miR‑15a‑5p对子痫前期胎盘滋养细胞自噬的影响

目的探讨miR‑15a‑5p对子痫前期胎盘滋养细胞自噬的影响。方法收集2020年12月至2022年12月的正常妊娠胎盘组织和子痫前期胎盘组织各20例。采用荧光定量PCR检测胎盘组织和滋养细胞中miR‑15a‑5p的表达,并对其表达水平与患者血压做相关性分析;将HTR8‑S/Vneo细胞分正常组(control)和缺氧组(hypoxia),观察缺氧对miR‑15a‑5p表达的影响。另设mimic‑NC组、mimic‑NC+hypoxia组、miR‑15a‑5p mimic组、miR‑15a‑5p mimic+hypoxia、inhibitor‑NC组、inhibitor‑NC+hypoxia、miR‑15a‑5p inhibitor组、miR‑15a‑5p inhibitor+hypoxia组,观察miR‑15a‑5p对缺氧诱导的滋养细胞自噬相关蛋白LC3B和p62蛋白的影响。用Western blot检测各组中自噬相关蛋白LC3B和p62蛋白的表达水平;TargetScan网站预测miR‑15a‑5p的靶基因,检测其在胎盘组织和滋养细胞中的表达水平。结果与对照组相比,miR‑15a‑5p在子痫前期胎盘组织和缺氧滋养细胞中的表达均增高,且与患者血压呈正相关;缺氧条件下过表达miR‑15a‑5p,LC3BⅡ/Ⅰ表达增高,P62蛋白相对表达量降低;干扰miR‑15a‑5p后,LC3BⅡ/Ⅰ表达量降低,p62蛋白表达量升高;荧光定量PCR及Western blot检测结果发现YAP1在子痫前期胎盘组织和缺氧滋养细胞中的表达水平明显降低。结论miR‑15a‑5p在子痫前期胎盘滋养细胞中的高表达,其可能通过与YAP1结合从而促进PE自噬的发生。

环状RNA hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用

背景:同型半胱氨酸水平上升会诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡,但机制尚不清楚。目的:探讨hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡中的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,将其分为对照组、同型半胱氨酸组、干扰对照组、干扰对照+同型半胱氨酸组、干扰hsa-circ-0001360组、干扰hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组、过表达对照组、过表达对照+同型半胱氨酸组、过表达hsa-circ-0001360组和过表达hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组,同型半胱氨酸的干预浓度均为100μmol/L。干预细胞72 h后,应用Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa-circ-0001360的表达水平。结果与结论:①与对照组相比,同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3和Bax的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2的表达明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显增高(P<0.01);②与对照组相比,同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中hsa-circ-0001360的表达明显升高(P<0.01);③hsa-circ-0001360在人脐静脉内皮细胞的细胞质中表达显著高于细胞核(P<0.01);④与干扰对照组或干扰对照+同型半胱氨酸组相比,干扰hsa-circ-0001360组和干扰hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3、Bax的表达明显降低(P<0.01),Bcl-2的表达明显升高(P<0.01),细胞凋亡率明显降低(P<0.01);⑤与过表达对照组或过表达对照+同型半胱氨酸组相比,过表达hsa-circ-0001360组和过表达hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3、Bax的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2的表达明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01);⑥以上结果表明,hsa-circ-0001360可以促进同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡。

4063例叶酸代谢关键酶基因多态性特点及其与同型半胱氨酸的相关性

目的探讨备孕夫妇叶酸代谢酶基因多态性分布特征及其与同型半胱氨酸(Hcy)的关系,为指导个体化叶酸增补方案提供理论依据。方法随机抽取2020年7月至2022年6月符合生育政策并计划怀孕的夫妇基本资料及外周血,最终4063例纳入研究,采集其外周血测定5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)rs1801133、rs1801131位点和甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)rs1801394位点的基因型及血清Hcy水平,进一步展开分析。结果本研究受检人群叶酸代谢酶基因多态性分布符合HW遗传平衡,其中MTHFR rs1801133和rs1801131位点存在连锁不平衡(D’=0.98,r2=0.14)。MTHFR基因rs1801133位点的CC、CT及TT基因型频率分别为42.31%、44.47%和13.22%;MTHFR基因rs1801131位点的AA、AC及CC基因型频率分别为62.15%、33.20%和4.65%;MTRR基因rs1801394的AA、AG及GG基因型频率分别为55.06%、38.59%和6.35%。不同叶酸代谢酶基因型/叶酸代谢障碍风险人群之间Hcy水平差异无统计学意义(P>0.05);男性在相同叶酸代谢酶基因型/叶酸代谢障碍风险下Hcy水平更高(P<0.001);35岁以下MTHFR rs1801133位点CC基因型、rs1801131位点AC和CC基因型的人群Hcy水平更高(P<0.05)。结论桃源县叶酸代谢酶基因多态性分布具有自身特点,未来需要结合遗传因素和环境因素格外关注备孕期男性及非高龄人群(<35岁)并进行叶酸补充指导和监测,这可能成为进一步降低新生儿出生缺陷的重要途径。