双酚A对斑马鱼精巢性激素生成酶基因表达的影响

为了解环境雌激素对鱼类精巢发育的影响,将成年雄性斑马鱼(Danio rerio)暴露于不同浓度双酚A(0、500、1 000、2 000、4 000μg·L-1)下21 d,并在此基础上,进一步研究了暴露在相同浓度(BPA2 000μg·L-1)不同暴露时间下各基因表达的动力学模式。用荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测试验鱼精巢性激素合成相关细胞色素P450酶类基因(CYP17、CYP11B和CYP19A)以及雌、雄激素受体和促卵泡激素受体(ERα、ERβ、AR和FSHR)基因的表达,用常规组织学方法研究试验鱼精巢结构的变化。结果表明,BPA促进了精巢内源雌激素合成相关酶类基因CYP19A和雌激素受体ERαmRNA、ERβmRNA的表达,且BPA浓度为2 000μg·L-1时3者的表达量显著上调,同时随着暴露时间的延长,具有明显的时间累积效应。1 000μg·L-1BPA可导致斑马鱼精巢CYP17 mRNA的表达量显著下调,BPA2 000μg·L-1暴露12 d引起了CYP11B mRNA表达下调,而随着暴露时间的延长有所回升,但它对精巢AR mRNA的表达却无明显影响。同时,BPA 500μg·L-1引起了FSHR基因的显著上调,在时间动态学上,呈上升趋势。在组织学上,2 000μg·L-1BPA引起斑马鱼精巢生精小管内精子浓缩严重,精原细胞(Sg)和精母细胞(PS和SS)数目都有所减少,BPA 4 000μg·L-1组斑马鱼精巢退化。因此,BPA可诱导精巢内源雌激素合成和雌激素受体的表达,提高雌激素效应,通过抑制CYP17基因的表达,一定程度上抑制雄激素的合成,从而引起斑马鱼精巢组织的破坏。同时,据实验数据推测,雄激素的下调可能启动了下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴的负反馈调节机制,而此作用机制还有待进一步研究。

羊奶中表皮生长因子(EGF)变化规律研究

采用酶联免疫法（ELISA）检测羊乳中表皮生长因子（EGF）浓度及变化规律。结果表明：关中奶山羊所产羊乳中EGF浓度最高（P〈0.05）;对于不同泌乳期的羊乳,产羔后30-90 d时EGF浓度显著高于120-210 d（P〈0.05）;挤奶间隔对乳中EGF浓度无显著性影响;奶山羊日泌乳量越小,羊乳中EGF浓度越高;奶山羊在产羔后2-5胎的羊乳中EGF浓度显著高于产羔后第1胎和第6、7胎的浓度（P〈0.05）。因此,在开发富含EGF的功能性羊奶产品时,可收集泌乳期为30-90 d,挤奶间隔为12 h,日泌乳量小,2-5胎的关中奶山羊乳样。

羊乳表皮生长因子(EGF)在人工模拟胃肠液中的稳定性

文中在研究羊乳EGF和EGF标品在人工胃液、人工肠液和人工胃肠液中消化稳定性的基础上,研究添加乳成分和食源性蛋白酶抑制剂的EGF标品在人工胃液和人工肠液中的稳定性。结果表明:羊乳中EGF浓度在人工胃液、人工肠液或人工胃肠液中消化1 h内迅速下降,消化1 h后基本稳定,但与纯EGF消化程度相比,羊乳中EGF消化速度明显降低;通过研究添加乳成分的EGF样品在人工胃肠液中的消化稳定性,发现在人工胃液中,乳清和乳清液对EGF的消化有保护作用,而酪蛋白和乳清蛋白对EGF的消化无保护作用,在人工肠液中,乳清、乳清液、酪蛋白和乳清蛋白均能对EGF的消化产生保护作用;通过研究添加食源性蛋白酶抑制剂和乳清液的EGF样品在人工胃肠液中的消化稳定性,发现在人工胃液中,乳清液(GMSF)对EGF的消化有保护作用,而大豆蛋白酶抑制剂(SBTI)、青豆蛋白酶抑制剂(LBTI)、蛋清蛋白酶抑制剂(EWPI)对EGF的消化无保护作用;在人工肠液中,大豆蛋白酶抑制剂(SBTI)、青豆蛋白酶抑制剂(LBTI)、蛋清蛋白酶抑制剂(EWPI)和乳清液(GMSF)对EGF的消化均产生保护作用。

