全国多中心血流分离近平滑念珠菌药物敏感性和分子流行病学回顾性研究

目的对全国多中心收集的血流感染近平滑念珠菌进行分子流行病学和药物敏感性分析。方法将全国42家医院377例血流感染患者中分离的非重复菌株纳入研究,采用美国临床和实验室标准协会(CLSI)M44-A2纸片扩散法进行氟康唑和伏立康唑敏感性检测,采用微卫星分型方法对所有菌株进行分子流行病学分析。结果377例患者中,46.2%的患者年龄超过60岁;分别有26.5%、23.9%、21.8%和12.5%的患者分布于外科病房、内科病房、综合ICU和外科ICU病房。377株近平滑念珠菌中,24株(6.4%)对氟康唑耐药,10株(2.7%)对伏立康唑耐药。微卫星分型结果显示,所有菌株共分为172个微卫星型别(microsatellite genotype,MT),125个MT型别各自仅在单个菌株中出现;28家医院内经分析存在65例同家医院内不同患者感染同型别菌株的情况,其中同型别氟康唑耐药株在同家医院内感染不同患者的情况为6例。结论本研究回顾分析全国多中心血流感染近平滑念珠菌的分子流行病学,在多家医院内均发现同型别菌株包括氟康唑耐药菌株分离于不同患者的情况,提示存在近平滑念珠菌院内传播的可能。

评估国产利奈唑胺对葡萄球菌和肠球菌体外抗菌活性

目的以进口利奈唑胺(原研药)为对照,评估国产利奈唑胺(仿制药)的体外抗菌活性及与进口利奈唑胺的一致性。方法收集6所医院分离的甲氧西林耐药和敏感金黄色葡萄球菌(MRSA、MSSA),甲氧西林耐药和敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS、MSCNS),万古霉素耐药肠球菌(VRE)临床分离菌株,采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法进行抗菌药物敏感性试验。结果国产利奈唑胺对金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌及VRE的MIC50和MIC90分别为2mg/L和4mg/L、1mg/L和2mg/L及2mg/L和2mg/L,全部研究菌株对国产利奈唑胺呈现敏感。国产和进口利奈唑胺仅在对MSSA的MIC50上相差一个稀释梯度,两者对其他葡萄球菌和VRE的MIC范围、MIC50和MIC90完全一致。国产和进口利奈唑胺对全部研究菌株抗菌药物敏感性结果的分类一致率(CA)和基本一致率(EA)均高达100%,两者对全部研究菌株的MIC值完全一致或相差不超过±1个稀释梯度。除了MRCNS对替考拉宁的敏感率为88.0%,葡萄球菌对替加环素、达托霉素、万古霉素和替考拉宁的敏感率均高达100%。VRE菌株对替加环素和达托霉素呈现100%敏感率,而对替考拉宁的敏感率仅为50.0%。相比之下,全部菌株对左氧氟沙星的敏感率明显低于其他抗菌药物。结论国产利奈唑胺对多重耐药葡萄球菌及肠球菌具有极好的体外抗菌活性,且与进口利奈唑胺的体外抗菌活性高度一致。

2013年中国侵袭性酵母菌感染流行病学和唑类药物耐药性分析

目的通过对中国侵袭性真菌监测网(CHIF-NET)2013年中国48家综合医院收集的1 562株酵母菌进行流行病学分布及唑类耐药性分析,为临床侵袭性酵母菌的唑类用药提供数据基础。方法收集2013年中国侵袭性真菌监测网48家医院共1 562株酵母菌菌株及其原始信息,采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TO MS,法国生物梅里埃公司)结合核糖体DNA测序明确菌种鉴定;根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)M44-A2纸片扩散法检测菌株对氟康唑及伏立康唑的敏感性。结果本研究共分离出酵母菌1 562株,其中白念珠菌分离率最高(38.4%),其次为近平滑念珠菌复合体(18.4%)、热带念珠菌(16.4%)、光滑念珠菌复合体(9.4%)及其他少见菌种(<6.4%);患者性别中男性占比(60.7%)高于女性(38.9%);患者年龄中,65岁以上年龄段患者最多(34.2%),其次为50~65岁(30.6%)、15~49岁(29.9%)和0~14岁患者(<1.9%);标本来源中以血液标本(46.4%)为主,其次为腹水(10.2%)、导管(9.2%)及引流液(8.5%)、分泌物(5.2%),其他标本类型均较少(<4.7%)。住院患者分离率(93%)显著高于门急诊患者(7%);科室类型中以外科患者(33.8%)为主,其次为重症监护病房(ICU)患者(27.5%)、内科患者(20.5%)及其他病房(<18.2%);药敏结果显示,白念珠菌及近平滑念珠菌复合体对氟康唑及伏立康唑敏感性均较高(>94%),热带念珠菌对氟康唑及伏立康交叉耐药率最高(21.9%),光滑念珠菌复合体交叉耐药率次之(15%),其次为季也蒙念珠菌(8.1%)和菌膜念珠菌(4.3%)。结论应持续加强中国地区侵袭性酵母菌监测,在使用抗菌药物过程中,合理控制其用量,防止耐药率的上升。

