他汀与二膦酸盐对去卵巢大鼠股骨作用的比较

目的 采用去卵巢大鼠模型 ,观察服用他汀药 (simvastatin ,舒降之 )与二膦酸盐药物(etidronate ,邦德林 )对股骨下端骨量影响 ,进一步探讨他汀药物的治疗骨质疏松的疗效机制。方法 切除卵巢大鼠在术后 1个月开始分别给予辛伐他汀与二膦酸盐及对照激素替代治疗 ,同时设假手术对照与去势对照组。各组均在服药 10 0d后处死动物 ,进行全股骨骨密度及股骨下端不脱钙制片的骨组织形态计量学观察。结果 服药组均较去势对照组的骨密度值有所增加。骨计量学测量同样可见到骨体积明显改善。他汀类药物主要作用于骨形成类指标 ,如 :成骨活性增加、类骨质生成、骨转换加快、骨重建时间缩短等 ,这均与二膦酸盐药物作用机制与表现不同。二膦酸盐作用使骨吸收表面减少、骨重建周期延长 ,而类骨质表面与平均类骨质宽度等计量指标下降。结论 他汀类药物能阻止去卵巢大鼠股骨下端骨组织的快速骨丢失 ,其作用是通过促进骨组织形成与骨转换加快而实现 。

骨性关节炎研究进展

随着城市人口的老化,预测将会有30%以上的老龄人口患有不同类型的骨关节退形性疾病.在美国目前2亿多人口中,就有骨性关节炎4500万,发病率约占总人口的20%.在老年人中所占比例更高,这其中的15%有严重的症状和关节的不稳定而影响其生活质量而极待治疗.

骨重建过程“四环素活体标记”骨组织形态计量学指标在骨质疏松中的应用

扼要结合骨组织形态计量学指标与实验动物数据介绍影响骨质疏松中骨重建过程的动态指标变化及意义,讨论各指标间的关系及变化所代表的实验意义,还介绍了一系列骨计量学观测指标的标准名称,以及利用体视学和图像分析方法进行测量的公式、单位,并扼要介绍一组实验数据与骨计量学指标的相关分析意义,便于今后分析例样的应用查阅。

骨计量学方法在骨质疏松模型中的定量观察

目的观察骨结构与骨质疏松关系即骨构筑学的定量测量"骨质量"的价值,探讨骨组织形态计量学与μCT三维重建计量方法的价值意义。方法采用30只SD雌性大鼠,分成假手术组、切除卵巢去势组和去势后服用阿伦膦酸钠组,每组10只。在服药100 d后处死,进行全股骨骨密度测量及股骨下端不脱钙切片的骨计量学观察。三维重建采用美国GE公司eXplore Locus SP型μCT,用Micview V2.1.2重建软件选取股骨下端骨骺板下2 mm3兴趣窗进行结构计量测量。结果去势后骨体积密度显著性下降,由假手术组的(53.00±3.20)%降至(19.16±2.97)%(P<0.001);经二膦酸盐治疗后得到显著性改善(升至(40.40±3.07)%,与去势组比较P<0.001)。同时假手术组与去势组和去势组与二膦酸盐组之间,骨计量学指标中四环素标记率,类骨质的表面密度、平均类骨质表面厚度及动态指标,骨矿化沉积率与骨矿化延迟时间等均有显著性差异(P<0.05)。μCT结果显示骨小梁体积比与骨表面积体积比显示结果同骨计量学结果相似,数值均同比例减少。另外在三维结构计量上,除骨小梁厚度外,骨小梁数目、骨小梁间隙等均出现显著性变化。结论骨组织形态计量学与显微CT三维重建定量分析对骨结构与骨质量指标均能进行定性、定量的客观评价;骨计量学方法能从静态和动态两个方面反映骨新陈代谢过程,可以精确地反映出骨重建过程的变化规律和特点。

