莱菔硫烷诱导Ⅱ相酶表达保护大鼠脊髓运动神经元

目的探讨Ⅱ相酶诱导剂莱菔硫烷(SF)对运动神经元的保护作用。方法应用SD乳鼠脊髓体外器官型培养模型,随机分成3组:对照组、THA组和SF联合THA组。用免疫组化法检测运动神经元数目,用Westernblot法检测Ⅱ相酶蛋白水平。结果THA干预后运动神经元数目较对照组明显减少(P<0.05,n=10～15),而应用SF预处理48h,再给予SF和THA联合处理3周后,运动神经元数目较THA组明显增加(P<0.05,n=10～15),同时Ⅱ相酶NQO-1和HO-1表达明显升高(P<0.05,n=3)。结论SF通过诱导Ⅱ相酶NQO-1和HO-1的表达,可以有效预防THA引起的运动神经元损伤。

谷氨酸兴奋性毒性模型的研究

目的探讨谷氨酸兴奋性毒性模型培养液各成分中谷氨酸的含量及模型培养前后培养液中谷氨酸的变化。方法应用脊髓器官型培养模型,随机分成对照组和苏-羟天冬氨酸(THA)组,用免疫组化法检测运动神经元数目,用多功能酶标仪检测培养基中谷氨酸的含量。结果最小基础培养基和马血清中均含有谷氨酸。经过4w培养后,THA组培养液中谷氨酸的含量明显高于对照组(P<0.05),运动神经元数目较对照组减少(P<0.05)。结论 THA诱导的脊髓器官型培养模型可以模拟肌萎缩侧索硬化运动神经元变性,作为谷氨酸兴奋性毒性模型,我们在应用它时一定要严格检测培养液中谷氨酸的含量,每一个处理因素都要考虑其对谷氨酸的影响。

TACE对肝癌细胞凋亡和增殖的影响

目的 探讨经动脉化疗栓塞术 (TACE)对肝细胞癌细胞凋亡指数 (AI)和细胞增殖指数 (PCNA LI)的影响 ,以及AI和PCNA LI的相关性。方法 经病理证实的肝细胞癌病例 63例 ,包括单纯手术组 42例 ,TACE组 2 1例。采用TUNEL法和免疫组织化学SP法分别检测各标本的AI和PCNA LI。结果 TACE组AI高于单纯手术组 ,PCNA LI低于单纯手术组 (P <0 .0 1) ,AI和PCNA LI呈高度负相关 (P <0 .0 1)。TACE组术后血清AFP值较术前下降 (P <0 .0 5 ) ,肿瘤缩小 ,坏死率增高 (P <0 .0 1)。结论 TACE可以明显增加HCC细胞凋亡率 ,降低细胞增殖率 ,从而促使肿瘤缩小 ,促进肿瘤坏死 ,达到治疗目的。

国人脊髓圆锥位置的磁共振成像研究

目的 通过MRI研究非脊柱脊髓畸形的国人人群圆锥位置的变化。方法 应用 1.5TMRI机对 1199例病人行腰椎MR扫描 ,自旋回波T1加权、正中矢状位像上观测其圆锥末端的位置。根据其与相应椎体的上、中、下 1/3及椎间盘的对应关系定位。结果 圆锥末端的平均位置为L1的下 1/3水平 (范围 :T12 的中 1/3～L3 的上 1/3 ) ,圆锥末端的位置呈正态分布 ,女性圆锥位置低于男性 (P <0 .0 0 1) ,各年龄段无差别 (P >0 .0 5 )。结论 MRI可以观测到圆锥末端的位置 ,对临床椎管内麻醉、腰椎管手术和椎管造影有重要参考意义。

定期无偿献血对献血者血清铁和铁蛋白的影响

目的研究献血对血清铁含量的影响。方法收集76例无偿献血人员为献血组,83例健康人员(非献血人员)为对照组,采集空腹静脉血,进行血常规、血清铁和铁蛋白检查。结果献血组血清铁、红细胞和红细胞压积均在正常范围,血清铁蛋白和血红蛋白除1例外也在正常范围。献血组男性血清铁蛋白为(116.52±67.16)ng/mL,对照组男性为(186.39±103.15)ng/mL,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);献血组女性血清铁蛋白为(66.2±47.62)ng/mL,对照组女性为(101.1±73.89)ng/mL,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。献血组血清铁与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论献血组血清铁蛋白降低,但是并没有造成贫血。因此,献血可以减少体内的铁贮存量。