芳香化酶抑制剂对暗纹东方鲀CYP19A、DMRT1基因表达及性腺分化的影响

采用组织学和分子生物学方法,研究了投喂芳香化酶抑制剂来曲唑(LE)后暗纹东方鲀(Takifugu obscures)初孵仔鱼CYP19A、DMRT1基因表达以及性腺的组织学变化,以期进一步了解P450芳香化酶(P450arom)在鱼类早期性别分化过程中的作用。RT-PCR结果显示,对照组样品CYP19A和DMRT1表达显示性二态,雌性表达CYP19A基因,雄性表达DMRT1基因。LE处理组在性别分化期间,雄性样品单一表达DMRT1,雌性样品则同时表达CYP19A和DMRT1。qRT-PCR结果显示:LE处理组雌性仔鱼CYP19A基因表达被显著抑;虽然在仔鱼出膜后22d(dph)的表达水平高于9 dph,但仅为同日对照组的2.11%。LE处理组雌性样品22 dph时DMRT1基因表达量上调,至150 dph时达对照组雄性水平。55 dph的性腺组织学结果表明,LE处理可导致暗纹东方鲀稚鱼原始卵巢退化,并向功能性精巢发育。150 dph的LE处理组性腺均为精巢,并与对照组精巢发育同步。结论认为,暗纹东方鲀性腺分化期间P450arom是卵巢形成和维持发育所必须的,抑制P450arom活性可导致雌性暗纹东方鲀发生雄性化逆转。

不同物质对羊奶脱膻效果的比较研究

为了脱除羊奶膻味,选用苦杏仁、绿茶、百里香精油3种物质对羊奶的传统脱膻技术进行研究。结果表明,苦杏仁浆的最佳添加量为6%,绿茶的最佳添加量为4%,百里香精油的最佳添加量为0.02%,在上述确定的最佳条件下,羊奶取得了良好的脱膻效果。文章的最后对这几种羊奶传统脱膻方法进行了总结,并对实际生产提出了一些具有指导意义的意见和建议,对羊奶传统脱膻技术进行展望。

羊奶发酵中低膻味菌株的筛选

从商业发酵剂分离纯化出6株保加利亚乳杆菌和6株嗜热链球菌,研究其在羊奶酸奶发酵中脂肪酶活性、FFA以及膻味的变化。结果表明,用单一菌株发酵羊奶时,保加利亚乳杆菌L.b-883和L.b-211菌株、嗜热链球菌S.t-187和S.t-300菌株制作的羊奶酸奶中脂肪酶活性和FFA含量较低,羊奶酸奶膻味较轻;当杆菌和球菌配合应用时,L.b-211菌株与S.t-187菌株以2∶1比例配合,羊奶酸奶中脂肪酶活性和FFA含量最低,分别是11.62μmol/m L·min和3.28μequ/m L,感官评定几乎无膻味。

顶空液相微萃取-气相色谱法测定盐酸雷尼替丁中二氯甲烷和三氯甲烷的残留量

采用顶空液相微萃取与气相色谱联用技术测定雷尼替丁中二氯甲烷和三氯甲烷的残留量。自制了萃取液保护装置。考察了萃取溶剂的种类、萃取时间、萃取温度、萃取液的体积对二氯甲烷和三氯甲烷萃取效果的影响。以正十三烷为萃取剂,在60℃下萃取30min,萃取液滴体积2μL。二氯甲烷含量在1～10μg/g范围内与色谱峰高呈线性关系,相关系数(r2)为0.973 3;三氯甲烷含量在1～10μg/g范围内与色谱峰高呈线性关系,r2为0.972 4。二氯甲烷和三氯甲烷的最低检出限分别为0.027 3μg/g和0.041 0μg/g,加标回收率分别为93.6%～102%和98.1%～103%。方法简便易行,测定结果准确。

