缺氧对肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶基因表达的影响

应用分子杂交技术和放射免疫检测方法研究了缺氧对猪肺动脉内皮细胞的环氧合酶（ＣＯＸ）和血栓素合成酶（ＴＸＳ）基因表达及其条件培养基中６ｋｅｔｏＰＧＦ１α和ＴＸＢ２含量的动态变化。发现：６，１２，２４和４８ｈ缺氧组分别与常氧组比，ＣＯＸ１和ＣＯＸ２基因表达增加，并且ＣＯＸ２ｍＲＮＡ在缺氧６和１２ｈ就明显表达增加。在前述的不同缺氧时间组内皮细胞条件培养基中６ｋｅｔｏＰＧＦ１α含量也均显著高于相应常氧对照组（Ｐ＜０．０５）；但ＴＸＳ的ｍＲＮＡ水平及ＴＸＢ２含量在缺氧４８ｈ才有明显增加（Ｐ＜０．０５）。结果表明：（１）缺氧可诱导肺动脉内皮ＣＯＸ基因表达和ＰＧＩ２生成增加，在早期以ＣＯＸ２基因表达增加更为明显，提示可能在肺血管缺氧反应中起调节作用。（２）４８ｈ的缺氧可使内皮细胞ＴＸＳ基因表达及ＴＸＡ２生成增加，它可能在慢性缺氧肺血管反应中起介导作用。

香烟烟雾抽提物对肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶mRNA水平及PGI_2，TXA_2生成的影响

本实验应用放免测定及分子杂交技术观察了香烟烟雾抽提物（ＣＳＥ）对培养的猪肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶基因表达和ＰＧＩ＿２，ＴＸＡ＿２生成的影响，进一步从分子水平探讨由内皮细胞产生的前列腺素在ＣＳＥ影响肺血管张力和ＨＰＶ中的作用。结果发现：在常氧或缺氧下，ＣＳＥ可促使内皮细胞环氧合酶—１ｍＲＮＡ水平升高于对照组的１．５倍，而环氧合酶—２ｍＲＮＡ则分别比对照组高２倍和１倍。同时在常氧或缺氧时，ＣＳＥ使内皮细胞条件培养基中６—ｋｅｔｏ—ｐＧＦｌａ．明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。然而，不论常氧或缺氧时，ＣＳＥ不影响血栓素合成酶基因表达和ＴＸＡ２的生成。提示在常氧和缺氧时，ＣＳＥ所致的环氧合酶ｍＲＮＡ水平升高及ＰＧＩ２增加介导了猪吸烟时肺血管张力和ＨＰＶ的降低。

缺氧对冠状动脉内皮及平滑肌细胞环氧合酶和血栓素A_2合成酶基因表达的影响

用放免及斑点杂交法研究缺氧对培养的冠状动脉内皮细胞（CAEC）和平滑肌细胞（CASMC）的环氧合酶（COX）和血栓素A2合成酶（TxS）基因表达的影响。实验表明在缺氧时，CAEC和CASMC中COX-1表达增加，总光密度比常氧对照组分别高3倍和1．8倍；COX-2及TXS表达无明显变化。CAEC及CASMC条件培养液中6-ketc-PGF1a含量明显升高，而TxB2与对照组无明显差异。结果提示，缺氧致冠状动脉舒张反应中可能有内皮和平滑肌细胞COX-1基因表达及PGI2生成增多的作用。

缺氧诱导因子-1

氧是在细胞内呼吸氧化还原反应中电子的最终接受体。缺氧可以引起急性或长期的生理或病理生理反应，在这些过程中缺氧诱导了许多基因的转录。缺氧诱导因子－１（ＨＩＦ－１）是可与红细胞生成素基因（ＥＰＯ）３增强子特异结合的由缺氧诱导的ＤＮＡ结合蛋白，可激活Ｈｅｐ３Ｂ细胞ＥＰＯ基因转录。并且由于它可在很多细胞被缺氧诱导，包括生成ＥＰＯ和不生成ＥＰＯ细胞，以及许多缺氧诱导的基因都具有ＨＩＦ－１结合位点等特点。因此认为，ＨＩＦ－１是缺氧诱导基因转录的关键环节，并且是缺氧诱导基因转录过程中缺氧信息传递的共同通路。