应力遮挡性骨皮质骨质疏松症的病理组织学与骨四环素荧光标记观察

目的:了解骨折钢板内固定对骨折局部骨皮质的病理组织学改变与四环素荧光标记的变化。方法:将家兔胫骨制成标准横断骨折模型,后安放加压钢板。术后进行四环素活体标记,在术后5、10和15周截取标本拍片,分别进行大体计量观察与骨不脱钙切片的组织学与荧光显微镜下观察。结果:组织学观察发现,随术后固定时间的延长,钢板被骨痂包绕的越紧密,后期钢板周边骨痂呈皮质骨样结构。钢板下与钢板对侧皮质骨出现大块的“穿凿样”皮质骨吸收区,并出现破骨细胞性骨吸收与骨重建性四环素双标记线。结论:在加压钢板内固定术后,骨折局部皮质骨均有明显的骨质疏松改变,并随固定时间的延长而加重。

中药葛根对去卵巢大鼠骨代谢生化指标的影响

目的 研究中药葛根对去卵巢大鼠骨代谢生化指标的影响 ,探讨葛根治疗骨质疏松症的药理作用。方法 采用去卵巢大鼠模型 ,分A去势组、B假手术组、C去势服葛根组、D去势服西药组 (阳性对照组 ,程序治疗 ) ,去势 1个月后C、D组服药 50d ,放免法测定血清雌二醇 (E2 )、邻甲酚酞络合酮法测定尿钙 ,ELISA法测定尿脱氧吡啶啉 (Dpd) ,放免法测定血清骨钙素 (BGP)水平 ,组间进行比较。结果 E2 测定B、C、D组高于A组 (P <0 0 0 1 ) ,C、D组低于B组 (P <0 0 1 ,P <0 0 0 1 )。尿钙测定B、C、D组低于A组 (P <0 0 1 )。Dpd测定B、C、D组低于A组 (P <0 0 0 1 ) ,C、D组低于B组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1 )。BGP测定B组低于A组 (P <0 0 1 ) ,C、D组高于A组 (P <0 0 1 ,P <0 0 5) ,同时高于B组(P <0 0 0 1 )。结论 中药葛根有增加E2 ,抑制骨吸收 ,促进骨形成 。

绵萆薢对去卵巢大鼠骨代谢改变的干预作用

目的:探讨绵萆薢对去卵巢大鼠骨代谢的影响。方法:3月龄雌性未孕大鼠30只,随机分为假手术组,去卵巢组,己烯雌酚组(4.3×10^(-4)g·kg^(-1)·d^(-1)),绵萆薢高、中、低剂量组(4,2,1g·kg^(-1)·d^(-1)),每组均为5只大鼠。连续给药12周后,取血、尿用于血清雌二醇(E_2)、钙(Ca)、磷(P)、骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALP),尿钙/肌酐(Ca/Cr)、磷/肌酐(P/Cr)、脱氧吡啶啉/肌酐(DPD/Cr)的测定;分离子宫并称重,测量股骨骨密度和生物力学指标。结果:绵萆薢各剂量组子宫指数均明显高于模型组(P<0.01)。去势大鼠血清ALP,BGP,尿DPD/Cr,Ca/ Cr含量均比假手术组明显升高(P<0.05),而绵萆薢各剂量组血清BGP,ALP,尿DPD/Cr,Ca/Cr含量均低于模型组。各组血Ca,P,尿P/Cr均无显著性改变。去势组大鼠骨密度为(0.032±0.007)g·cm^(-2),与假手术组比较显著降低(P<0.01),绵萆薢各剂量组骨密度与模型组大鼠比较均明显升高(P<0.05,P<0.01)。去势大鼠最大载荷、挠度、最大应变分别为(125.78±15.48)N,(1.87±0.22)mm,(9.34±1.10)%,均显著低于假手术组(P<0.05,P<0.01);各剂量绵萆薢可以不同程度地提高其最大载荷、最大应力。结论:绵萆薢可降低骨转换,使去卵巢大鼠骨丢失得到改善。