肝脏局灶性结节增生的MRI与病理对照性分析

目的:研究肝脏局灶性结节增生(FNH)的MRI表现和病理学表现及其它们的相关性。方法:回顾性分析9例经手术病理证实的FNH的MRI表现及其病理学表现。结果:FNH平扫T1WI 5例为等信号,4例为稍低信号;T2WI 3例为等信号,6例为稍高信号。7例病灶中心或偏心有瘢痕。动态增强扫描9例病灶在动脉期均呈明显均匀强化;门脉期和延迟期为轻度增强或等信号;7例病灶在延迟期出现瘢痕强化。FNH是多血供实质性肿块,肿瘤内部结构均匀,出血和坏死少见,镜下可见典型的星状瘢痕。结论:MRI平扫和动态增强扫描能够显示FNH的特征性表现,反映FNH的病理特点,提高FNH的确诊率。

应用SOEing方法构建SOD1-G93A的真核表达载体

目的构建铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide dismutase,SOD1)-G93A的真核表达载体。方法应用重叠区扩增基因拼接法(SOEing)分别扩增前段M1基因与包含突变位点的后段M2基因,然后将2段基因拼接起来,得到SOD1-G93A基因,并克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体上。结果成功扩增出SOD1-G93A基因,测序结果与GenBank完全一致;对重组质粒SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)进行双酶切鉴定,测序结果与预期完全一致。结论成功构建了SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)真核表达载体。

颅内转移性肿瘤的MRI分析和临床表现

目的:回顾性分析颅内转移性肿瘤的MRI表现及临床表现,提高对颅内转移性肿瘤的早期诊断率。方法:分析我院1993年2月至2003年2月间收治的140例颅内转移性肿瘤的临床表现及其MRI影像表现。结果:①肺癌最常发生颅内转移(本组占54.3%);②脑转移瘤常常以神经系统症状为首发(本组为58.6%);③脑转移瘤MRI表现:以多发病灶转移为主(84.3%),转移部位多位于幕上(82.1%),转移灶常见水肿带(87.9%)和占位效应(57.1%),T1WI以低信号为主(79.3%),T2WI以高信号为主(81.4%),增强扫描可见病灶均出现强化效应。结论:癌症患者出现神经系统症状和以神经系统症状为首发的脑转移瘤均应及时行头部MRI检查,MRI检查对于早期诊断颅内转移性肿瘤具有重要的价值。

稳定转染hSOD1-G93A基因的肌萎缩侧索硬化细胞模型的建立

目的建立稳定转染h SOD1-G93A真核表达载体肌萎缩侧索硬化细胞模型。方法进行NSC-34细胞的培养,利用脂质体方法把已经构建好的pc DNA3.1(-)、h SOD1-WT-pc DNA3.1(-)和h SOD1-G93A-pc DNA3.1(-)质粒转染至NSC-34细胞系中,再通过G418筛选建立稳定表达h SOD1基因的NSC-34细胞系;以RT-PCR法鉴定转染后h SOD1在NSC34细胞系中的表达。结果转染h SOD1-G93A-pc DNA3.1(-)质粒的细胞与正常NSC-34细胞相比,胞体变圆,突起减少,且轴突变短。而转染pc DNA3.1(-)和h SOD1-WT-pc DNA3.1(-)质粒的细胞较正常NSC-34细胞无明显变化。RT-PCR法鉴定结果显示,转染h SOD1-WT-pc DNA3.1(-)和h SOD1-G93A-pc DNA3.1(-)质粒的细胞中h SOD1基因表达为阳性,而正常NSC-34细胞和转染pc DNA3.1(-)质粒的对照组为阴性。结论成功获得可稳定表达h SOD1-G93A基因的肌萎缩侧索硬化细胞模型。

膝关节半月板损伤的多排螺旋CT诊断

目的：探讨膝关节充气造影多排螺旋CT扫描对诊断膝关节半月板撕裂的诊断价值。方法：每个关节腔内注入20-50ml空气后作CT扫描，将扫描所得数据输入工作站进行多平面图像重建（MPR）、最大密度投影（MIP）及容积再现技术（VRT），观察半月板撕裂，将CT诊断结果与术中所见比较。结果：30例中有26例为半月板撕裂，有21例经膝关节镜手术证实。结论：该方法可以较清晰地显示膝关节半月板撕裂，为外科治疗方案提供了重要的参考信息。