缺氧时猪肺动脉平滑肌细胞中环氧合酶和血栓素合酶基因表达变化研究

应用培养的猪肺动脉平滑肌细胞经分子杂交和放射免疫检测发现:缺氧可使环氧合酶（COX）基因表达增加，缺氧6、24、48h，环氧合酶-2（COX-2）和环氧合酶-1（COX-1）mRNA水平分别是常氧组的3、1、1倍和1、2、2.7倍。并在不同时间缺氧（6、24、48h），平滑肌细胞条件培养基中6-酮-前列腺素Flα含量也显著高于相应对照组（P＜0.05），但缺氧对血栓素合酶（TXS）基因表达及血栓素入生成无明显影响。结果表明:缺氧可使平滑肌细胞COX基因表达及前列环素（PGI2）自分泌增加，它可能在平滑肌细胞缺氧收缩及增生反应中起调节作用。并且从缺氧时COX和PGI2生成的动态变化说明，缺氧时PGI2生成的迅速增多主要与COX-2mRNA表达增加有关。

肺动脉与冠状动脉内皮环氧合酶及TXA_2合酶基因表达的差异

目的与方法：应用分子杂交和放免法观察了缺氧下培养的猪肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和冠状动脉内皮细胞（ＣＡＥＣ）的环氧合酶－１（ＣＯＸ－１），环氧合酶－２（ＣＯＸ－２）和血栓素Ａ２合酶（ＴＸＳ）基因表达及前列腺素生成的变化。结果：（１）常氧下培养２４ｈＰＡＥＣ的ＣＯＸ－２ｍＲＮＡ含量为ＣＡＥＣ的１５倍；ＰＡＥＣ的ＰＧＩ２生成量明显高于ＣＡＥＣ。（２）缺氧培养２４ｈＰＡＥＣ和ＣＡＥＣ中ＣＯＸ－１ｍＲＮＡ均增加，分别是其常氧对照组的２５倍和３倍，而ＣＯＸ－２ｍＲＮＡ含量仅在ＰＡＥＣ中明显增多，达其对照组的１６倍。（３）缺氧对ＣＡＥＣ的ＰＧＩ２生成量增加的幅度大于ＰＡＥＣ的增量。（４）ＰＡＥＣ和ＣＡＥＣ在常氧下和缺氧时ＴＸＳ基因表达ＴＸＡ２产量均无明显差异。

红细胞生成素3'-增强子片段对内皮细胞缺氧时环加氧酶-2基因表达的影响

目的和方法：体外合成红细胞生成素（Ｅｐｏ）３′－增强子野生型及突变型片段，借助脂质体，转入内皮细胞，用半定量ＲＴ－ＰＣＲ方法测定分离细胞在常氧或缺氧条件下培养４ｈ的环加氧酶２（ＣＯＸ－２）ｍＲＮＡ。结果：（１）大鼠主动脉内皮细胞、肺微血管内皮细胞在常氧下培养，有ＣＯＸ－２基因表达；（２）缺氧能诱导这两种细胞ＣＯＸ－２基因表达增加；（３）野生型Ｅｐｏ３′－增强子片段能阻断缺氧对内皮细胞ＣＯＸ－２基因表达的诱导作用，而突变片段则无此作用。结论：在ＣＯＸ－２基因序列中，可能存在Ｅｐｏ３′－端增强子片段。

缺氧诱导因子-1和红细胞生成素3′-增强子调节内皮细胞环氧合酶和血栓素合酶基因转录

目的和方法 :将红细胞生成素 (EPO) 3′ 增强子野生片断及点突变片断借脂质体转入人脐静脉内皮细胞株ECV 30 4,用半定量RT PCR测定正常与缺氧诱导因子 1 (HIF 1 )诱导剂氯化钴 (CoCl2 )作用下培养 6h的细胞环氧合酶 2 (COX 2 )和血栓素合酶 (TXS)的mRNA。结果 :HIF 1诱导剂CoCl2 可诱导ECV 30 4的COX 2和TXS基因转录明显增强 ;向细胞导入野生EPO3′增强子片断可阻断CoCl2 诱导的COX 2和TXS基因转录增强 ,而点突变片断无此作用。结论 :在COX 2和TXS基因序列中 ,可能存在EPO3′ 增强子类似片断中的HIF 1的结合序列 ,HIF 1诱导COX 2和TXS基因表达增强可能主要通过HIF 1与该序列结合实现的。

