lncR FOXD2-AS1调控miR-145-5p对非小细胞肺癌细胞生物学特性的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncR)FOXD2-AS1调控微小RNA(miR)-145-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)等生物学特性的影响。方法 体外培养人NSCLC细胞系A549、H1299、SK-MES-1及人正常肺支气管上皮细胞系16HBE,应用RT-qPCR检测各细胞系中lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p表达。选取lncR-FOXD2-AS1相对高表达的SK-MES-1作为敲低实验的研究对象,将SK-MES-1细胞按照转染处理的不同分为NC组(转染si-NC)和si-FOXD2-AS1组(转染si-FOXD2-AS1),转染后,RT-qPCR检测细胞中lncR-FOXD2-AS1、miR-145-5p表达,CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western blotting法检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、Fibronectin蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p的相互关系。结果 与16HBE细胞相比,lncR-FOXD2-AS1在NSCLC细胞系中高表达(P<0.05),miR-145-5p在NSCLC细胞系中低表达(P均<0.05)。与NC组比较,si-FOXD2-AS1组细胞miR-145-5p表达升高(P<0.05),0、24、48 h时OD值降低(P均<0.05),迁移及侵袭穿膜细胞数减少(P均<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),N-cadherin、Fibronectin蛋白表达降低(P均<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-145-5p是lncR-FOXD2-AS1的靶基因。结论 lncR-FOXD2-AS1在NSCLC细胞系中表达升高,敲低lncR-FOXD2-AS1通过靶向调控miR-145-5p抑制NSCLC细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT进程。

雷公藤甲素通过丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶/糖原合成酶激酶-3β通路对MGC803细胞增殖、侵袭与迁移的影响

目的 探讨雷公藤甲素通过丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶/糖原合成酶激酶-3β(AKT/GSK-3β)通路对MGC803细胞增殖、侵袭与迁移的影响。方法 体外培养MGC803细胞,确定雷公藤甲素的干预剂量和干预时间。将细胞分为阴性对照组(A组,不进行处理),阳性对照组(B组,10μmol/L顺铂),雷公藤甲素高、中、低剂量组(C组、D组、E组)。干预48 h,采用Transwell法检测细胞侵袭能力,采用划痕试验法检测迁移能力,采用免疫印迹(Western blot)法检测检测相关蛋白的表达。结果 随着雷公藤甲素浓度的增加,MGC803细胞增殖率降低(P <0.05);48 h时半数抑制浓度(IC50)最小,选择干预时间为48 h,C组、D组、E组的干预剂量分别为80,40,20 nmol/L。与B组比较,C组、D组、E组侵袭细胞数、细胞迁移距离及波形蛋白(vimentin),snail,p-AKT/AKT,p-GSK-3β/GSK-3β表达水平均显著升高(P <0.05),上皮钙黏素(E-cadherin)、β-联蛋白(β-catenin)表达水平均显著降低(P <0.05),且呈剂量依赖关系。结论 雷公藤甲素可通过抑制AKT/GSK-3β信号通路而抑制MGC803细胞增殖、侵袭与迁移。

免疫疗法联合靶向治疗对转移性结直肠癌的疗效及安全性研究

目的:评估卡瑞利珠单抗联合抗血管生成药物治疗转移性MSS结直肠癌的疗效与安全性。方法:收集2021年6月到2022年6月期间在唐山市人民医院放化科接受卡瑞利珠单抗联合抗血管生成药物(呋喹替尼/瑞戈非尼)或单药抗血管生成药物(呋喹替尼/瑞戈非尼)三线治疗的转移性MSS结直肠患者40例(联合组、单药组各20例)。评价两组的总生存期(OS)、疾病控制率(DCR)和客观缓解率(ORR),同时统计两组的不良事件发生率。结果:与单药组相比,联合组患者临床一般资料差异无统计学意义。联合组和单药组的中位OS分别为11个月和7.5个月,DCR分别为85%和60%,ORR分别为30%和10%。联合组和单药组的不良事件发生率分别在95%和90%,不良事件多为1~2级,严重不良事件(≥3级)的发生率分别为15%和10%,无4级不良反应。联合组毛细血管发生率高于单药组。结论:联合组可改善患者的OS获益,但是与单药组差异无统计学意义。免疫疗法联合抗血管生成类药物治疗是一种有前景的策略,两者联合可改善患者的生存获益,在晚期转移性结直肠癌的治疗中显现出更好的抗肿瘤活性,且安全性较高,为发展针对CRC的免疫靶向治疗提供了重要的依据。

藤黄酸通过抑制JAK-STAT通路对食管癌细胞KYSE450增殖和凋亡的影响

目的探讨藤黄酸对食管癌细胞KYSE450的增殖和凋亡以及对Janus激酶(Janus kinase,JAK)-信号转导与转录激活子(signal transducer and activator of transcription,STAT)信号通路的影响。方法常规培养食管鳞癌细胞KYSE450,分别加入0、0.5、1.0和2.0μmol/L浓度的藤黄酸处理24、48和72 h后,采用CCK-8实验检测细胞的存活率;观察药物处理细胞的状态和集落形成能力;transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力;流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western blot实验检测细胞中JAK-STAT通路的相关蛋白[JAK2、STAT3、磷酸化的Janus激酶2(phosphorylated Janus kinase 2,P-JAK2)和P-STAT3]和凋亡相关蛋白(Bcl2、Bax、Cleaved PARP1、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9)的表达情况。结果经过0、0.5、1.0和2.0μmol/L浓度的藤黄酸分别处理24、48和72 h后,食管癌KYSE450细胞增殖均被抑制,并呈时间和浓度依赖性(均P<0.05)。经0、0.5和1.0μmol/L藤黄酸处理24 h的食管癌细胞KYSE450的侵袭和迁移的能力减弱(均P<0.05)。0.5和1.0μmol/L的藤黄酸处理24 h的KYSE450细胞凋亡比例均增加(均P<0.05)。Western blot结果显示,0.5和1.0μmol/L藤黄酸处理48 h后,KYSE450细胞中Bax、Cleaved PARP 1、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9蛋白表达量均增加,Bcl2、P-JAK2和P-STAT3蛋白表达量均降低(均P<0.05)。结论藤黄酸可以抑制食管癌细胞的增殖,并且通过JAK-STAT信号通路诱导食管癌细胞凋亡。