糖尿病肾病血液透析患者SPBS评分的影响因素分析

目的:探究糖尿病肾病(DN)血液透析患者自我感受负担量表(SPBS)评分的影响因素。方法:选取2019年7月至2021年6月我院86例DN血液透析患者为研究对象,采用SPBS评估其自我感受负担,采用多因素条件性logistic回归分析DN血液透析患者SPBS评分的影响因素。结果:86例DN血液透析患者SPBS总分为(36.27±4.83)分,总体处于中度水平。84.88%的患者存在不同程度的自我感受负担。医疗费用支出、透析时间、正念减压干预、疼痛恐惧水平、自我管控能力是DN血液透析患者SPBS评分的影响因素(P<0.05)。结论:医疗费用支出高、透析时间长、未应用正念减压干预、疼痛恐惧水平高、自我管控能力差的DN血液透析患者SPBS评分相对高,针对上述因素予以干预,对减轻患者自我感受负担、促进病情恢复具有一定作用。

雄激素受体在大鼠睾丸中转录模式的分析

目的:研究Ar(雄激素受体)基因在大鼠睾丸组织中的转录模式。方法:取刚出生的雄性Wistar大鼠,于出生2~65日的不同时间点,脊椎脱臼处死3只不同窝别的幼鼠,提取睾丸组织总mRNA;将mRNA反转录成cDNA,随后采用Real-time PCR方法检测大鼠睾丸组织中ArmRNA的转录情况。结果:ArmRNA表达在出生后第2天开始缓慢上升到第16天达到最高值,第16天到第30天迅速下降,第31天出现一个小高峰后到第65天持续缓慢下降。结论:Ar基因在大鼠早期发育睾丸组织中表达量逐渐升高,可能与精原干细胞的增殖及初级精母细胞的发生相关。

检测生精过程中减数分裂完成的质粒载体的构建

旨在构建在所有转染细胞中表达绿色荧光、在核分裂的次级精母细胞、圆形精子细胞及长形精子细胞中表达红色荧光蛋白的cmv-eGFP-Gsg2-DsRed载体。重组载体是以本实验室保存CMV-EGFP-pDsRed质粒载体为基础载体,在其多克隆位点插入Gsg2启动子,期待可以启动红色荧光蛋白基因的表达。经大鼠睾丸共培养细胞转染试验证实,成功构建了含有Gsg2启动子的表达双荧光蛋白质粒载体。

双酚A对成年雄性小鼠的生殖毒性及其作用机制

目的:探讨双酚A(BPA)对成年小鼠睾丸组织的损伤作用,阐明BPA对动物机体的生殖毒性及其作用机制。方法:8周龄昆明小鼠40只随机分为对照组(玉米油)和低(100 mg·kg^(-1) BPA)、中(200mg·kg^(-1)BPA)、高(400mg·kg^(-1)BPA)剂量BPA组。灌胃染毒4周后,取小鼠睾丸组织,采用流式细胞术检测小鼠睾丸组织中细胞凋亡率;免疫组织化学法检测Fas和FADD蛋白表达情况。结果:与对照组比较,低剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、Fas和FADD阳性细胞表达率无明显变化(P>0.05);中和高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、Fas和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05)。与低剂量BPA组比较,中和高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、FAS和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05);与中剂量BPA组比较,高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、FAS和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05)。中剂量BPA组细胞凋亡率与FAS、FADD阳性细胞表达率呈正相关关系(r=0.430,P<0.05;r=0.238,P<0.01),高剂量组细胞凋亡率与Fas、FADD阳性细胞表达率呈正相关关系(r=0.637,P<0.01;r=0.359,P<0.01)。结论:一定剂量BPA会导致小鼠睾丸组织中细胞凋亡率升高,凋亡调控基因Fas和FADD表达上调;BPA对小鼠睾丸组织有损伤作用,其生殖毒性与激活Fas死亡受体信号通路从而导致细胞过度凋亡有关。

