIV-1 Vif之间的特异性结合。结果成功构建了质粒Bacmid-A3H hapⅡ-His;P3病毒感染sf9细胞后成功表达出相对分子质量约20 000的目的蛋白,且能够与HIV-1 Vif特异性结合。结论成功建立A3H hapⅡ昆虫表达体系,为进一步研究A3H hapⅡ与HIV-1 Vif之间的相互作用机制,并针对其相互作用位点设计抗HIV药物奠定了基础。 展开更多
关键词 APOBEC3H hapⅡ Vif基因 昆虫表达系统 基因表达 纯化
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宿主抗病毒因子BST-2/tetherin的免疫学功能研究进展
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作者 韩珠 石莹 +2 位作者 张文艳 于晓方 吕铭宇 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期232-236,共5页
人体具有多种固有免疫机制,其中一类具有抗病毒作用的蛋白质叫作宿主限制因子,在病毒复制周期的各阶段抵抗病毒,而病毒通常具有相应的拮抗机制对抗宿主限制因子的抑制作用。目前发现的HIV-1宿主限制因子包括:在病毒逆转录过程中导... 人体具有多种固有免疫机制,其中一类具有抗病毒作用的蛋白质叫作宿主限制因子,在病毒复制周期的各阶段抵抗病毒,而病毒通常具有相应的拮抗机制对抗宿主限制因子的抑制作用。目前发现的HIV-1宿主限制因子包括:在病毒逆转录过程中导致致死突变的 APOBEC3( apolipoprotein B mRNA-editing catalytic polypeptide like 3)家族[1];抑制病毒核衣壳解聚的TRIM5α( the α-isoform of the tripartite motif-con-taining protein 5)[2];降解dNTPs抑制病毒逆转录的SAMHD1(SAM domain and HD domain-containing protein 1)[3];抑制病毒基因组入核的MX2( myxovirus resistance gene 2)[4];将新生病毒阻滞在细胞膜上的BST-2( bone marrow stromal cell anti-gen 2)/tetherin[5-6]。 展开更多
关键词 宿主限制因子 抗病毒因子 免疫学功能 PROTEIN 抗病毒作用 HIV-1 病毒核衣壳 病毒基因组
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人类肠道病毒68型3A蛋白可溶区的表达及其结构初步研究
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作者 李婷 孔佳 +1 位作者 于晓方 韩雪 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期653-659,共7页
为了解人类肠道病毒68型3A蛋白可溶区的结构,本研究构建了EV-D68 3A蛋白可溶区的原核表达载体,在大肠杆菌中表达、纯化并对其结构进行了初步研究。首先,采用PCR的方法扩增EV-D68 3A(1~61)基因片段,克隆至原核表达载体pET-28a-His-SUMO... 为了解人类肠道病毒68型3A蛋白可溶区的结构,本研究构建了EV-D68 3A蛋白可溶区的原核表达载体,在大肠杆菌中表达、纯化并对其结构进行了初步研究。首先,采用PCR的方法扩增EV-D68 3A(1~61)基因片段,克隆至原核表达载体pET-28a-His-SUMO中,转化进入BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达出His-SUMO-3A(1~61)融合蛋白。经Ni-NTA树脂亲和层析初步纯化后得到大量融合蛋白,利用ULP酶酶切去除His-SUMO标签,通过Ni-NTA树脂亲和层析、阴离子交换层析柱、分子筛层析等方法分离标签并进一步纯化目的蛋白。最后通过化学交联反应检测目的蛋白的多聚化状态。结果显示,利用pET28a-His-SUMO-3A(1~61)原核表达载体能够在大肠杆菌中成功表达出大量可溶性的融合蛋白;经过多步纯化方法得到了大量高纯度的目的蛋白,平均每升大肠杆菌可得到约5mg目的蛋白,纯度达95%以上;通过化学交联反应证明了该蛋白的多聚化存在形式。本研究成功建立了EV-D68 3A蛋白可溶区的表达和纯化系统,为进一步获得3A蛋白晶体、研究3A蛋白功能以及设计以3A为靶点的抗病毒药物奠定了基础。 展开更多
关键词 肠道病毒68型 非结构蛋白 3A蛋白 蛋白表达与纯化 交联反应
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