去甲斑蝥素对多发性骨髓瘤细胞周期和血管内皮细胞生长因子的影响

目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)抗骨髓瘤效应的机制。方法利用流式细胞术检测不同浓度NCTD作用24 h后细胞周期的改变,Western blot检测CDK1、cyclin A和cyclin B1的改变,免疫组化和RT-PCR测定血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达。结果经NCTD处理24 h后,随着NCTD浓度增加,G2/M期细胞明显增加,S期细胞明显减少,呈剂量依赖性;NCTD以剂量依赖的方式抑制cyclin B1、CDK1和cyclin A的表达;NCTD以剂量依赖的方式抑制VEGF mRNA和蛋白的表达。结论 NCTD对U266细胞有抗增殖和促凋亡作用,其作用机制可能与调节细胞周期和抑制VEGF的表达有关。

去甲斑蝥素对人多发性骨髓瘤细胞株U266生长调控的影响及其机制的研究

目的研究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对多发性骨髓瘤细胞株的增殖及其凋亡的影响及其可能的机制。方法四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethyl-2 thiahiazoyi)-3,5-di-phenyl-tetrazolium bromide,MTT]检测5、20、40、80、160μmol/L的NCTD对U266细胞增殖的影响;用流式细胞术检测不同浓度NCTD对细胞周期及细胞凋亡的影响,并应用半定量反转录聚合酶链反应检测survivin基因表达的变化。结果在20～160μmol/L的浓度内,NCTD对U266细胞的增殖有抑制,抑制与NCTD的浓度呈剂量依赖关系(P<0.05)。不同浓度的NCTD能诱导多发性骨髓瘤细胞株U266凋亡,使细胞明显阻滞于G_2/M期;在NCTD作用下,U266细胞survivin及其机制可能与诱导凋亡、细胞周期阻滞有关。结论 NCTD能抑制U266细胞的增殖,并诱导其凋亡的机制可能与抑制survivin的表达及G_2/M期阻滞有关。

以膝关节滑膜炎为首发症状的免疫球蛋白D型多发性骨髓瘤一例

患者女，67岁。因右膝关节肿痛6个月人院。6个月前患者无明显诱因出现右膝关节憋胀、疼痛，进行性加重。无手指、腕、踝等其他关节肿痛，体温正常。

去甲斑蝥素抗骨髓瘤作用及其机制研究

目的探讨去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)抗骨髓瘤作用及其相关机制。方法 MTT法检测NCTD对人骨髓瘤细胞株RPMI 8226增殖的抑制作用,并观察其对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测核因子-κB(NF-κB)p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、NF-κB抑制因子IkBα、磷酸化IkBα(p-IkBα)、IkB激酶α(IKKα)以及Survivin、Bcl-2、Bax蛋白表达水平,分光光度法检测Caspase-3活性,RT-PCR检测NF-κB mRNA表达。结果 NCTD抑制RPMI 8226细胞增殖,促进其凋亡;其剂量为20、40 mg/kg时对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为29.8%、53.5%。NCTD抑制胞核NF-κB p65、p-NF-κB p65以及胞浆p-IkBα、IKKα的表达,增加胞浆IkBα的表达,对胞浆NF-κB p65的表达无显著影响。NCTD还抑制Survivin、Bcl-2蛋白的表达,促进Bax的表达和RPMI 8226细胞Caspase-3的活化,Caspase-3抑制剂能部分拮抗NCTD引起的RPMI 8226细胞凋亡(P<0.05)。结论 NCTD对RPMI 8226细胞有抗增殖和促凋亡作用,其机制可能与NF-κB信号通路有关。

去甲斑蝥素通过NF—κB／IκBα途径增强阿霉素的抗骨髓瘤效应

目的研究去甲斑蝥素（NCTD）联合阿霉素（ADR）对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法以U266细胞为研究对象，采用NCTD（10μmol／L）和ADR（0．25μmol／L）单独或联合处理细胞，MTT法观察细胞增殖活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot法检测核因子-κBP65（NF—κBP65）、磷酸化NF—κBP65（p-NF—κBP65）、NF—κB抑制因子IκBα、磷酸化IκBα（p-IκBα）、survivin、Bcl-2和Bax蛋白水平，免疫组化法测定血管内皮细胞生长因子（VEGF）水平。结果①NCTD能增强ADR的细胞毒和诱导凋亡作用，二者具有协同作用；②与ADR单药组比较，联合用药组胞核NF—κBP65和胞质P—IκBα的表达量分别由2．08±0．29和0．39±0．07降至0．48±0．08和0．02±0．01，胞质NF—κBP65和IκBα表达无变化；③联合用药组与ADR单药比较，survivin和Bcl-2的表达水平分别由0．31±0．05和0．23±0．05降至0．03±0．02和0．05±0．02，而Bax的表达由0．46±0．06升至0．62±0．08；④ADR组和联合用药组VEGF的阳性率分别为（44．6±4．4）％和（27．0±2．1）％，NCTD增强ADR对VEGF表达的抑制作用。结论NCTD通过抑制NF—κB／IκBα途径，调节下游信号分子survivin、Bel-2、Bax和VEGF的表达，增强ADR的抗骨髓瘤效应。