运动终板在骨骼肌缺血再灌注损伤中的病理变化

目的探讨骨骼肌缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)过程中运动终板(neuromuscularjunction,NMJ)损伤的病理改变进程。方法将Wistar大鼠48只制备仅神经血管蒂及两端腱性相连的腓肠肌内侧头肌瓣模型。分为6组(n=8),A组:正常对照组,不经缺血处理取材;B组:肌肉缺血3h取材;C组:缺血4.5h取材;D组:缺血4.5h,通血1.5h取材;E组:缺血4.5h,通血24h取材;F组:缺血4.5h,通血2周取材。观察肌肉大体变化及肌肉标本行氯化金压染后NMJ的形态学变化,标本经乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)及结合琥珀酸脱氢酶(succinatedehydrogenase,SDH)染色后行半定量分析。另取5只大鼠分别制成如A、C、E组模型,取材后标本分别行HE染色、氯化金(AuCl3)染色连续切片等辅助实验。结果肌肉大体观察:B组肌肉呈紫色、肿胀;C组呈紫黑色、肿胀加重、无弹性和收缩反应并有较多暗红色血性渗出;D组较C组颜色浅,肿胀减轻,弹性差,无收缩,质脆硬,渗出少且清亮;E组与D组相似、渗出更少;F组呈红灰相间,并有黄色坏死组织外露,肌肉挛缩、无收缩及弹性,与周围广泛粘连。氯化金染色:缺血和再灌注期肌纤维坏死发生最早,随后是坏死肌纤维上NMJ的溃变,最后神经纤维也发生崩解,如同树叶凋落。AChE结合SDH染色:B、C组的AChE含量与A组比较差异无统计学意义(P>0.05);D、E、F各组AChE及SDH的含量均急剧下降,各组AChE含量与A、C组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论肌肉内神经纤维至NMJ的分布极象树状结构。缺血期NMJ比肌纤维更能耐受缺血损伤,NMJ的存在依赖于肌纤维的存活。应对坏死肌肉实施进一步清创,IR损伤才可得到有效控制。

OA患者关节液与血清中金属蛋白酶及其抑制剂的检测及临床意义

目的 本文探讨基质金属蛋白酶（MMP-3、MMP-1）及组织抑制剂（TIMP-1）对骨关节炎发病作用机理研究。方法 对46例膝关节骨性关节炎患者,20例正常人血清标本,以及8例正常人关节液标本中的MMPs,TIMP及细胞因子进行了研究。MMP-3、MMP-1、TIMP-1的检测均采用双抗体夹心ELISA法。结果OA患者血清中MMP-3、MMP-1的水平没有性别差异,患者关节液中的MMP-3含量男性显著高于女性,约为1～2.5倍。患者关节液中MMP-3、MMP-1、TIMP-1的含量均显著高于血清中的含量。患者血清中只有MMP-3的水平显著高于正常对照组,MMP-1、TIMP-1的水平与正常对照组无显著性差异;而关节液中MMP-3、MMP-1、TIMP-1的水平均显著高于正常对照组。本研究结果还显示MMP-3、MMP-1和TIMP-1与病程成正相关。结论OA患者关节液中MMP-3水平增高的幅度比TIMP-1要大,由于二者间的相对平衡被破坏而促进了关节软骨的降解,导致关节软骨进行性破坏。