绵羊卵丘-卵母细胞复合体石蜡切片技术的改良

【目的】在绵羊有腔卵泡发育过程中,多层卵丘细胞紧密包绕着卵母细胞形成卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complex,COCs)特殊结构,存在于卵泡腔内。卵泡成熟后,绵羊COC从卵泡内排出,进入输卵管,等待受精。现有的卵丘-卵母细胞复合体蛋白鉴定技术,或者将包含各级卵泡的卵巢组织直接进行切片处理,或者将COCs从卵泡内分离,在完整卵丘-卵母细胞复合体水平上进行免疫染色。但这两种方法在检测绵羊有腔卵泡COCs中目的蛋白表达时,存在显著缺陷。研究旨在对常规石蜡组织切片技术进行改进,以期满足绵羊COCs蛋白鉴定需求。【方法】首先采用抽吸法从绵羊有腔卵泡内获得COCs,以石蜡包埋方式人为构建了一种可以进行切片处理的"包含多枚绵羊卵丘-卵母细胞复合体的仿组织结构"。然后以该特殊结构与健康绵羊卵巢组织为研究对象,分别采用改良与传统的石蜡组织免疫化学技术流程,检测了目的蛋白,尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)与其受体(urokinase-type plasminogen activator recepter,uPAR),在绵羊COCs中的表达情况,比较了两种技术的免疫染色效果与染色流程差异。【结果】将所构建的绵羊COCs仿组织结构与正常绵羊卵泡组织,进行石蜡组织切片处理,经切片、贴片与脱蜡等步骤,分别形成了散在分布于载玻片上的COCs薄片与包含卵泡的卵巢组织薄层(厚度5μm)。经间接免疫染色处理后,结果显示:①目的蛋白在两种结构COCs中的表达是一致的,即uPAR在绵羊卵丘与卵母细胞上都有表达,而uPA只存在于绵羊卵丘细胞中;②在绵羊COCs薄片结构中,COCs整体形态完好,卵母细胞与外围卵丘细胞层次清晰,蛋白定位清楚,染色效果良好;在卵巢薄层结构中,绵羊卵泡内壁颗粒细胞与COCs等形态结构相对完整,卵母细胞蛋白定位清楚,但是卵丘细胞层次与蛋白表达较不清晰;③与绵羊卵巢组织石蜡切片技术相比较,绵羊COCs仿组织结构石蜡切片技术,在固定、脱水、透明、浸蜡以及脱蜡等步骤的处理时间都大大缩短,例如固定处理由24h缩短为2h;由逐级脱水的10h缩短为两级脱水的1h;透明由30min缩短为10min;软蜡与硬腊浸入由原来的6h缩短为1h;由逐级脱蜡的25min缩短为两级脱蜡的10min等。【结论】改进后的COCs仿组织石蜡切片染色技术,显示更优质的免疫定位与染色效果,不仅具有COCs获得率高、卵母与卵丘细胞形态层次清晰等优点,而且显著缩短了操作时间,简化了操作流程。该技术在保留COCs结构完整的基础上,有效检测了目的蛋白在绵羊卵丘-卵母细胞复合体中的表达模式,对于探明绵羊卵泡发育与卵母细胞成熟机制,具有重要意义。

促卵泡刺激素对小鼠卵巢玻璃化冻存的抗凋亡作用

目的:观察小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)在小鼠卵巢组织玻璃化冻存过程中的抗凋亡作用。方法:将4周龄C57BL/6J雌性小鼠卵巢组织,分为新鲜对照组(CG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0. 3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),玻璃化冻存条件为小鼠卵巢入培养液在37℃二氧化碳培养箱培养60 min,接着入1.5 mol/L乙二醇中预渗透平衡8 min,再移入EG5.5-30玻璃化液渗透平衡3.5 min,之后投入-196℃的液氮罐中保存1 d,全过程在22～24℃下进行。每组20枚卵巢,10枚进行HE染色后的正常卵泡百分比计数,10枚进行免疫组织化学法观察。结果:与对照组(CG)比较,玻璃化冻存对照组(VCG)正常卵泡百分比显著降低,active caspase-3的表达量显著升高(P<0.05);与玻璃化冻存对照组(VCG)比较,0.3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH)组的正常卵泡百分比明显升高,active caspase-3的表达量显著降低(P<0.05)。结论:小鼠卵巢玻璃化冻存全程添加FSH干预可有效抵抗凋亡执行蛋白active caspase-3的表达,有利于卵巢组织形态结构的保护。