Sensititre YeastOne显色药敏板与微量肉汤稀释法检测阿萨希毛孢子菌体外药物敏感性比较研究

目的以CLSI微量肉汤稀释法为参考方法,探讨商品化显色药敏板(Sensititre YeastOne)检测阿萨希毛孢子菌体外药物敏感性的临床应用价值。方法分别用微量肉汤稀释法和Sensititre YeastOne同时检测62株阿萨希毛孢子菌对临床常用7种抗真菌药物的体外敏感性,MIC值读取时间分别为24h和48h。结果微量肉汤稀释法结果显示卡泊芬净和米卡芬净对阿萨希毛孢子菌无体外活性,二者MIC90均为16μg/mL;唑类药物对阿萨希毛孢子菌体外活性较好,培养24h MIC90分别为氟康唑8μg/mL、伏立康唑0.125μg/mL、伊曲康唑0.5μg/mL;4.8%(3/62)阿萨希毛孢子菌对两性霉素B有高MIC值(4μg/mL);经24h培养,Sensititre YeastOne与微量肉汤稀释法检测阿萨希毛孢子菌对7种抗真菌药物的体外MIC一致率(essential agreement,EA)分别为氟康唑93.5%,伏立康唑98.4%,伊曲康唑98.4%,两性霉素B 98.4%,5-氟胞嘧啶88.7%,卡泊芬净100%,米卡芬净100%;培养48h后,二者检测两性霉素B和5-氟胞嘧啶MIC一致率有所下降,分别为83.9%和67.7%;对微量肉汤稀释法而言,培养时间对两性霉素B和5-氟胞嘧啶MIC值影响较大,24h和48hMIC一致率分别为69.4%和53.2%,对Sensititre YeastOne,MIC值明显受培养时间影响的药物仅见于5-氟胞嘧啶,24h和48h MIC一致率为11.3%,其余药物不同MIC读取时间一致率非常好。结论唑类药物对阿萨希毛孢子菌体外抗菌活性较好,Sensititre YeastOne和微量肉汤稀释法检测阿萨希毛孢子菌体外MIC值一致率较高,用于临床阿萨希毛孢子菌体外药物敏感性检测具有一定的实用价值。

CRISPR-Cas9基因编辑技术在念珠菌中的应用研究进展

近年来,真菌感染已经成为严重威胁全球健康的疾病,全球约有3亿人遭受了侵袭性真菌感染,造成每年约有160万人死亡,接近结核病的死亡人数[1]。尤其随着免疫功能低下人群的不断增加,侵袭性真菌感染导致的死亡率高达30%~90%[2]。念珠菌属是真菌感染的主要致病菌,白念珠菌仍然是最常见的菌种,而非白念珠菌侵袭性感染所占的比例明显升高[3-4]。

核糖体型别027型高产毒艰难梭菌致感染性休克1例

1例社区获得性肺炎患者入院后给予抗感染治疗,经头孢西丁、左氧氟沙星、头孢哌酮-舒巴坦、莫西沙星治疗24天后出现艰难梭菌感染,继而血压下降,出现感染性休克,转入ICU治疗。后经万古霉素口服治疗14天后腹泻症状逐渐缓解。本病例中分离到的艰难梭菌经核糖体分型鉴定为027型高产毒艰难梭菌,其引发的艰难梭菌感染为重症感染。