金属蛋白酶MMP-3测定对类风湿关节炎与骨性关节炎鉴别诊断的意义

目的 :探讨基质金属蛋白酶在骨性关节炎 (OA)和类风湿性关节炎 (RA)损害中的作用。方法:采用单克隆抗体酶免疫测定技术检测OA和RA患者血清及关节液中的金属蛋白酶MMP_3的含量 ,并与正常男女对照组作比较。结果 :(1)正常对照组男性血清MMP_3含量比女性高1～2倍。 (2)OA组血清MMP_3平均水平男性为(141±37) μg/L ,对照组为 (68±16) μg/L ;女性为 (110±29) μg/L ,对照组为 (33±11) μg/L ,男女两组与对照组比较差别有统计学意义 (P<0.05或P<0.01)。关节液中的MMP_3的平均浓度为 (32970 02±4870 82) μg/L ,明显高于血清测定值。(3)在RA组 ,血清MMP_3水平男性为 (681±127) μg/L ,女性为 (567±116) μg/L显著高于正常对照组及OA病人组(P<0.01)。 (4)RA组、OA组血清与关节液中MMP_3水平呈正相关 (r分别为0 7906 ,0 8821)。结论 :MMP_3的血清水平RA患者显著高于OA患者 ,这对于RA和OA的鉴别诊断 。

大鼠移植性骨肉瘤模型的建立

目的:建立大鼠移植性骨肉瘤模型。方法:采用大鼠骨肉瘤细胞系UMR106接种Wistar大鼠后肢股骨远端或胫骨近端的骨髓腔中,成瘤后,进行影像学、病理组织学观察及血清生化检查。结果:本方法致瘤率为86.7%,肺转移率为96.2%。影像学可见骨膜反应,溶骨变化。病理组织学可见骨组织、骨骺板和软骨被肿瘤细胞所侵蚀、破坏,核分裂多见,瘤组织血管丰富,可见坏死、颗粒状钙化、新生类骨质样组织。大鼠血清碱性磷酸酶明显高于对照组(P<0.01)。结论:该方法建立的大鼠骨肉瘤模型,其恶性生物学行为接近临床骨肉瘤患者实际情况,为临床骨肉瘤实施新疗法与基础实验研究提供了良好的动物模型。

绵萆薢对去卵巢大鼠股骨生物力学及骨形态计量学的影响

目的:探讨绵萆薢水煎液对雌性大鼠去卵巢后股骨生物力学及骨计量学指标的影响。方法:雌性未孕大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、绵萆薢高(4 g/kg.d)、中(2 g/kg.d)、低(1 g/kg.d)剂量组,每组均为5只。连续给药12周后,三点弯曲法测量股骨生物力学指标,并分别进行HE染色、Von Kossa染色及四环素荧光标记观察,以骨计量学方法分别测定骨小梁体积百分比TBV(%)、骨小梁类骨质表面TOS(%)、类骨质宽度MOSW(μm)、四环素单标表面MdS(%)、四环素双标表面DMds(%)、双/单标表面比DMds/MdS(%)、骨形成表面百分比TFS(%)、骨吸收表面百分比TRS(%)、骨矿化沉积率MAR(μm/d)、骨矿化延迟时间MLT(d)。结果:大鼠去卵巢3个月后股骨的最大载荷、挠度、最大应变分别为125.78±15.48(N)、1.87±0.22(mm)和9.34±1.10(%),均明显低于假手术组(P<0.05,P<0.01);各剂量绵萆薢可以不同程度地减少其最大载荷、最大应力的降低。去卵巢3个月后大鼠股骨骨体积较假手术组明显降低(P<0.01),四环素单标表面、双标表面、双单标比及类骨质表面、类骨质宽度、破骨表面、矿化率均明显增加(P<0.01);绵萆薢中、高剂量组的骨体积均明显高于模型组(P<0.05),四环素单标表面、双标表面、双/单标比、骨吸收表面、类骨质表面、类骨质宽度、矿化沉积率均明显低于模型组(P<0.05),骨矿化延迟时间稍短于模型组(P>0.05)。结论:绵萆薢在一定程度上可以增加去卵巢大鼠股骨的骨小梁体积,降低骨转换率,改善部分生物力学指标。