6天龄与10天龄大鼠的睾丸组织的基因差异表达

通过基因芯片技术,利用Roche-NimbleGen公司制作的大鼠12×135K全基因组表达谱芯片,对日龄为6d和10d的大鼠睾丸组织进行全基因组表达差异分析。结果显示:具有2倍以上的差异表达基因有4298个,其中表达上调的基因共1878个,表达下调的基因共2420个。这些差异表达的基因中有3154个基因具有基因本体注释,参与了154个生物学通路。进一步分析表明具有8倍以上差异表达的基因有13个,这些基因参与了生物学过程、细胞组分和分子功能等基因本体分类,进一步选择3个差异表达的基因,LOC686076、Cxcl6和Trib3,做了实时定量RT-PCR检测。其结果趋势与芯片数据一致。因此,我们初步认为精原干细胞的发生与增殖在大鼠早期的发育过程中已经有大量的基因参与,是一个多基因协调表达的过程。

生理学课堂参与式教学的实践

采用先进的教学理念,在生理学课堂教学中运用参与式教学法,进行积极的教学改革尝试,旨在充分激发学生学习生理学的热情和兴趣,增强学生学习的主观能动性,提高生理学教学效果。

浅谈礼仪文化对播音主持的影响

礼仪在现代人际交往中发挥着重要的作用，从传播的角度来看，礼仪是人际交往中进行沟通的技巧。对于一名从事播音主持事业的人来讲，礼仪是是他们自身修养和气质的一种表现形式。在当今社会中不少播音主持往往偏重对自身播音主持技巧的培养，而忽视礼仪文化的修养，本文主要就礼仪文化对播音主持多方面的影响进行了分析，目的在于引起从事播音主持事业的人对礼仪文化素养的重视。

Agtr2基因在大鼠睾丸发育中转录表达的分析

目的研究分析血管紧张素Ⅱ2型受体(Agtr2)基因在大鼠睾丸发育中的转录模式。方法取刚出生的雄性Wistar大鼠,于出生2~65日的不同时间点,脊椎脱臼处死3只不同窝别的幼鼠,提取睾丸组织总mRNA;将mRNA反转录成cDNA,随后采用RT-PCR方法检测大鼠睾丸组织中Agtr2 mRNA的转录情况。结果Agtr2 mRNA表达在出生后表达量持续下降,与出生后第6日相比,出生后第8日Agtr2 mRNA表达量急剧降低,在第30日后检测不到其表达。结论Agtr2基因在大鼠睾丸组织早期发育的表达量最高,随后急剧降低,可能与精原干细胞的增殖与分化及初级精母细胞的发生相关。

混合式教学在生理学实验中的应用

生理学是一门来自实验的科学,生理学实验是生理学教学的重要组成部分。为了不断提高生理学实验的教学水平,提高实验成功率,同时培养学生的动手操作能力与科研思维,尝试了将混合式教学应用于生理学实验中。根据实际要求,充分发挥网络教学与面授课的优势,采用线上教学与线下教学有机结合的授课方式,重新对动脉血压影响因素一课进行了设计,制作了理论与实验操作部分的微课视频,让学生在面授课前进行线上学习并分组讨论,面授课对教学视频中的关键问题进行有针对性的讲解,引导学生在实验操作前做好充分的准备工作。课后对不同专业、不同班级的学生进行了评估,结果显示与对照班相比,教改班的学生参与度与实验成功率均有显著改善。

SCADA系统在天然气场站冰堵预防处置中的应用

昆仑燃气石化新城分输站-石油二厂天然气支线投产初期,冬季共发生三次冰堵事件,在一定程度上影响了天然气的正常输送。通过有效利用SCADA系统实时监测,分析重点部位参数数据及趋势,及时预判并处理冰堵,为天然气场站冬季安全运行提供有效保障。