国产卡泊芬净对曲霉菌的体外活性评估

目的以进口卡泊芬净(原研药)为对照,评估国产卡泊芬净(仿制药)对曲霉菌的体外抗菌活性及与进口卡泊芬净的一致性。方法 利用北京协和医院分离的75株侵袭性曲霉菌,采用CLSI推荐的微量液基稀释法对8种抗真菌药物进行体外敏感性试验。结果 棘白菌素类药物的MEC值总体低于唑类药物的MIC值,而米卡芬净的MEC 50 和MEC 90 比卡泊芬净低出2个梯度。除了对1株黄曲霉的MIC值为4 μg/mL,两性霉素B对其余74株菌株的MIC值≤2 μg/mL。全部菌株对伏立康唑和泊沙康唑均敏感,分别有16株烟曲霉、2株黄曲霉和5株黑曲霉对伊曲康唑耐药。国产卡泊芬净和进口卡泊芬净仅对11株曲霉菌的MEC值存在不一致,且国产卡泊芬净仅较卡进口泊芬净只低一个浓度梯度。卡泊芬净和米卡芬净对超过76%的曲霉菌24 h和48 h的药敏测定结果完全一致。结论 相较于唑类药物和两性霉素B,卡泊芬净对曲霉菌具有很好的体外抗真菌活性,且国产卡泊芬净与进口卡泊芬净的体外抗菌活性基本高度一致。

米索前列醇用于足月妊娠引产安全性分析

观察米索前列醇用于足月妊娠引产的安全性 .方法 ;回顾性分析了 72例使用米索前列醇引产和 10 0例使用缩宫素引产的足月妊娠产妇的临床资料 .结果 :米索组出现过频宫缩 14例 ,而缩宫素组未出现异常宫缩 .两组羊水混浊发生率分别为 2 2 %、10 % ,差异有显著性 .剖宫产原因中 ,胎儿宫内窘迫均为两组主要手术指征 ,米索组 8例占 6 6 .7% ,缩宫素组 7例占 4 4 % ,差异有显著性 ,提示 :米索前列醇用于足月妊娠引产 ,对母亲和胎儿有潜在的不安全因素存在 .

先锋V引起老年患者肾脏毒性反应的护理

先锋Ｖ对老年患者易发生肾脏毒性反应，本文对１０例老年患者因先锋Ｖ引起肾脏毒性反应进行抢救，其中３例死亡、７例抢救成功。结果表明：发病常在用药２周左右，在用药过程中应及时监测患者肾功能情况。如尿常规检验，ＢＵＮ、尿比重等，应了解老年患者的临床特点。强调早期发现，采取合理有效的防治措施，可以逆转。

宫腔镜治疗子宫内膜息肉946例分析

目的：探讨宫腔镜电切术治疗子宫内膜息肉的临床价值。方法：对2003-12~2011-06利用宫腔镜电切镜治疗子宫内膜息肉946例患者进行回顾性分析，结果：946例手术均一次完成。无1例出现子宫穿孔、空气栓塞及水中毒，无远期并发症。术后随访3个月，月经周期规律，经量正常者801例。经量减少者105例。术后1年内妊娠者84例。术后1年内随访873例未见复发。结论：宫腔镜手术切除子宫内膜息肉，准确、有效、微创，缓解症状，复发率低，改善患者的生殖预后。

血流感染流行病学研究进展

血流感染(bloodstream infection,BSI)是指病原微生物进入血流引起的播散感染,是危及人类生命的全身性感染疾病,主要病原微生物包括细菌、真菌及病毒等,可导致菌血症、败血症和脓毒症,严重者可引起休克、播散性血管内凝血(DIC)、多脏器功能衰竭乃至死亡。近年来,随着侵袭性操作的不断增加及广谱抗菌药物、皮质激素等药物的不合理应用,BSI的发病率及病死率逐年上升,造成了患者住院时间的延长和经济负担的增加。本文对BSI的发病率、病死率、危险因素及常见病原体作一综述。