SOD1-G93A转基因小鼠的鉴定方法比较

目的建立一种简便、节省和准确的肌萎缩侧索硬化(ALS)hSOD1-G93A转基因小鼠DNA提取及基因鉴定方法。方法以B6SJL-BTg(SOD1-G93A)1Gur/J半合子雄鼠与B6SJLF1雌鼠交配产仔,剪尾尖约1mm,提取组织DNA,PCR扩增hSOD1基因片断,电泳后观察结果并对PCR产物进行纯化、测序及BLAST验证。同时留取鼠尾血50～100μl,提取血DNA并PCR扩增作为对照,比较两者之间的符合率。结果hSOD1-G93A阳性鼠约占54%,基本符合孟德尔遗传规律。鼠尾组织及血DNA鉴定结果符合率为100%。结论鼠尾尖组织DNA提取及鉴定是一种简便易行、节省经费并且准确可靠的方法。

G93A突变的hSOD1基因对Nrf2/ARE信号通路的影响

目的:探讨G93A突变的hSOD1(human Cu/Zn superoxide dismutase)基因在肌萎缩侧索硬化转基因细胞模型NSC-34细胞中对Nrf2/ARE信号通路的影响。方法:将构建好的质粒hSOD1-pcDNA3.1(-)、hSOD1-G93A-pcDNA3.1(-)和pcDNA3.1(-)转染至肌萎缩侧索硬化转基因细胞模型NSC-34细胞内,根据转染质粒的不同分为4组:正常组、空转组、野生组和突变组。通过检测细胞内脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量来判断细胞氧化损伤的程度;检测线粒体膜通透性;通过Western blotting检测细胞中Nrf2、抗氧化酶的蛋白表达水平,以反映Nrf2/ARE信号通路在各组的活化程度。结果:转染hSOD1-G93A-pcDNA3.1(-)的NSC-34细胞(突变组)内氧化应激水平增高,同时线粒体通透性增加,提示线粒体受损伤;且Nrf2以及Nrf2/ARE信号通路下游效应分子血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和NAD(P)H醌氧化还原酶-1[NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]的蛋白表达水平均降低(P<0.05)。突变组细胞胞浆中Nrf2表达明显减少(P<0.05),而突变组和野生组细胞核中Nrf2增多,突变组细胞更为显著(P<0.05)。结论:hSOD1基因的G93A突变使细胞Nrf2/ARE信号通路受损,降低了细胞的抗氧化能力,加重了线粒体损伤。

定期无偿献血对献血者血脂的影响

目的探讨定期无偿献血对献血者血脂的影响。方法选择65例定期无偿献血者(献血组)、48例非献血的健康者(对照组),分别检测两组血常规[RBC、血红蛋白(Hb)、红细胞压积(HCT)]、血脂(TC、TG、HDL-C、LDL-C),并比较其TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C。结果献血组RBC、HCT均高于正常范围低限,仅1例女性Hb低于正常范围。两组TC、TG、HDL-C、LDL-C、TC/HDL-C和LDL-C/HDL-C比较均无统计学差异(P均>0.05)。结论定期无偿献血对献血者血脂无影响。

特发性腕管综合征的MRI、临床表现及电生理检测的相关性研究

目的探讨MRI、临床表现及电生理检测对特发性腕管综合征病情程度的诊断价值。方法对30名特发性腕管综合征患者进行临床、电生理检测及腕部磁共振成像,所得参数之间进行相关性检验。结果除豌豆骨水平正中神经面积外,其它MRI参数、临床表现、电生理检测参数之间无相关性。豌豆骨水平正中神经面积与两点辨别觉呈正相关(P<0.01),与感觉潜伏时呈正相关(P<0.05),与感觉传导速度(sensoryconduction velocity,SCV)呈负相关(P<0.05)。结论经腕MRI测量的豌豆骨水平正中神经面积,是评估病情程度的一个敏感指标。

Nrf2-ARE信号通路与肌萎缩侧索硬化的研究进展

目前全世界肌萎缩侧索硬化(ALS)发病率约为(4～6)/100 000,临床主要表现为缓慢起病、进行性发展的肌肉无力、肌萎缩、肌束震颤、腱反射亢进和病理征阳性。患者一般多于发病3～5年后因呼吸肌麻痹、呼吸衰竭而死亡,只有10%的患者生存期超过10年〔1〕,目前暂无特效治疗办法〔2,3〕。根据其发病形式,可分为散发性ALS(sALS)和家族性ALS(fALS)。

