益生菌联合海藻多糖对草莓生长与品质的影响

为开发针对草莓提质增效的新型生物肥料,试验以本课题组筛选的优良菌株(乳酸菌)和海藻多糖为材料,选取天仙醉和越秀两个草莓品种,探究单一和联合施用处理对两品种草莓植株生长、叶片生理指标、单果重及果实品质的影响。结果表明,不同施肥处理均能促进草莓植株生长,降低叶片丙二醛含量,提高叶绿素含量。其中,海藻多糖发酵液对天仙醉的单果增重效果最佳,而益生菌发酵液复配海藻多糖对越秀的单果增重效果最佳,分别较对照提高57.2%和40.3%。不同施肥处理还可显著改善草莓果实品质:对天仙醉而言,海藻多糖发酵液处理可溶性蛋白含量提高幅度最大,较对照提高88.4%;糖酸比则以益生菌发酵液复配海藻多糖处理最高,较对照提高27.6%;益生菌发酵液与海藻多糖复配显著增加果实中VC、总酚和总黄酮含量,较对照分别提高21.57%、15.02%和23.70%。对越秀而言,益生菌发酵液复配海藻多糖处理的糖酸比增幅最大,达71.9%;各施肥处理对其可溶性蛋白及活性成分含量的影响相对较小。对种植天仙醉土壤的微生物多样性分析表明,含益生菌的3种处理可显著提高其α多样性指数,改善土壤微生物多样性。综上,益生菌菌剂联合海藻多糖可协同促进草莓植株生长、改善果实品质,但不同品种间有所差异,其中天仙醉对各施肥处理的响应更为敏感,其作用机制可能与土壤微生物多样性的改善相关。本研究可为后期研发适合不同品种草莓的新型生物肥料提供依据和参考。

乳酸菌与酵母菌共发酵芦笋汁工艺优化及其风味成分分析

为了开发功能型芦笋益生菌饮品,该研究筛选了适合芦笋汁发酵的菌种及其组合,分析了单菌和双菌发酵芦笋汁的特性;优化了双菌共发酵芦笋汁的工艺,并对比分析了双菌共发酵前后的风味差异。结果表明,嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)KDB-03与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)GDMCC 2.37为最佳发酵菌种组合;与未发酵芦笋汁相比,双菌共发酵可显著提高乳酸菌菌落数、总酚含量、DPPH自由基清除能力和铁离子还原/抗氧化能力值,增幅分别为11%、18%、40%、130%,显著降低总黄酮含量,降幅为27%;在接种量3.8%、乳酸菌与酵母菌接种比例1∶2、温度34.5℃的优化发酵条件下,芦笋发酵液的抗氧化活性最强。双菌共发酵还能显著降低醛类物质、增加醇类物质的含量,赋予了芦笋汁特有的发酵香味。综上,该研究筛选出的乳酸菌、酵母菌及其组合在芦笋汁发酵上具有潜在的应用价值,可用于开发新型芦笋汁发酵饮品。

NFYA在肝细胞癌中的表达、预后及免疫特征的综合分析

目的:基于公共数据库、体外细胞系和肿瘤组织分析核转录因子Y亚基A(nuclear transcription factor Y subunit A, NFYA)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中的表达和临床意义。方法:TCGA数据库获取HCC患者临床数据和转录组数据并进行分析,qRT-PCR和免疫组化染色法验证NFYA在HCC细胞系和患者组织中的表达。单因素和多因素Cox回归分析、Kaplan-Meier分析、GO和KEGG分析等方法分析NFYA表达水平与HCC患者临床病理特征、预后、潜在致病机制以及免疫细胞浸润等的相关性。结果:公共数据库分析显示NFYA mRNA在HCC组织中较正常肝组织表达显著增高,并且该现象在HCC细胞系中得到了验证;在研究者队列HCC组织中,NFYA蛋白表达量也显著高表达。NFYA mRNA表达水平与HCC患者组织学分级、T分期、病理学分期正相关;NFYA高表达的HCC患者预后更为不良;HCC中与NFYA相关的基因主要富集于核裂解、细胞周期等生物过程;肿瘤微环境分析提示NFYA高表达与较低的免疫细胞浸润及基质细胞浸润相关,且NFYA表达与多种免疫检查点基因表达呈正相关。结论:HCC患者高表达NFYA与预后不良相关,可作为HCC患者潜在的预后标志物,且可能通过影响细胞周期和免疫细胞浸润调控HCC发生发展。