Epo 3'-端增强子对内皮细胞缺氧时血管内皮生长因子基因转录的影响

体外合成红细胞生成素(Epo)3'-端增强子野生型及突变型片段,借助脂质体转入培养的大鼠肺微血管内皮细胞,用半定量RT-PCR方法测定内皮生长因子(VEGF)mRNA。结果发现:①内皮细胞在常氧下培养有VEGF基因转录,mRNA量吸光度(A)值为2.32±0.36;②缺氧4h时VEGF基因转录增加,mRNA量(A)值为4.71±0.52,与常氧组比较P<O.05;③野生型Epo 3'-端增强子片段能阻断缺氧对VEGF基因转录的诱导作用,mRNA量(A)值为2.29±0.41,与缺氧组比较P<0.05;而突变片段则无此作用,VEGF mRNA量(A)值为4.57±0.57,与缺氧组比较P>O.05。结果提示:在VEGF基因序列中可能存在Epo 3'-端增强子片段,它参与了内皮细胞的缺氧反应。

重组sICAM-1对PMA刺激的白细胞与肺微血管内皮细胞粘附的影响

目的 :探讨重组sICAM - 1对大鼠白细胞与肺微血管内皮细胞粘附的影响。方法 :采用原代培养的大鼠肺微血管内皮细胞及99Tm -HMPAO标记的白细胞 ,观察不同浓度的sICAM - 1、CA7(sICAM - 1的单抗 )以及sICAM - 1·CA7(sICAM - 1的二聚体 )对PMA刺激的大鼠白细胞与肺微血管内皮细胞粘附的影响。结果 :sICAM - 1与CA7即使在 10 0mg/L也不能抑制白细胞与肺微血管内皮细胞的粘附 ,而其二聚体在 2 0mg/L和 40mg/L即可抑制42 %和 5 0 %的细胞粘附 (P <0 0 5 )。结论 :sICAM - 1对细胞粘附的抑制作用很弱 ,可能与其单体形式有关。

L－精氨酸对急慢性缺氧大鼠肺循环和脑血流的影响

研究了Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）对急慢性缺氧大鼠肺循环和脑血流的影响。一次注射Ｌ－Ａｒｇ４００ｍｇ·ｋｇ￣（－１）对急性缺氧性肺血管收缩反应（ＨＰＶ）无影响，而８００ｍｇ·ｋｇ￣（－１）有明显抑制作用；两种剂量的Ｌ－Ａｒｇ对缺氧性脑血流的变化均无显著影响。Ｌ－Ａｒｇ（３００ｍｇ·ｋｇ￣（－１）·ｄ￣（－１））能缓解慢性缺氧性肺动脉高压、肺血管阻力增高和右心肥厚，并抑制ＨＰＶ，但对脑血流无显著影响。ＮＯ合成酶抑制剂Ｌ－精氨酸甲酯可拮抗Ｌ－Ａｒｇ的作用，提示Ｌ－Ａｒｇ的作用可能与增加ＮＯ合成有关。

红细胞生成素3'-增强子调节缺氧时内皮细胞血栓素合酶基因表达

目的：研究缺氧对人脐静脉内皮细胞珠ＥＣ－３０４ＴＸＳ基因的影响及ＥＰＯ３′增强子在其中的作用。方法：将红细胞生成素（ＥＰＯ）３′－增强子野生片断及点突变片断，借脂质体转入人脐静脉内皮细胞株ＥＣ－３０４，用半定量ＲＴ－ＰＣＲ测定常氧与缺氧条件下培养６小时的细胞血栓素合酶（ＴＸＳ）ｍＲＮＡ。结果：ＥＣ－３０４常氧培养有ＴＸＳ基因表达缺氧６小时ＴＸＳ基因表达明显增强；而细胞导入野生ＥＰＯ３′－增强子片断可阻断缺氧诱导ＴＸＳ基因表达增强，而点突变片断无此作用。结论：在ＴＸＳ基因序列中，可能存在类似ＥＰＯ３′－增强子片断，缺氧诱导ＴＸＳ基因表达增强可能主要通过缺氧诱导因子－１与ＴＸＳ基因序列中类似ＥＰＯ３′－增强子片断结合。

水轮机调速系统新技术的发展及其应用

调速器的主要作用是保持机组转速在恒定或一定的允许范围内。随着调速器的发展,其功能也在不断的完善,漫湾电厂的水轮机调速器也在不断的更新换代,本文主要讨论水轮机调速器的原理、发展与特性,以及漫湾电厂一期调速器原理、功能、特点等。