两次发作均表现为极后区综合征的视神经脊髓炎谱系疾病1例

视神经脊髓炎谱系疾病(neuromyelitisoptica spectrum disorder,NMOSD)是一种自身免疫介导的中枢神经系统脱髓鞘疾病,主要累及视神经、脊髓和延髓,也可累及丘脑和大脑皮质。流行病学资料显示,NMOSD在亚洲人群发病率明显高于白种人,女性患病率为男性的10倍,患者年龄多在35岁以上,病因主要与水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP-4)抗体介导的自身免疫损害相关,临床表现为视神经炎、横贯性脊髓炎和延髓极后区综合征,少见表现为急性脑干综合征、间脑综合征和大脑皮质综合征。以延髓极后区综合征起病的NMOSD临床上较少见,主要表现为顽固性呃逆、呕吐,因此常易与消化系统疾病相混淆,现将我院收住的一例两次发病均以顽固性呃逆为主要症状的NMOSD报道如下。

血色素沉着症基因多态性与缺血性脑卒中的关系

研究[1]表明,过量的铁能增加缺血性脑卒中的发病风险.血色素沉着症基因（HFE）是遗传性血色素沉着症的候选基因,其突变可导致机体铁蓄积[2];而其C282Y和H63D突变能明显增加体内铁含量.本研究分析脑梗死患者HFE C282Y和H63D的多态性与缺血性脑卒中的关系,现报告如下.

MiR-34对神经生长因子诱导的PC-12细胞神经突生长的调控作用

目的探究微RNA(microRNA)miR-34在神经生长因子诱导的大鼠肾上腺嗜锯细胞PC-12细胞分化过程中的表达水平的变化,揭示miR-34在对PC-12细胞神经突生长的调控作用。方法建立神经生长因子诱导的PC-12细胞体外神经突生长模型,利用实时荧光定量PCR方法检测PC-12细胞分化前后miR-34的表达水平;转染miR-34抑制剂(miR-34 inhibitor)下调miR-34表达,转染72h后记录PC-12细胞分化情况,用image J软件统计神经突长度,分析敲低miR-34表达对PC-12神经突生长的影响。结果神经生长因子可以刺激大鼠PC-12细胞分化成为神经元样细胞,并长出神经突;miR-34a在分化的PC-12细胞中表达水平上调;转染miR-34 inhibitor明显抑制了PC-12细胞神经突的生长,统计结果显示干扰组细胞长出较长神经突的比例以及神经突平均长度均明显下降。结论MiR-34在NGF诱导的PC-12细胞中表达水平上调,并调控细胞神经突生长。

以癫痫首发的线粒体脑肌病伴高乳酸血症和卒中样发作(MELAS) 1例报道

线粒体脑肌病伴高乳酸血症和卒中样发作(mitochondrial encephalomyopathy with lactic acidemia and stroke-like episodes, MELAS)是一种以脑和肌肉系统受累为突出特征的线粒体结构和功能异常导致的遗传性疾病。MELAS患者多表现为母系遗传,在任何年龄均可发病,其中发病高峰年龄在10~30岁。约80%的MELAS患者由线粒体DNA (mitochondrial DNA, mtDNA) 3243A>G突变引起,其次是mtDNA 13513G>A突变,其他mtDNA或核DNA (nucleus DNA, nDNA)突变所致相对少见。其临床表现复杂多样,发病年龄越早,临床症状越多,预后越差,因此加强对该疾病的认识,做到早诊断,早治疗意义重大。对于考虑MELAS的患者应详细询问病史、家族史,结合血浆乳酸值、影像学、肌电图、脑电图、肌肉活检提高对本病的诊断,最终通过基因检测确诊。

肌萎缩侧索硬化中抗氧化应激通路的研究进展

肌萎缩侧索硬化(Amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种慢性进展的致死性神经系统退行性疾病,上下运动神经元均可受累,常以肌无力和肌肉萎缩为最初起病形式,逐渐进展为延髓麻痹及锥体束受累表现,多于起病3-5年内因呼吸肌受累出现呼吸困难、夜间睡眠呼吸暂停,最终出现呼吸衰竭死亡。按其起病方式,可分为散发性ALS(SALS)和家族性ALS(FALS)两种,其中5%~10%的ALS具有家族遗传史,目前证实的与ALS相关的基因仍十分有限。