酶菌协同处理对微拟球藻营养功能成分及生物活性的影响

为提高微拟球藻开发利用价值,本文开展了酶菌协同处理对微拟球藻营养功能成分及生物活性影响的研究。采用木瓜蛋白酶酶解微拟球藻,利用单因素和响应面试验获得其最佳酶解工艺,随后通过益生菌发酵酶解基质,研究发酵前后总酚、多肽和黄酮含量以及体外抗氧化和降血脂活性的变化,并对发酵后的微拟球藻酶液进行感官评价。结果表明:微拟球藻的最佳酶解工艺为:酶量5.0%、pH8.0、酶解时间4.0 h、酶解温度76℃;在此条件下酶解后发酵可有效提高产物中多肽的含量,其中混菌发酵组提高了近1.3倍,总酚含量提高了5.1%,同时总黄酮的含量降低了32.5%;酶菌协同处理显著增强了其抗氧化和胰脂肪酶抑制活性,其中混菌发酵组DPPH自由基清除率提高了1.2倍,胰脂肪酶清除率提高了59.4%。此外,发酵后感官评分显著提升。可见,酶菌协同发酵可显著提高微拟球藻多肽含量、抗氧化活性、降血脂活性及感官特性,为开发功能型发酵产品提供了参考和技术支持。

乳酸菌发酵对螺旋藻主要功效成分影响的初步研究

为研究乳酸菌发酵对螺旋藻功效成分的影响,本研究选用植物乳杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和凝结芽孢杆菌分别对螺旋藻进行发酵处理(发酵条件为37℃,72 h),分析了四种乳酸菌发酵处理后的螺旋藻发酵上清液和发酵固形物醇提液的主要功效成分的含量变化,并对其进行了抗氧化活性测定。研究表明,利用各菌种进行螺旋藻发酵后的上清液中总酚含量显著增加(P<0.05),其中植物乳杆菌处理增幅最高可达39.8%;干酪乳杆菌处理上清液中总黄酮含量显著增加(P<0.05),增幅为41.3%;不同菌种发酵固形物醇提液中总酚、藻蓝素和类胡萝卜素含量显著下降(P<0.05),其中总酚下降幅度为22.5%~30.1%,藻蓝素为97.5%~99.5%,类胡萝卜素为86.9%~94.5%,然而发酵上清液对DPPH·的清除能力提高了5.6%~6.5%,发酵固形物醇提液对DPPH·的清除能力提高了7.4%~8.3%,表明发酵过程中可能产生了新的抗氧化成分。此外,不同菌种之间发酵上清液和固形物的主要活性成分和抗氧化活性均具有明显差异,表明乳酸菌菌种对于螺旋藻发酵代谢产物具有重要影响。

不同处理方法对马棘种子发芽的影响

采用不同温度、不同强度碱溶液和浓硫酸不同浸泡时间处理马棘种子。试验表明,不同处理方法对马棘种子发芽效果有显著影响,60～80℃的温度处理可显著提高马棘种子的发芽势、发芽指数和活力指数,超过一定温度(90℃)则远远不如对照(20℃);碱溶液处理以pH 9处理效果最好,但碱溶液处理效果并不显著;浓硫酸处理以浸泡20 min效果最好,其发芽率、发芽势、发芽指数、简化活力指数和活力指数均为各处理最高值。通过种子生活力和种子硬实率的测定,认为硬实是造成马棘种子发芽率低的主要原因。

芹菜功能性成分及生物活性研究进展

近年来,人们对健康的意识增强,功能性产品的消费也日益增长。芹菜作为一种药食两用的原料,具有降压、抗动脉硬化等功效。芹菜的功效价值有待于进一步开发。基于前人的研究结果,对芹菜的营养价值、目前研究的功能性成分和相关生物活性进行综述,并汇总目前以芹菜为原料制成的产品,总体来看,芹菜是一种具有开发价值和应用潜力的原材料。本研究旨在为芹菜相关产品的进一步深加工和系列高附加值产品的开发提供借鉴和参考。