羊乳中环腺苷酸(cAMP)和环鸟苷酸(cGMP)变化规律的研究

采用酶联免疫法检测羊乳中环腺苷酸(cAMP)和环鸟苷酸(cGMP)质量浓度及变化规律。结果表明,羊初乳中cAMP和cGMP质量浓度变化较大,cAMP质量浓度在产羔后第4 d时较高,而cGMP在产羔第1 d时质量浓度较高;常乳中cAMP和cGMP质量浓度显著高于初乳和末乳(p<0.05);日泌乳量越大,羊乳中cAMP和cGMP质量浓度越高;每天挤奶2次的羊乳中cAMP和cGMP质量浓度显著高于每天挤奶1次的羊乳(p<0.05);奶山羊在产羔2~5胎时羊乳中cAMP和cGMP质量浓度显著高于产羔第1、6、7胎的质量浓度(p<0.05)。

羊乳中类胰岛素生长因子Ⅰ的特性

采用双抗体夹心酶联免疫法研究了温度、p H、紫外线以及金属离子等因素对羊乳中类胰岛素生长因子Ⅰ(insulin-like grouth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)浓度的影响。研究表明:羊乳中IGF-Ⅰ在20℃时浓度最高,达到(29.91±0.91)ng/m L(P<0.05),在40℃时具有较高的热稳定性;IGF-Ⅰ在p H=4时浓度最高,达到(28.53±1.11)ng/m L(P<0.05),在p H值为6~8时稳定性较高;紫外线照射会造成IGF-Ⅰ的浓度显著降低(P<0.05)。Na^+、Ca^(2+)、Al^(3+)、Zn^(2+)等金属离子对IGF-Ⅰ的浓度具有抑制作用,而Mg^(2+)、Fe^(2+)对IGF-Ⅰ无明显影响,低浓度的Fe^(3+)、Cu^(2+)对IGF-Ⅰ的浓度具有抑制作用,而高浓度的Fe^(3+)、Cu^(2+)对IGF-Ⅰ具有激活作用。通过研究,评估温度、p H、紫外线以及金属离子对羊乳中IGF-Ⅰ浓度的影响,为生产具有更高IGF-Ⅰ浓度的功能活性羊乳产品提供依据和指导。

羊乳中类胰岛素生长因子I的变化规律

为研究羊乳中类胰岛素生长因子I(IGF-I)的浓度变化,并采集富含IGF-I的羊乳原料,采用双抗体夹心酶联免疫法测定羊乳中IGF-I的浓度。在供试的4种奶山羊(萨能羊、努比羊、垚山羊和关中羊)中,关中奶山羊乳中IGF-I的浓度最高,并且所有山羊乳品中IGF-I的浓度都显著高于牛乳中的IGF-I浓度(P<0.05)。奶山羊初乳的IGF-I浓度变化较大,泌乳第1 d的羊乳中IGF-I浓度最高,随泌乳时间的延长,其浓度显著下降(P<0.05)。常乳中IGF-I浓度比较稳定,但浓度值较低。山羊日泌乳量越小,羊乳中IGF-I浓度越大。经产奶山羊乳比初产奶山羊乳具有更高的IGF-I浓度,其中,第4胎的山羊乳中IGF-I浓度最高(P<0.05)。挤奶间隔时间24 h的山羊乳比间隔12 h的山羊乳具有更高的IGF-I浓度。

