生物反应器中PRRSV TJM株在Marc-145细胞上最佳增殖条件研究

为了在Marc-145细胞上获得更高滴度的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）TJM株,对细胞培养条件、细胞接种量、微载体的用量以及病毒培养时间等条件进行了优化。结果表明,利用生物反应器悬浮培养Marc-145细胞在血清为金源康且含量为10%、培养基为DMEM、细胞接种密度为20-30细胞/球、微载体为5 g等条件下生长状态最好;病毒最佳培养时间为27-36 h,病毒增殖效果好且能够达到最高的病毒滴度。本试验为微载体培养条件下大规模生产PRRSV-TJM株疫苗奠定了一定理论基础。

高致病性猪蓝耳病的诊断与综合防控

猪蓝耳病是一种由猪蓝耳病毒变异菌株引起的感染性疾病,对猪养殖会造成极大影响。本文简要探讨了高致病性猪蓝耳病的诊断与防控。1诊断1.1症状高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖和呼吸综合征病毒的变异菌株引起的一种急性、高度感染性和高度致病性的疾病。它的特征是猪生殖疾病和猪的严重呼吸症。染病猪会出现淋巴结肿胀、充血甚至出血,某些猪会有胃黏膜溃疡、坏死症状。母猪厌食、呼吸困难、嗜睡,孕猪容易流产,小猪眼睛肿胀等都是蓝耳病症状。

仔猪白痢的诊断及防治措施

在生猪养殖过程中,仔猪白痢十分常见,直接影响到仔猪的健康状况,再加上抵抗力差,所以一旦发病存活率将显著降低,此种疾病严重制约了猪养殖产业的发展,其预防和治疗一直都是养殖人员高度重视的问题。本文首先分析仔猪白痢的流行特点、临床症状、鉴别诊断,其次从几个方面深入探究此种疾病的中、西药治疗方法以及预防策略,力求构建精细化生猪养殖模式,不断地降低疾病发病率,助力生猪养殖行业的高质量发展。

生物反应器微载体放大培养Marc-145细胞及PRRSV增殖情况

目的确定不同级别生物反应器间Marc-145细胞在微载体上消化放大培养条件,实现Marc-145细胞二级放大后,在生物反应器内增殖猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)。方法在一级生物反应器(BC-7L型)内,以微载体密度4 g/L培养Marc-145细胞,培养72 h时经灭菌PBS漂洗、胰酶消化后,接种至二级生物反应器(BC-14L型)继续培养,实现反应器间微载体细胞5倍体积增殖培养。以0.05 MOI接种PRRSV(TJM-F92株),接毒后24、36、48、60、72 h分别取上清及全液样品,检测病毒效价(TCID50)。结果 Marc-145细胞经过一级生物反应器培养72 h后,细胞密度达28.7×105个/ml;消化放大后,二级生物反应器培养72 h后,细胞密度达24.9×10~5个/ml。接毒后36 h,样品效价峰值可达108.19 TCID50,上清与全液样品效价差异较小。结论 Marc-145细胞从BC-7L型到BC-14L型不同反应器之间进行放大培养是可行的,为PRRSV活疫苗新型工艺改进及大规模放大生产奠定了基础。