隐甲藻藻渣醇水提取物的抗氧化活性研究

本研究采用总抗氧化能力、DPPH自由基清除能力、亚铁离子螯合能力及总还原力等抗氧化指标评价隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)藻渣醇水提取物不同极性萃取物的抗氧化能力,采用分光光度法测定样品中总酚和总黄酮含量。结果表明隐甲藻渣不同极性萃取物均具有一定的抗氧化能力,其中乙酸乙酯相和石油醚相总抗氧化能力和亚铁离子螯合能力较高,水相和正丁醇相的DPPH自由基清除能力和总还原能力较高,且在一定质量浓度范围内存在量效关系。相关性分析结果显示,不同极性萃取物的总多酚含量与DPPH自由基清除能力和总还原能力显著正相关,而总黄酮仅与总抗氧化能力和金属离子螯合能力呈正相关关系,提示除酚类和黄酮类化合物外,可能还含有其他抗氧化成分。本研究表明隐甲藻藻渣具有较好地抗氧化活性,有待合理开发利用,其可能存在的其他抗氧化活性成分也有待于进一步明确。

鲍芹根际乳酸菌的筛选及耐受性和抗氧化能力评价

为筛选既有优良果蔬发酵特性又有利于人体肠道微生态平衡的功能性果蔬发酵专用益生菌,本研究以新鲜鲍芹根为试材,结合传统方法和分子生物学方法对其根际分离得到的乳酸菌进行鉴定,对筛选出产酸能力强、生长旺盛的菌株进行耐受性和抗氧化能力评价。经鉴定,分离得到的两株乳酸菌分别为植物乳杆菌(产酸能力强、生长旺盛)和戊糖片球菌。对植物乳杆菌进行人工模拟耐受性评价发现,该菌在pH值为2.5、3.5、4.5的人工胃液中处理3 h后菌量仍保持在10^6 CFU/mL以上;人工肠液培养2、3 h的存活率分别为155.9%、191.9%,4 h后菌种数量开始下降,存活率仍为35.7%;随盐浓度增加,该菌的存活率下降,但7.5 mg/mL的胆盐溶液和70 mg/mL钠盐溶液中菌量仍能维持在10^6 CFU/mL以上。抗氧化能力试验表明,该菌发酵上清液的DPPH自由基清除率可达91.8%,固形物醇提液的亚铁离子螯合能力比发酵上清液的高出13.7个百分点。综上,植物乳杆菌具有较好的耐受性和抗氧化能力,后期可用于益生菌相关产品的研发。

海藻肥在现代农业生产中的研究进展

海藻是海洋中储量最大且可再生的生物质资源,海藻肥则是与海藻相关的重要产品类型。为充分认知海藻肥在现代农业中发挥的作用以及发展前景,本文就其主要原料、功能成分、生产工艺以及近年来海藻肥的常见产品类型和在农业生产中的应用现状进行综述,分析探讨海藻肥发挥作用的机理机制、当前的应用瓶颈和开发前景,以期为进一步研发和推广新型高效海藻肥提供参考。

操作模式和光生物反应器类型对湛江等鞭金藻生长和油脂积累的影响

对分批和半连续模式下柱式和平板式光生物反应器中湛江等鞭金藻的生长和油脂积累特征进行了评估。分批培养时平板式反应器可获得更高生物质质量浓度(2.06 g/L)、生物质产率[228.89 mg/(L·d)]和油脂产率[83.34 mg/(L·d)],且操作简单,易于放大,适于工业化培养。平板式反应器半连续培养虽然稳定期生物质质量浓度低于批次培养,但可获得更高生物质产率[342.83 mg/(L·d)]。气相分析结果表明,湛江等鞭金藻含有大量多不饱和脂肪酸。结果表明,平板式反应器中批次培养有利于湛江等鞭金藻油脂积累,半连续培养有利于生物质积累,可为工业化生产提供借鉴。

复合益生菌对泌乳期德州驴生产性能及驴驹生长性能的影响

本试验选取产期和胎次相近的10头母驴及其驴驹并随机分为两组,试验组日粮中添加30g/(头·d)复合益生菌,旨在探究复合益生菌对德州驴产奶量、产奶品质及驴驹生长性能的影响。结果显示,与对照组相比,复合益生菌在试验后期提高了母驴产奶量,延缓了产奶量下降趋势,同时一定程度上提高了驴奶乳脂率、真蛋白含量、总干物质含量。复合益生菌可显著提高驴驹体重(P<0.05),降低驴驹腹泻率。本研究为提高泌乳期母驴生产性能和驴驹生长性能提供了新思路,为益生菌在驴养殖业中的应用奠定了基础。