卡泊芬净对16种念珠菌体外抗菌活性研究

目的比较卡泊芬净国产与进口制剂对引起侵袭性感染的念珠菌属体外抗菌活性。方法从29所医院收集了分离自血液等无菌部位的337株念珠菌,包括白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌等16种念珠菌,采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法对8种抗真菌药物进行体外药物敏感性试验。结果除1株光滑念珠菌和1株克柔念珠菌对国产卡泊芬净中介外,其余菌株均敏感。不同菌种药敏数据显示,国产与进口卡泊芬净的MIC50和MIC90完全一致,除热带念珠菌外,国产与进口卡泊芬净对其余菌种的MIC分布范围均一致。国产卡泊芬净对常见菌种的MIC50和MIC90为白念珠菌0.064mg/L和0.125mg/L、热带念珠菌0.125mg/L和0.25mg/L、光滑念珠菌0.125mg/L和0.125mg/L、克柔念珠菌0.25mg/L和0.25mg/L,近平滑念珠菌复合体和季也蒙念珠菌的MIC50和MIC90为0.5mg/L和1mg/L,略高于上述念珠菌。分别分析氟康唑敏感和耐药的白念珠菌和热带念珠菌对棘白菌素类药物的敏感率,发现氟康唑耐药组与敏感组菌株对应的棘白菌素类药物MIC分布范围基本一致,几何均数无明显差异,并且均未发现卡泊芬净耐药菌株。结论卡泊芬净对多数念珠菌属均有较好的抗真菌活性,并且国产与进口卡泊芬净体外抗真菌活性高度一致。

白念珠菌生物被膜的研究进展

白念珠菌是一种机会性致病真菌,也是引起真菌血症和播散性念珠菌病的主要病原体[1]。白念珠菌定植于人体的皮肤和黏膜等部位,当机体的正常防御功能受损时,如创伤、营养失调、免疫功能缺陷、激素和抗生素的应用导致菌群失调等[2],白念珠菌会过度生长,从口腔、咽喉和生殖道等浅表黏膜感染转变为循环系统、骨骼和大脑的全身性侵袭性念珠菌病[3]。白念珠菌常以生物被膜的形式生长在植入体内的生物材料上,比如中心静脉导管、导尿管、心脏起搏器和其他与器官直接接触的材料。

宫腔镜、B超对304例不孕症病因的诊断分析

目的通过宫腔镜、B超检查比较二者在不孕症病因检查中的诊断价值。方法选择304例不孕症患者进行宫腔镜及B超检查。结果诊断宫内病变,B超检出率为13.49%,宫腔镜检出率为42.43%。诊断盆腔病变,B超检出率为22.04%,宫腔镜检出率为0。结论宫腔镜与B超在不孕症的病因诊断中起到相互补充的作用。

宫颈环切术治疗宫颈上皮内瘤变68例临床观察

目的探讨宫颈环切术(LEEP)治疗宫颈上皮内瘤变(CIN)的价值。方法回顾分析2008年1月至2011年12月我院病理证实为CIN68例,其中CINⅠ12例,CINⅡ48例,CINⅢ8例。月经干净3-7天行宫颈环切术。结果手术时间3-10分钟,平均出血15.6ml,32例几乎无出血;15例出现下腹坠痛,能忍受。CIN治愈率91.7%,CINⅡ治愈率91.7%,CINⅢ62.5%。结论 LEEP治疗CIN,手术时间短、出血少、痛苦轻、治愈率高。

血培养奥默柯达酵母鉴定方法学比较及药物敏感性

目的收集中国侵袭性真菌耐药监测网的血培养阳性奥默柯达酵母,进行表型鉴定方法学比较及体外抗真菌药物敏感性测定。方法收集7年间中国16所医院分离的34株血培养阳性的奥默柯达酵母分离株进行研究。以26S rDNA测序为金标准,对3种表型鉴定方法进行比较并回顾了当地参与医院提交的原始鉴定结果。采用标准微量肉汤稀释法(BMD)测定奥默柯达酵母体外对抗真菌药物的敏感性。结果使用VITEK 2-Compact和VITEK MS分别对34株奥默柯达酵母进行菌种鉴定,明确获得种鉴定结果分别达94.1%和100%。对于Bruker MS,用直接涂布法和甲酸-乙醇蛋白提取法分别有3株(8.8%)和33株(97.1%)分离菌株正确鉴定到种水平。然而只有20株(58.8%)分离株最初被当地医院正确鉴定为奥默柯达酵母。CHROM agar的鉴定错误率最高(6/6)。根据BMD结果,MIC90最高见于氟康唑(16mg/L),其次是米卡芬净、卡泊芬净、伊曲康唑和两性霉素B(1mg/L)、5-氟胞嘧啶和伏立康唑(0.5mg/L)、泊沙康唑(0.25mg/L)。结论奥默柯达酵母感染应引起重视,早期准确快速鉴定及抗真菌药物敏感性检测对其感染治疗至关重要。