高原腹腔镜胆囊切除术不同CO2气腹压对呼吸及术后不良影响

目的探讨在高原地区进行腹腔镜胆囊切除术(LC),不同CO_2气腹压对呼吸及术后不良影响。方法选取西藏自治区人民医院外一科胆囊结石并慢性胆囊炎病例82例,择期在全身麻醉下行胆囊切除术。分为低压组(L)10mmHg、高压组(H)14mmHg。观察患者气腹前20min、气腹中20min、放气后20min呼吸循环及术后不良影响。结果两组在手术前平均动脉压(MAP)mmHg、手术时间(min)无明显差异(P>0.05);气腹前、气腹后及放气后20min,心率HR(min)和平均动脉压MAP(mmHg)均无明显差异(P>0.05);气腹前及放气后20min呼吸末二氧化碳分压(PETCO_2)均无明显差异(P>0.05),但气腹后20min呼吸末二氧化碳分压(PETCO2)有差异(P<0.05);术后两组出现肩胛区疼痛、呕吐、心律失常不良影响的总发生率有差异(P<0.05)。结论在高原地区进行腹腔镜胆囊切除术,CO_2气腹压越高对呼吸及术后不良影响越明显。

影响羊乳中环核苷酸质量浓度的化学因素

研究了pH、金属离子和抗氧化剂等化学因素对羊乳中环核苷酸质量浓度的影响。结果表明,羊乳中pH为3时cAMP质量浓度最高,pH为2时cGMP质量浓度最高;Ca^(2+)、Cu^(2+)、Fe^(2+)、Ni^(2+)、Mg^(2+)、Mn^(2+)、Zn^(2+)对羊乳中cAMP质量浓度有促进作用,而Cd^(2+)可降低羊乳中cAMP的质量浓度;Ca^(2+)、Co^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)对羊乳中cGMP质量浓度有促进作用,而Fe^(2+)、Ni^(2+)对羊乳中cGMP质量浓度有降低作用;在羊乳贮存2~4 d内抗氧化剂可降低羊乳中cAMP和cGMP的质量浓度,在4 d后可促进羊乳中cAMP和cGMP质量浓度。

探析小学藏文分层教学的实际运用策略

随着教育改革的不断推进,小学藏文教学也在不断创新与发展。传统的教学模式已不能适应学生差异化的需求。因此,分层教学作为一种针对学生差异化的教学模式,在小学藏文教学中应运而生。分层教学方式已成为一种比较新颖、高效的教学模式,在藏文教学活动中,采用分层教学的方法可以关注到每一位学生,激发他们的学习热情,促进学生一起进步和共同发展,为将分层教学模式融入小学藏文教学活动,教师应根据自身的教学理念以及学生的实际学习情况,采用有针对性的藏文教学方法,以激发学生自主探索和集体合作学习的意识,提升学生对文本知识的理解,并进一步培养学生的藏文素养。

羊奶粉贮藏过程中挥发性成分的分析

采用顶空固相微萃取结合气质联用(headspace-solid phase microextraction coupled with gas chromatography-mass spectrometry,SPME-GC/MS)技术,对常温贮存下羊奶粉中挥发性成分进行提取与分析。在常温贮存1年的羊奶粉中,共检出41种挥发性成分。其中酸类成分最多,共13种,其次是酯类、烃类、醇类和醛酮类,分别为6、4、4和3种。羊奶粉的主体挥发性成分组成是丁酸、己酸、庚酸、辛酸、4-甲基辛酸、癸酸、月桂酸、邻苯二甲酸二甲酯、辛酸乙酯、十五烷、苯甲醛、甘菊环、己内酰胺,己酸、辛酸、4-甲基辛酸和癸酸在贮存6个月之后含量有明显增加趋势。在整个贮存期间,对羊奶粉膻味有较大影响的酸类物质有己酸、辛酸、4-甲基辛酸和癸酸,尤其是4-甲基辛酸,由于其较低阈值,成为最主要的羊膳物质,并且随着贮存时间的增加,酸类、酯类含量逐渐增加。