天台乌药不同生长年份块根中波尔定碱的分离与含量测定

目的:测定不同年份和地点的天台乌药块根中所含波尔定碱含量。方法:应用高效液相色谱法测定,色谱柱:XBridge C18(4.6mm×250mm,5μm)键合相填充柱;流动相:A相为乙腈,B相为1.5‰三乙胺(用甲醇调节pH至2.5),梯度洗脱,0～20min,10%～20%A,90%～80%B。柱温25℃;流速1mL·min-1,检测波长289nm。结果:波尔定碱含量以三州乡6年生为最高,达0.17%;5年生天台乌药块根波尔定碱含量高低次序为三州乡(0.16%)>田芯乡(0.14%)>永溪乡(0.10%)>桐柏乡(0.06%)。结论:块根中波尔定碱的含量均与植物的生长发育年龄以及土壤条件有关。

集胞藻Synechocystis sp. PCC 6803 slr1501的克隆及原核表达分析

组蛋白乙酰基转移酶上调表达与抗逆性有一定相关性。集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803 Slr1501是一个未知蛋白,预测其属于组蛋白乙酰基转移酶GNAT家族N-乙酰基转移酶。为了进一步明确slr1501基因功能,本研究从集胞藻6803中克隆slr1501基因,成功构建了pET-28a(+)-slr1501原核表达载体,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行分析。经1 mmol/L IPTG诱导2 h后Slr1501蛋白成功表达,表达量随诱导时间的延长而增加,且主要以包涵体形式表达。Western blot检测结果显示Slr1501重组蛋白特异性表达。本试验结果为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

浙江省实施清洁发展机制造林再造林项目潜力分析

以浙江省省域为单位,针对实施清洁发展机制造林再造林(CDM-AR)项目的条件,通过对土地资源、林木生长率、生物多样性、造林成本、农民收入等有关评价指标的分析,表明浙江省实施CDM-AR项目具有明显的优势和巨大的潜力。

高产蛋白酶菌的筛选及其对螺旋藻发酵物活性的影响研究

为了更好地利用微生物发酵方法制备螺旋藻生物活性肽,从螺旋藻泥天然发酵液中筛选高产蛋白酶的菌株,并对其发酵产物进行了功能评价。形态观察和16S rRNA菌种鉴定结果显示,3株蛋白酶高产菌株分别为解淀粉芽孢杆菌、芽孢杆菌和短小芽胞杆菌。以3株菌及其混菌发酵螺旋藻,对所得发酵产物的3种活性成分(多肽、总黄酮和总酚)、4种抗氧化指标(DPPH自由基清除率、ABTS阳离子自由基清除率、铁离子还原力、总抗氧化能力)和血管紧张素I转移酶(angiotensin I converting enzyme,ACE)抑制活性进行了测定。结果表明单菌发酵和混菌发酵的产物中活性成分的含量及其抗氧化活性和ACE抑制活性均显著提高,以混菌发酵提高最为明显,效果最为优异,混菌发酵液中3种成分的含量分别提高305.2%、267.8%和164.2%;4种抗氧化活性指标分别提高611.5%、189.8%、354.4%、316.0%,ACE抑制活性提高102.6%。筛选获得的菌株在制备螺旋藻生物活性肽方面具有较好的应用价值和广阔的市场前景。