核心肽对类风湿关节炎滑膜细胞增殖与凋亡的影响

背景:前期研究发现,在类风湿关节炎关节腔中注入核心肽,可以明显抑制病情活跃度且抑制滑膜的浸润增生。但由于T细胞和滑膜细胞之间联系密切,核心肽是通过直接作用于滑膜细胞还是通过T细胞介导抑制滑膜细胞尚缺乏研究。目的:对比观察核心肽对类风湿关节炎和骨性关节炎滑膜细胞增殖与凋亡的影响。方法:采用酶消化法分离类风湿关节炎和骨性关节炎患者手术切取的病变滑膜组织滑膜细胞,MTT法检测滑膜细胞增殖率。取第3代类风湿性关节炎和骨性关节炎滑膜细胞分5组干预:空白对照组、甲氨蝶呤组、10,25,50μmol/L核心肽组。MTT法检测各组滑膜细胞增殖率变化;采用流式细胞仪检测各组滑膜细胞凋亡情况。结果与结论:类风湿关节炎滑膜细胞体外增殖速度较骨性关节炎滑膜细胞快(P<0.05)。3种剂量的核心肽均可抑制骨性关节炎滑膜细胞的增殖,诱导其凋亡,且具有剂量相关性,高剂量时,核心肽更明显表现出对骨性关节炎滑膜细胞凋亡的诱导作用。而对于类风湿关节炎滑膜细胞,只有中、高剂量核心肽显示出明显的诱导细胞凋亡作用,但未见明显的剂量依赖性。核心肽对类风湿关节炎滑膜细胞的凋亡诱导作用明显小于其对骨性关节炎细胞的凋亡诱导作用。结果提示核心肽对滑膜细胞具有一定的直接作用,高剂量核心肽在体外可抑制类风湿关节炎滑膜细胞的过度增殖,而中、高剂量核心肽可诱导类风湿关节炎滑膜细胞的凋亡。

针灸对去势大鼠骨组织形态学影响的实验研究

目的:以去势大鼠为研究对象,通过观察骨组织形态学的变化以探讨针灸对骨质疏松症的干预机制。方法:将40只Wister大鼠随机分为4组,即假手术组,模型组,针刺组,艾灸组。造模后,针刺组和艾灸组每日进行相应处理。各组大鼠在造模3个月后进行骨组织形态学实验。结果:去势大鼠针刺及艾灸治疗后,骨小梁面积和活性成骨细胞表面均有增高,活性破骨表面下降,单标记表面、双标记表面、标记间距离、类骨质表面、矿化骨表面、矿化沉积率、纠正矿化沉积率均显著下降。类骨质宽度无明显改变,矿化延迟时间有显著延长。结论:针刺及艾灸对去势后大鼠的骨组织形态学指标有良性调整作用。

重组人甲状旁腺激素(1-34)片段促进动物骨折愈合的研究

目的:通过实验动物骨折模型观察重组人甲状旁腺激素(1-34)片段[rhPTH(1-34)]促进动物骨折愈合作用,并初步探讨rhPTH(1-34)的作用机制。方法:制备日本大耳白家兔标准骨折模型,随机分为对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,高、中、低剂量组皮下间歇注射不同剂量的rhPTH(1-34)。检测血清骨特异性碱性磷酸酶(bAKP)、骨保护素(OPG)、骨钙素(BGP)、白介素-6(IL-6)指标,同时进行病理组织形态学及骨组织形态计量学观察。结果:X线片和组织学结果显示,与对照组相比,rhPTH(1-34)各组骨折愈合速度加快,骨形成活跃。rhPTH(1-34)各组在术后1周后,血清bAKP均明显升高(P<0.05)。随后高剂量组bAKP仍呈上升趋势,其余各组随骨折愈合而逐渐下降至正常水平。除低剂量组外,其他实验各组血清OPG水平在2周达到最高值,随后除高剂量组外,也相对维持在高的水平。实验各组术后IL-6水平均比术前有一定程度的升高,术后4周对照组升高尤为显著。结论:rhPTH(1-34)可以促进兔骨折早期愈合,促进骨形成并且可抑制骨吸收。