加工方式对羊乳表皮生长因子(EGF)浓度的影响

研究加工方式对羊乳中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)浓度的影响。其中主要通过均质、杀菌条件、搅拌、乳酸菌发酵以及贮存条件对乳中EGF浓度的影响。研究结果表明,均质过程对羊乳中EGF浓度几乎无影响(P>0.05);随着搅拌时间的逐渐延长,低速时使EGF浓度先增加后减少,高速时使EGF浓度渐渐减少;羊乳在高温短时巴氏杀菌(75℃/15 s,85℃/10 s)时其中的EGF浓度较为稳定,保留率达到90%以上,而在低温长时巴氏杀菌(63℃/30 min)和超高温瞬时杀菌(137℃/2 s)EGF浓度显著降低;随着发酵时间的延长,乳中EGF浓度逐渐降低,在冷藏过程中EGF浓度无显著性变化;随着贮存时间的逐渐延长,EGF在强化生鲜羊乳和全脂羊奶粉中都具有良好的稳定性。

快速康复外科理念应用于肝囊型包虫病内囊摘除手术治疗的效果分析

目的探究快速康复外科理念应用于肝囊型包虫病内囊摘除手术治疗的效果,为快速康复外科理念在临床上的推广提供参考。方法将60例患者分别分成A组(传统组)和B组(快速康复组),观察比较两组手术时间、术中出血量、术后下床活动时间、首次进食时间、首次肛门排气时间、术后住院天数、住院费用情况。结果两组的一般资料(性别、年龄和体质指数)比较差异无统计学意义(P> 0. 05),手术时间(min)、术中出血量(ml)方面的比较差异无统计学意义(P> 0. 05),而在术后下床活动时间(h)、术后首次进食时间(h)、术后首次肛门排气时间(h)、术后住院时间(天)、住院费用(元)方面的比较,两组比较(p <0. 05)差异有统计学意义。结论将快速康复外科理念应用于肝囊型包虫病内囊摘除手术治疗中,可加快患者术后的康复,缩短住院时间,降低住院费用,值得在临床上的推广。

成人腹股沟疝无张力修补术治疗临床疗效分析

目的对比分析传统手术疝修补术和无张力疝修补术对成人腹股沟疝气临床疗效。方法回顾性分析2012年9月~2017年9月在我院接受治疗的100例成人腹股沟疝患者,分为观察组(50例,无张力疝修补)和对照组(50例,传统手术疝修补)。分析两组患者的一般临床资料、手术时间、住院时间、住院费用、术后并发症、术后半年复发率等情况。结果观察组在手术时间、术中出血量、住院时间、并发症发生率、复发率都显著优于对照组[(73.80±3.19)min vs.(59.60±3.95)min],[(45.40±4.20)mL vs.(29.10±4.36)mL],[(7.90±1.20)d vs.(5.40±0.97)d],[26.0%vs. 8.0%],[6%vs. 0%](P<0.05)。住院费用对照组(2.39±0.53),观察组(2.27±0.45),两组差异无统计学意义(P> 0.05)。结论成人腹股沟疝气无张力修补术具有手术时间及住院时间短,术后并发症及复发率低等优势,安全性较高。

腹腔镜联合胆道镜行胆总管切开术的应用

目的探讨腹腔镜联合胆道镜在胆囊切除＋胆总管切开手术中的应用方法和价值。方法对15例腹腔镜联合胆道镜施行胆囊切除＋胆总管切开手术病例分析总结。结果本组15例均在腹腔镜下行胆囊切除＋胆总管前壁切开置入胆道镜探查/见结石取石后＂T＂型管引流术14例取石成功,1例因胆总管粘连,而中转开腹。有效率93.3%;全组病例随访6-12月,均无不良反应。结论双镜联合施行胆囊切除、胆总管切开手术,具有创伤小、探查准确,术后并发症少,恢复快等优点,值得有条件医院临床推广。