microRNA在大鼠急性心肌梗死模型的差异表达及其功能分析

目的应用microarray筛选在急性心肌梗死缺血心肌中差异表达的microRNA(miRNA),用生物信息学方法分析miRNA的转录因子和靶基因功能,探索其相关性,为进一步阐明miRNA在急性心肌梗死过程中的病理生理作用打下基础。方法20只雄性SD大鼠,通过前降支动脉结扎法建立急性心肌梗死模型,模型成功后随机分为心肌梗死后2d组,7d组,14d组,每组5只动物。另设对照组(n=5)。提取缺血心肌的总RNA进行芯片检测,应用实时定量RT-PCR法验证芯片结果的可靠性。结果microarray检测获得17个与急性心肌梗死相关的miRNA,其中9个miRNA表达显著上调,8个miRNA表达显著下调,miRNA靶基因和转录因子的功能涉及心肌再生\血管新生\心肌肥大等等。结论microarray筛选得到的与急性心肌梗死相关的差异表达的miRNA可能作为心肌梗死新的生物标记物和治疗靶点。

大鼠急性心肌梗死后心肌组织中miR-214的表达变化

目的观察大鼠心肌梗死后心室重塑过程中心肌组织中miR-214的表达变化。方法 10只雄性SD大鼠,通过前降支动脉结扎法建立大鼠急性心肌梗死模型,模型制备成功后随机分为心肌梗死后14 d组、28 d组,另设对照组,每组5只动物。抽提梗死周边区心肌组织的RNA及miRNA,应用荧光定量PCR法检测MHC-α、MHC-βmRNA及miR-214的表达。结果心肌组织中MHC-αmRNA表达随着心肌梗死时间延长而逐渐降低。与假手术组比较,心肌梗死术后14 d组MHC-α的表达下降46%(0.54±0.06 vs.1.00±0.09,P<0.01),心肌梗死术后28 d组MHC-α的表达下降63%(P<0.01)。心肌组织中MHC-βmRNA表达随着心肌梗死时间延长而逐渐增加。与假手术组比较,心肌梗死术后14 d组MHC-β的表达增加2倍(P<0.01),心肌梗死术后28 d组MHC-α的表达增加3.22倍(P<0.01)。心肌梗死术后14 d组和28 d组梗死周边区心肌组织中miR-214的表达逐渐增加。与假手术组相比,心肌梗死术后14 d组miR-214的表达增加33%(P<0.01),心肌梗死术后28 d组miR-214的表达增加88%(P<0.01)。结论大鼠心肌梗死后心室重塑过程中心肌组织中miR-214的表达上调,miR-214可能参与调控了心肌梗死后心室重塑。

大鼠心肌梗死后血浆miR-214表达的变化

目的观察大鼠心肌梗死后血浆中miR-214的表达变化。方法 10只雄性SD大鼠,通过前降支动脉结扎法建立大鼠急性心肌梗死模型,模型制备成功后随机分为心肌梗死后14 d组、28 d组,另设对照组,每组5只动物。抽提血浆中的miRNA,应用荧光定量PCR法检测miR-214的表达。结果与假手术组相比,术后14 d组miR-214的表达增加60%[(1.60±0.09)vs.(1.00±0.06),P<0.01],术后28 d组miR-214的表达增加116%[(2.16±0.13)vs.(1.00±0.06),P<0.01]。结论大鼠心肌梗死后随着心肌梗死时间的延长,血浆中miR-214的表达逐渐上调,miR-214可能参与调控了心肌梗死后心室重塑。

阿托伐他汀对心肌梗死大鼠心肌纤维化和细胞外信号调节激酶表达的影响

目的观察阿托伐他汀对大鼠急性心肌梗死后心室重塑和心肌组织中细胞外信号调节激酶(ERK)1/2蛋白表达的影响。方法 20只雄性SD大鼠通过前降支动脉结扎法建立大鼠急性心肌梗死模型后随机分为心肌梗死组(AM I),心肌梗死阿托伐他汀组(ATV),另设假手术组(sham),每组n=10。阿托伐他汀组每天给予阿托伐他汀(10 mg/kg)灌胃,持续4周。假手术组和心肌梗死组每天给予同等量的0.9%氯化钠注射溶液灌胃。应用real-tim e PCR法检测梗死周边区心肌组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达,应用westernb lot方法检测p-ERK1/2、ERK1/2蛋白的表达。结果与假手术组比较,心肌梗死组和阿托伐他汀组中Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达高于假手术组(P<0.01),阿托伐他汀组Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达显著低于心肌梗死组(P<0.01)。心肌梗死组和阿托伐他汀组中p-ERK1/2表达高于假手术组(P<0.01),阿托伐他汀组p-ERK1/2表达低于心肌梗死组(P<0.01)。结论阿托伐他汀可以改善大鼠心肌梗死后心室重塑,其机制可能与下调心肌组织中p-ERK1/2表达有关。