流式细胞术同时检测BrdU与细胞表面抗原方法的改进

目的改善用流式细胞仪检测BrdU和细胞膜表面抗原同时标记的方法。方法小鼠腹腔注射BrdU100mg/kg,3h后取胸腺制成胸腺单细胞悬液。细胞经CD4、CD8表面抗体标记后,2%多聚甲醛溶液4℃固定过夜,0.1%Triton x-100/0.1%柠檬酸钠/PBS(pH7.2)冰上孵育2min,50U DNaseI37℃孵育30min,BrdU抗体标记,上机检测。结果此方法在细胞表面抗原与BrdU同时检测时,既能够有效的区分BrdU+、BrdU-细胞,同时BrdU抗原标记的处理过程不影响检测细胞表面抗原的检测。结论该方法可用于流式检测BrdU与表面抗原的同时标记,适用于多细胞亚群增殖的检测。

肠道微生物在人类疾病中的作用

人类肠道中栖息着上百种微生物,行使着消化、营养、免疫、共生等重要生理功能,大量研究表明肠道微生物对肠道功能具有重要影响。利用系统生物学方法可从整体上研究人体肠道系统,确认肠道微生物与免疫、代谢之间的关联。本文就肠道微生物与人类疾病间的相互作用,包括免疫缺陷相关疾病、腹腔疾病、环境性肠病、肠道细菌相关的代谢疾病和肥胖,以及致病机制和研究模型作一综述。

胸腺的增龄化萎缩与免疫重建

随着年龄的增长,胸腺萎缩导致T细胞生成的减少和外周初始T细胞(na(i|¨)ve T cell)输出的减少,增加了临床上许多疾病的发病率与致死率,因此了解胸腺萎缩的机制及其内环境的变化对相关临床疾病的预防和治疗至关重要。目前的研究表明,人们可通过治疗而停止甚至逆转胸腺的萎缩过程。本文将就细胞因子,如白细胞介素7、角质细胞生长因子和性激素,对恢复胸腺功能与重建外周免疫系统的研究进展做一综述。

产甲酸草酸杆菌预防草酸钙肾结石的作用

目的从健康志愿者新鲜粪便中筛选人源产甲酸草酸杆菌并研究其防治草酸钙结石的作用。方法从健康志愿者新鲜粪便中筛选并分离培养人源产甲酸草酸杆菌。采用0.8%乙二醇灌胃建立草酸钙结石大鼠模型。大鼠按随机数字表法分为对照组及4组乙二醇诱导的草酸钙结石模型组,其中3组草酸钙结石大鼠分别以10^6、10^7、10^8菌落形成单位(CFU)活菌干预4周。每周收集大鼠血及24 h尿液检测血钙、血镁、血磷、BUN、Scr、尿草酸、尿钙、尿镁、尿磷的变化。于第4周末处死大鼠,肾组织行HE、Yasue染色,偏折光镜下观察肾脏草酸钙结晶沉积部位及含量。结果分离出的菌株与已知美国模式菌种收集中心(ATCC)35274相似度为100%,由此判定已成功筛选出产甲酸草酸杆菌。第4周末5组大鼠间体重、Scr、BUN、血钙、血镁、血磷、尿镁、尿磷的差异均无统计学意义。第4周末造模组24 h尿钙排泄量显著低于对照组(P<0.05),经产甲酸草酸杆菌菌液干预后,10^8 CFU组24 h尿钙排泄量升高,显著高于造模组(P<0.05),其余干预组24 h尿钙排泄量与造模组差异无统计学意义。10^6 CFU组、10^7 CFU组尿草酸排泄量较造模组有所下降,但差异未达到统计学意义;10^8 CFU干预组在第1周末24 h尿草酸排泄量即显著低于造模组(P<0.05),且持续至第4周末。干预4周后,偏折光镜下对照组无结晶形成,造模组可见肾皮质和肾髓质内大量草酸钙结晶形成,结晶成堆分布,相互连接;Yasue染色与肾脏同一部位草酸钙结晶重合;与造模组相比,10^6 CFU组、10^7 CFU组草酸钙结晶评分无明显改变,而10^8 CFU组肾脏草酸钙结晶评分显著降低(P<0.05)。结论本研究已成功筛选出人源产甲酸草酸杆菌。每日给予10^8 CFU产甲酸草酸杆菌可安全、有效降低大鼠尿草酸排泄量,预防肾脏草酸钙结晶形成从而抑制结石形成。

嗜酸乳杆菌YIT2004株的抗生素敏感性及对万古霉素耐药机制

目的研究嗜酸乳杆菌YIT2004株的抗生素敏感性及其耐药机制。方法最低抑菌浓度法检测嗜酸乳杆菌YIT2004株对抗生素的敏感性;提取YIT2004株基因组,用特异性引物对耐药基因进行PCR扩增。结果嗜酸乳杆菌YIT2004株对青霉素、氨节西林、亚胺培南、庆大霉素、红霉素和克林霉素敏感,对万古霉素耐药;YIT2004株基因组中不存在wnA.耐药基因,但存在高度相似的md、ddl万古霉素耐药基因。该耐药为固有耐药,不具备传递性。结论嗜酸乳杆菌YIT2004株对青霉素、氨节西林、亚胺培南、庆大霉素、红霉素和克林霉素敏感,对万古霉素固有耐药且其耐药性不可传递。嗜酸乳杆菌YIT2004株的使用具有安全性。