大鼠胰腺导管上皮细胞体外诱导的研究

目的:观察大鼠胰腺导管上皮经四步法诱导分化为胰岛样细胞团后移植治疗糖尿病的效果。方法:采用Ⅴ型胶原酶胆管内灌注消化法,经Ficoll不连续密度梯度离心后分别获得导管上皮细胞和新鲜胰岛。导管上皮细胞经原代培养及传代后取2～6代细胞开始进行四步18天的诱导,分化为胰岛样细胞团,行免疫荧光鉴定。将链脲佐菌素造模成功的18只SD大鼠采用完全随机法均分成3组,空白对照组、新鲜胰岛组、胰岛样细胞团组进行左肾包膜下移植。分别给予RMPI1640、新鲜胰岛和胰岛样细胞团,移植后隔日固定时间监测血糖。结果:经免疫荧光鉴定,分离纯化的胰腺导管细胞具有干细胞特性,诱导后的胰岛样细胞团胰岛素、胰高血糖素染色均为阳性。移植后空白对照组血糖维持在高血糖范围。新鲜胰岛组移植后血糖逐步下降至正常水平,并在2周之内基本稳定在正常范围内但略有上升。胰岛样细胞团组移植后前2天血糖不降反升,之后有所下降但始终未能降至正常范围,然后又逐渐上升。结论:胰腺导管上皮细胞经该方案诱导后分化为胰岛样细胞团,使糖尿病大鼠血糖有一定程度的下降,但下降幅度及维持时间不能令人满意,可能与移植量不够及诱导的胰岛样细胞团功能不良有关。

1型糖尿病与HLA-DRB1、DQB1基因相关性研究

目的:研究中国江苏地区汉族人群1型糖尿病(T1DM)与人类白细胞抗原(HLA)-DRB1、DQB1基因及单倍型频率的相关性。方法:选取江苏地区汉族人群T1DM患者(112例)与对照组(69例),运用聚合酶链反应-寡核苷酸探针序列特异性引物(PCR-SSO)技术,进行HLA-DRB1、DQB1基因分型,两组间等位基因频率比较采用χ2检验,通过Arlequin软件进行单倍型频率的分析。结果:112名T1DM患者中检测到DRB1位点等位基因17个(对照组19个),DQB1位点等位基因7个(对照组7个)。与对照组相比,T1DM组DRB1*0901、DRB1*0405和DRB1*0301频率明显增高,DQB1位点的DQB1*0201与DQB1*0303频率明显高于对照组;与对照组相比,T1DM患者明显升高的单倍型频率为:DRB1*0901-DQB1*0303、DRB1*0301-DQB1*0201、DRB1*0405-DQB1*0401和DRB1*0405-DQB1*0302。结论:中国江苏地区汉族T1DM患者HLA基因DR位点的DRB1*0901、DRB1*0405、DRB1*0301及DQ位点的DQB1*0201、DQB1*0303对T1DM易感。发现了4个新的具有易感作用的单倍型:DRB1*0901-DQB1*0303、DRB1*0301-DQB1*0201、DRB1*0405-DQB1*0401和DRB1*0405-DQB1*0302。

胰岛新生相关蛋白改善胰岛功能的研究

目的:观察胰岛新生相关蛋白(islet neogenesis-associated protein,INGAP)与胰岛体外共培养对其凋亡、基因表达以及胰岛素释放功能的影响。方法:分离提取8周龄雄性Wistar大鼠胰岛,培养于添加(共培养组)或未添加(对照组)INGAP(10μg/ml)的RPMI1640完全培养液中。24h后收集INGAP共培养组和对照组胰岛,进行吖啶橙-碘化丙啶染色(AO-PI)、葡萄糖刺激的胰岛素释放试验及RT-PCR检测凋亡相关B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)基因和蛋白激酶B(Akt)基因mRNA的表达水平。结果:①INGAP共培养组的胰岛在高糖刺激下的胰岛素释放量高于对照组[(185.00±20.01)μU/mlvs.(58.67±17.03)μU/ml],并且刺激指数亦明显增高(5.10±2.35vs.1.92±0.42)。②INGAP共培养组与对照组相比,胰岛Bcl-2基因(0.607±0.217vs.0.503±0.209)和Akt基因(1.115±0.189vs.0.935±0.162)的mRNA表达水平较明显增加。③共培养组的胰岛细胞存活率明显高于对照组(2685.45±5.08vs.2108.65±4.02)。结论:INGAP与胰岛体外共培养可以减少胰岛的凋亡,维持胰岛的功能。

火针治疗瘰疬27例

火针治疗瘰疬２７例梁秀瑛，于晓竹（黑龙江省海伦市人民医院，１５２３００）瘰疬，俗称“鼠疮”。临床比较常见。笔者近年来采用火针治疗本病２７例，经临床观察效果满意，现报告如卜。１临床资料２７例患者中，男１２例，女１５例；年龄１６～２０岁者８例，２１～２５...

胰岛新生相关蛋白对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠的治疗作用

目的观察腹腔注射胰岛新生相关蛋白(INGAP)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)小鼠的治疗作用。方法 C57BL/6小鼠腹腔注射STZ建立DM模型,将成模后小鼠随机分为INGAP组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组。INGAP组每日给予腹腔注射INGAP500μg;对照组注射等体积PBS。两组均隔日监测血糖至第34天,用实时荧光定量-PCR检测小鼠胰腺中葡萄糖转运蛋白-2(Glut-2)和胰腺十二指肠同源盒1(PDX-1)mRNA的表达。结果 INGAP组血糖未见明显下降;但与对照组比较,INGAP可以使DM小鼠胰腺中PDX-1、Glut-2mRNA的表达增加(P<0.05)。结论腹腔注射INGAP不能使STZ诱导的DM小鼠血糖下降,但能够使胰腺中的PDX-1、Glut-2表达量提高。

治疗肩周炎的点滴体会

肩关节周围炎是老年人常见病、多发病。中医称之为漏肩风、肩痹、冻结肩,好发于45—60岁之间,发病缓慢,急性发作较少见。