强骨丹对去卵巢大鼠骨质疏松症防治作用的实验研究

目的]探讨中药强骨丹对绝经后骨质疏松症的防治作用。[方法]运用切除大鼠卵巢方法建立去卵巢骨质疏松症模型 ,随机分为模型组、强骨丹高低剂量组、西药组 ,同时设假手术对照组。采用双能X线骨密度测定法、放射免疫分析法和ELISA法等检测各组实验鼠骨密度 (BMD)、骨矿含量 (BMC)、血清雌二醇 (E2)、骨钙素 (BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)以及尿脱氧吡啶啉 (Dpol)。[结果]强骨丹可明显升高BMD、BMC ,提高血清E2 水平 ,降低TRACP5b和Dpd水平 ,并降低BGP含量。[结论]强骨丹通过调节机体相关内分泌功能 ,抑制骨吸收 ,降低骨的转换率 ,减少骨丢失 ,增加骨密度 ,对绝经后骨质疏松症有防治作用。

IL-23p19 mRNA在RA患者滑膜组织及滑膜细胞中的表达

目的:探讨类风湿性关节炎(RA)与骨性关节炎(OA)患者滑膜组织及体外培养滑膜成纤维细胞(SF)中白细胞介素(IL)-23p19mRNA分泌来源及对RA诊断的意义。方法:收集行滑膜切除术及关节置换术的6例RA患者及6例OA患者滑膜组织,酶消化法对滑膜组织行SF体外培养,RT-PCR方法检测RA和OA滑膜组织、SF中IL-23p19mRNA表达水平,RA患者滑膜组织、SF中IL-1βmRNA的表达水平。结果:(1)6例RA患者和4例OA患者滑膜组织、SF或OASF中IL-23p19mRNA表达均为阳性,且RA患者滑膜组织中的表达高于OA患者,RASF中的表达量显著高于OASF中阳性标本的表达量(均P<0.05)。(2)6例RA患者滑膜组织中IL-1βmRNA表达均阳性,且与IL-23p19mRNA表达水平呈正相关(r=0.900,P<0.05),6例RASF中IL-1βmRNA表达均阳性,且与IL-23p19mRNA表达水平正相关(r=0.883,P<0.05)。结论:IL-23参与了RA的发病过程,并且可由RA患者中的SF分泌,IL-23可作为RA与OA鉴别诊断的指标之一,IL-1β很可能是IL-23在RA中发挥致病作用的途径之一。

山茱萸总苷对去势大鼠骨组织形态学影响的实验研究

目的观察去势大鼠骨组织形态学的变化,探讨山茱萸总苷对骨质疏松症的干预机制。方法将50只Wistar大鼠随机分为5组,即假手术组、模型组、山茱萸总苷高剂量组、山茱萸总苷中剂量组及山茱萸总苷低剂量组。复制骨质疏松动物模型,并于术后第4天开始给药,假手术组和模型组均灌服蒸馏水(20ml/kg),山茱萸高剂量组服用量为3.56g/kg(1.6倍等效剂量),山茱萸中剂量组为2.16g/kg(1倍等效量),山茱萸低剂量组为1.08g/kg(0.5倍等效剂量)。各组动物灌胃容量相同,均为8ml。每日灌胃1次,每周6次,连续灌胃3个月。各组大鼠在造模3个月后进行骨组织形态学实验。结果去势大鼠经过不同浓度的山茱萸总苷治疗后,各组的骨小梁面积和活性成骨细胞表面均有增高,活性破骨表面下降,单标记表面、双标记表面、标记间距离、类骨质表面、类骨质宽度、矿化骨表面、矿化沉积率均显著下降。纠正矿化沉积率、矿化延迟时间无明显改变,其中以中剂量组促进骨形成作用最明显。结论山茱萸总苷对去势后大鼠的骨组织形态学指标有良性调整作用。