两种精原干细胞高效能纯化方法的比较研究

目的:比较贴壁分离法和免疫磁珠法纯化小鼠精原干细胞(mSSCs)的优缺点。方法:分别选取10只12-15日龄的雄性C57BL/6小鼠,颈椎脱臼法处死,摘取睾丸用酶消化法获得曲细精管单细胞悬液,分别用贴壁分离法和免疫磁珠法从单细胞悬液中分离纯化mSSCs,并针对两种方法在细胞数量、分离效率以及对细胞增殖生长的影响等方面进行比较。结果:两种纯化方法均可从小鼠曲细精管单细胞悬液中分离纯化得到干细胞,并可在体外培养后呈现出典型的精原干细胞特有的葡萄串状克隆,体外连续培养增殖超3个月。10只小鼠的睾丸经差异贴壁法纯化后可以得到3×10^(5)±0.4×10^(5)个mSSCs(n=5),细胞回收率(纯化后细胞数/曲细精管单细胞悬液细胞数)为1.5%±0.1%(n=5);经免疫磁珠法可以得到6×10^(5)±0.4×10^(5)个mSSCs(n=5),细胞回收率为3.0%±0.1%(n=5),免疫磁珠法得到的干细胞数量更高。差异贴壁法得到的干细胞更纯,因为体外培养5 d左右即得到干细胞集落,而免疫磁珠法得到的干细胞则约10 d才可以看到明显的细胞集落,但是两种纯化方法对细胞体外长期增殖生长没有明显的影响。结论:两种方法均可以纯化得到高质量的mSSCs,,但两种方法各有优缺点。差异贴壁法较免疫磁珠法经济、实用,无需购买专门的设备和抗体磁珠,但获得的细胞数量相对较低,用时也较长。

DHEA诱导小鼠PCOS模型过程中性激素的变化规律

【目的】鉴于在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)发病机理和治疗方式上的诸多争议,以及使用人类PCOS材料进行研究的局限性,本研究通过构建PCOS小鼠模型以探究在模型构建过程中性激素水平的变化规律。【方法】皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)诱导昆明白雌鼠产生PCOS样临床症状,通过结晶紫染色查看小鼠性周期是否发生停滞;利用HE染色的方式确定卵巢发育状况;利用ELISA技术调查建模过程中血清睾酮和雌二醇浓度的变化规律。【结果】使用结晶紫对小鼠阴道上皮细胞染色可准确区分小鼠各个性周期阶段;使用6 mg/100 g DHEA持续诱导20 d后,昆明白小鼠性周期循环发生了一定的停滞,且在建模过程中体重变化与芝麻油溶剂的加入呈显著相关(P<0.05),与DHEA处理无关;DHEA连续处理后可见卵巢中巨大囊状卵泡出现,血清睾酮水平出现显著升高(P<0.05);自PCOS模型构建的第5天起,血清睾酮水平显著上升(P<0.05),且维持到建模结束;而血清雌二醇水平出现了阶段性变化,在第10、15天均显著高于对照组(P<0.05),第20天时低于对照组。【结论】改进DHEA溶解方式可成功构建昆明白小鼠PCOS模型,在建模过程中血清睾酮持续处于较高水平,而雌二醇水平呈现先增高后降低的趋势,后者在建模中期瞬时升高的病理意义需进一步研究。

输气场站天然气泄漏检测及分析

输气场站天然气泄漏会对环境造成严重影响,一旦管理不当还会造成更加事故发生。针对管输系统的天然气泄漏来看主要包括漏、外漏以及事故性泄漏三种形式,为能够准确对天然气进行检测,本文主要应用680HVM型碳氢化合物分析仪,对输气场站设备进行针对性检测分析,并获得准确数据。通过对数据获取和分析为安全管理提供可靠依据。