三维打印在软骨组织工程中的应用

在过去的几十年中, 软骨的再生已经取得了巨大的进展。传统构建组织工程软骨支架的技术主要包括孔剂法(或模板法)、相分离法、气体发泡法、冷冻干燥法、静电纺丝法等。软骨是异质性的, 传统支架很难模拟软骨的高度各向异性结构。因此, 软骨的功能再生具有挑战性。随着三维打印技术的进步, 通过生物材料、细胞和活性生物分子的共沉积, 使制备精细结构、梯度变化的功能性仿生支架成为可能, 从而实现功能性软骨再生。该文详细阐述了三维打印技术及其在不同解剖位置(关节、耳廓、鼻)软骨再生中的应用。此外, 还讨论了制备具有区域结构梯度和区域成分梯度的仿生构建体的重要性。三维生物打印、四维打印技术及智能材料为仿生组织和器官的构建带来了希望。

糠秕马拉色菌引起2例导管相关感染病例及文献复习

目的报道2例由糠秕马拉色菌引起的导管相关感染病例。方法2例接受全肠外营养住院患者出现发热后,分别留取中心静脉导管(PICC)进行培养,使用BACT/ALERT 3D系统进行外周血培养,检测(1,3)-β-D葡聚糖。采用VITEK II Compact和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行菌种鉴定,并进行26S rDNA D1/D2和rDNA ITS双向测序。采用E-test法进行抗真菌药敏试验,测试药物包括氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、两性霉素B和卡泊芬净。结果2名患者PICC培养7 d后血琼脂上有小菌落生长,用VITEK II和MALDI-TOF MS鉴定均为糠秕马拉色菌,经ITS和26S D1/D2测序分析证实。两名患者的外周血瓶培养30 d均为阴性,(1,3)-β-D葡聚糖小于150 pg/mL。两株糠秕马拉色菌的体外药敏试验结果相同,氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、两性霉素B和卡泊芬净的最低抑菌浓度(MIC)分别为>256μg/mL、>32μg/mL、0.38μg/mL、>32μg/mL和>32μg/mL。结论由马拉色菌引起的导管相关感染不易检出,当临床怀疑使用PICC患者感染马拉色菌时,建议延长培养时间或使用专用培养基。(1,3)-β-D葡聚糖对马拉色菌属所致导管相关感染的诊断帮助不大。伊曲康唑可能是治疗糠秕马拉色菌所致感染的合适选择。

肺炎链球菌鼻咽部定植及胞内感染的致病机制研究进展

肺炎链球菌是人上呼吸道常见定植菌,但在免疫力低下人群中可引起致死性疾病,如肺炎、菌血症、脑膜炎等。过去,肺炎链球菌常常被认为是一个胞外感染菌,但近年来研究显示其也可以在各种毒力因子相互作用下逃避宿主的免疫反应,在细胞内存活。本文综述了肺炎链球菌从鼻咽部定植发展为在不同器官组织内发生胞内感染的致病机制研究进展。

Vitek MS与Bruker MS对光滑念珠菌复合体鉴定能力评估

目的评估中国医院侵袭性真菌监测网（CHIF-NET）2010-2014年收集的光滑念珠菌复合体原始鉴定、Vitek MS与Bruker MS鉴定结果。方法收集CHIF-NET 2010-2014五年中12株Candida nivariensis和1株Candida bracarensis及来自CHIF-NET 2010-2014连续五年参加的11所医院的光滑念珠菌411株,所有菌株均经过分子生物学方法进行复核鉴定确认;以复核鉴定结果作为金标准,评估各医院原始常规方法鉴定结果,并评估Vitek MS和Bruker MS基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）对光滑念珠菌复合体的鉴定性能。结果与分子生物学复核鉴定结果相比,光滑念珠菌的原始鉴定准确率为90.3%,9.7%的菌株被显色培养基、ID32C、API 20C或Vitek 2Compact错误鉴定为近平滑念珠菌、白色念珠菌等;常规方法无法鉴定C.nivariensise和C.bracarensis;Vitek MS和Bruker MS对光滑念珠菌的鉴定准确率分别为97.6%和100.0%;Vitek MS 2.0数据库中无C.nivariensise和C.bracarensis的参考谱图,故无法鉴定;Bruker Biotyper 3.1数据库中有这两种菌的参考谱图,但1株C.bracarensis无鉴定结果,12株C.nivariensise全部鉴定正确,鉴定分值为1.708~1.944。结论该研究率先在国内评估了Vitek MS与Bruker MS鉴定光滑念珠菌复合体的性能,两者对于光滑念珠菌的鉴定比较可靠;对于少见念珠菌菌种的鉴定,Bruker MS优于Vitek MS。