培养条件对湛江等鞭金藻生长和油脂产率的影响

为提高微藻油脂产率和优化培养条件,以湛江等鞭金藻(Isochrysis zhanjiangensis)为研究对象,探讨了营养方式、光强和NaNO_3浓度对微藻生长和产物积累的影响以及培养过程中氮消耗与微藻生长间的关系。结果表明,湛江等鞭金藻生长越快,对氮的吸收越多,兼养较光自养和光异养消耗更多的氮以满足生长需要。充足的氮源和兼养培养条件下,蛋白质积累较多;氮浓度和光强较低条件下,油脂积累较多。光强为100μmol/(m2·s)、NaNO_3质量浓度为75 mg/L、光异养条件下油脂含量最高为46%,生物量质量浓度为0. 46 g/L;光强为100μmol/(m2·s)、NaNO_3质量浓度为750 mg/L、兼养培养时生物量质量浓度最高为2. 20 g/L,油脂含量为32. 77%。综合考虑油脂产率和节约成本等因素,湛江等鞭金藻最高油脂产率80. 06 mg/(L·d),在光强为100μmol/(m2·s)、NaNO_3质量浓度为375 mg/L、兼养培养条件下获得,此时多不饱和脂肪酸占总脂肪酸含量也较高(30. 82%),因此是生产微藻油脂的合适条件。

驴源枯草芽孢杆菌分离鉴定及生物学特性

为分离驴源具有抑菌活性的优良芽孢杆菌,本试验通过分离培养和形态观察,从健康驴新鲜粪便样品中分离芽孢杆菌,采用牛津杯法初步筛选具抑菌活性目标菌株,并进行生理生化和分子鉴定,研究其产酶活性、抑菌活性、耐酸性和耐胆盐性能、药物敏感性。结果显示:筛选到两株对金黄色葡萄球菌有强抑制作用的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),编号分别为LV1和LV2。两菌株具有很强的耐酸、耐胆盐特性,能产淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶,并对检测用9种抗生素都敏感。结果表明,两株驴源枯草芽孢杆菌LV1和LV2具备良好的抑制金黄色葡萄球菌、产酶和耐酸、耐胆盐等益生活性,可作为研发驴用微生态制剂的潜在益生菌菌株。

不同灭菌方式对螺旋藻及其发酵后营养功效成分的影响

为明确不同灭菌方式对螺旋藻功效成分的影响,本研究采用高温蒸汽灭菌、超高压灭菌和紫外线灭菌三种方式对螺旋藻培养基进行灭菌处理,并结合乳酸菌发酵方法,比较分析不同灭菌方式处理下发酵前后上清液与固形物中总黄酮、总酚、藻蓝素等成分含量,并对其抗氧化活性进行测定。结果表明,发酵前,不同灭菌方式下各成分含量差异较大,部分达显著水平,其中,以高温蒸汽灭菌的上清液总黄酮和总酚含量最高,藻蓝素含量最低;固形物醇提液中总黄酮含量则以超高压灭菌最高,总酚和藻蓝素含量以紫外线灭菌的最高。经乳酸菌发酵后,总黄酮和藻蓝素含量整体呈下降趋势,最大降幅分别为60.0%、74.9%,总酚的变化与之相反,增幅最高为142.4%。从抗氧化活性来看,三种灭菌方式之间抗氧化活性具有一定差异;乳酸菌发酵提高了高温灭菌的上清液中总抗氧化能力、DPPH自由基清除能力,高压灭菌的还原力和亚铁离子螯合能力;而发酵后固形物醇提液的总抗氧化能力、还原力和亚铁离子螯合能力均显著升高,DPPH自由基清除能力略有下降。综合各因素,高温蒸汽灭菌可用于开发螺旋藻益生菌产品。

鲍芹低值部位乙醇提取物的抗氧化活性评价

为探索鲍芹低值部位高值化利用的途径及科学依据,本试验对外围叶柄和根中的物质进行提取,同时测定了该乙醇提取物中总酚和总黄酮含量与抗氧化指标总抗氧化能力、DPPH自由基清除能力、亚铁离子螯合能力、总还原力,并对各测定指标的相关性进行分析。结果表明:叶柄提取物中总酚含量为92.69 mg GAE/g,总黄酮含量为2.60 mg RE/g;根部提取物总酚含量为145.41 mg GAE/g,总黄酮含量为5.91 mg RE/g。在同等质量浓度条件孵育150 min后,鲍芹叶柄和根提取物中总抗氧化能力可达到BHT的65%以上;二者DPPH自由基清除能力可达到BHT的57.1%以上;二者亚铁离子螯合能力可达EDTA的74.3%～84.0%;二者的还原力较小,仅能达到BHT的7%～10%。相关性分析表明抗氧化活性与总酚和总黄酮含量极显著正相关。综合分析可知,鲍芹低值部位具有较好的抗氧化能力。