双氢睾酮对小鼠卵泡颗粒细胞增殖与抗苗勒管激素表达的影响

【目的】探讨双氢睾酮(DHT)对小鼠颗粒细胞增殖与抗苗勒管激素(AMH)表达的影响。【方法】给3周龄的昆明小鼠注射孕马血清促性腺激素(PMSG,10 IU/只)以获取颗粒细胞,颗粒细胞传代后48 h HE染色鉴定形态,绘制颗粒细胞的生长曲线,免疫荧光法鉴定促卵泡素受体(FSHR)的表达。当第2代颗粒细胞汇合度达到50%时,先用无血清的DMEM/F12培养基饥饿处理12 h,然后在培养基中添加不同浓度的DHT(0、10^(-9)、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)、10^(-5)mol/L),培养48 h后检测颗粒细胞增殖情况,实时荧光定量PCR法及ELISA法分别测定AMH基因及蛋白的表达。在颗粒细胞培养液中分别添加10^(-6)mol/L Flutamide(雄激素受体(AR)特异性抑制剂)、10^(-7)mol/L DHT、10^(-7)mol/L DHT+10^(-6)mol/L Flutamide、10^(-5)mol/L DHT、10^(-5)mol/L DHT+10^(-8)mol/L 11-ketodihydrotestosterone(AR特异性激动剂),分别记为F、D7、DF、D5、DK组,以不添加药物为对照组。培养48 h后,检测各组颗粒细胞增殖及AMH蛋白含量。【结果】体外培养的小鼠颗粒细胞呈梭形或铺路石状,生长曲线呈S形,细胞普遍表达FSHR;与0 mol/L DHT组相比,10^(-8)、10^(-7)mol/L DHT组细胞增殖分别显著和极显著增加(P<0.05;P<0.01),10^(-5)mol/L DHT组细胞增殖显著降低(P<0.05);10^(-7)mol/L DHT组AMH基因的相对表达量和AMH蛋白含量均极显著增加(P<0.01)。与D7组相比,DF组颗粒细胞增殖和AMH蛋白含量均极显著降低(P<0.01);与D5组相比,DK组颗粒细胞增殖和AMH蛋白含量均极显著升高(P<0.01)。【结论】10^(-7)mol/L DHT能够显著促进颗粒细胞增殖和AMH表达,而10^(-5)mol/L显著降低了颗粒细胞增殖以及AMH表达,且AR介导了DHT调控颗粒细胞增殖和AMH表达。

PCOS患者卵泡液内IGF-Ⅰ的水平对卵母细胞成熟的影响

目的探讨PCOS患者卵泡液内IGF-I的水平对卵母细胞成熟的影响。方法选取内蒙古自治区人民医院自2017年5月~2018年4月收治的40例因PCOS行体外受精-胚胎移植(IVE-ET)治疗的患者作为研究组,选择同期输卵管因素不孕治疗的42例患者为对照组,行黄体中期长方案治疗;对比两组患者卵泡液内IGF-I水平变化与卵母细胞成熟的关系。结果研究组IGF-I水平高于对照组,当卵泡直径<14mm时,卵母细胞成熟率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论当PCOS患者的卵泡液内IGF-I水平较高时,对卵泡直径在14 mm以下的卵母细胞的成熟有着极大的影响。

胎儿畸形1例分析

本文应用彩色多普勒超声诊断仪观察1例胎儿畸形分析,本例可见从脐部裂腹处腹壁回声缺如,肠管漂浮于羊水之中,动态观察可见腹外肠管蠕动。1资料与方法患者21岁,孕39W＋2d,初孕,方城县博望乡人,务农。早孕期间曾因感冒在当地村卫生所进行治疗,具体用药不祥。夫妻二人身体健康。于2005年9月21日到我院行孕期健康检查,门诊医生申请胎儿B超常规检查,了解胎儿发育情况。采用美国惠普HX影像之星彩色多普勒超声诊断仪,

超声造影诊断海绵状肝血管瘤临床价值及其影像表现分析

目的探讨超声造影诊断海绵状肝血管瘤的临床价值。方法选取2016年9月至2018年3月某院治疗的94例疑似海绵状肝血管瘤的患者作为研究对象,所有患者均行常规超声及超声造影检查,将病理结果作为诊断金标准,对比常规超声与超声造影的诊断准确度、灵敏度及特异度,分析患者超声造影影像学表现。结果94例患者中经病理诊断有65例确诊为海绵状肝血管瘤,共发现病灶数73个,其中肝左叶病灶数有25个,肝右叶病灶数有48个,直径为1.4～4.3cm,平均直径为(2.79±0.82)cm;经常规超声检查发现65例确诊患者中有39例为海绵状肝血管瘤,共包含病灶数46个,34例患者呈现高回声,考虑为血管瘤;有9例患者被误诊,26例患者被漏诊。经超声造影检查发现65例确诊患者中有57例为海绵状肝血管瘤,共包含病灶数67个,其中39个病灶为周边向中心完全充填,16个病灶充填时间缩短,整体性呈现增强状态,5个病灶为低回声病灶;有5例患者被误诊,8例患者被漏诊。超声造影诊断准确度及灵敏度均较常规超声高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论超声造影在海绵状肝血管瘤诊断中具有较高的临床价值,其可有效区分高回声病灶与低回声病灶,提升诊断准确度及灵敏度,降低漏诊率。