tRNA-ValAAC-5促进肝癌细胞增殖和迁移作用机制研究

目的:本研究论证肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中tRNA-ValAAC-5表达发挥作用及机制。方法:使用Real-time PCR法检测tRNA-ValAAC-5在人正常细胞肝癌细胞(THLE2,THLE3)和HCC细胞株(Hep3B,HuH7,SNU398,Hep3G2)和中的表达。Hep3B和Hep3G2细胞分别转染tRNA-ValAAC-5-inhibitor及对照tRNA-ValAAC-5-NC即为inhibitor组和NC组。两组细胞分别通过CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室实验检测细胞侵袭转移能力,Western blot法检测p21、基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达。结果:相较于THLE2、THLE3细胞,tRNA-ValAAC-5在Hep3B、HuH7、SNU398、Hep3G2细胞中相对表达量均有升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与tRNAValAAC-NC相比,转染tRNA-ValAAC-5-inhibitor的Hep3B、Hep3G2细胞tRNA-ValAAC-5表达均明显降低,两组差异有统计学意义(t=36.52、27.45,P<0.001),表示转染成功。与tRNA-ValAAC-5-NC相比,Hep3B、Hep3G2细胞转染tRNA-ValAAC-5-inhibitor后24、48、72、96 h增殖能力受到抑制,差异均有统计学意义(t=5.25、8.23、7.33、14.16,P<0.001)、(t=4.25、5.11、9.39、7.59,P<0.001)。转染tRNA-ValAAC-5-inhibitor组Hep3B、Hep3G2细胞侵袭转移减少,两组差异有统计学意义(t=14.01、21.85,P<0.001)。转染tRNA-ValAAC-5-inhibitor组Hep3B和Hep3G2细胞p21表达升高、MMP2和MMP9的表达量降低,差异均有统计学意义(t=8.96、12.80、4.652,P<0.01)、(t=15.17、22.36、12.61,P<0.01)。结论:tRNA-ValAAC-5能够有效促进肝癌增殖,侵袭和转移,其可能的作用机制与调控p21、MMP2和MMP9的表达有关。

胃十二指肠疾病与幽门螺杆菌血清抗体分型的关系探讨

[目的]探讨抗体分型与慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG)、慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)、消化性溃疡(peptic ulcer,PU)和胃癌(gastriccancer,GC)的关系。[方法]选取常见胃十二指肠疾病患者113例,分为CSG组、CAG组、PU组、GC组,所有患者行胃镜检查,取静脉血,采用Western blot法测血清幽门螺杆菌(Hp)抗体:细胞毒素相关蛋白A(CagA)、细胞空泡毒素A(Vac)、尿素酶A(UreA)、尿素酶B(UreB)抗体,进行Hp血清分型。CagA和(或)VacA抗体阳性为Ⅰ型(HpⅠ),CagA和VacA抗体阴性,UreA和(或)UreB抗体阳性为Ⅱ型(HpⅡ)。[结果]113例患者Hp感染率为84.1%,Ⅰ型感染比例高于Ⅱ型感染。CAG组、PU组、GC组患者的Ⅰ型感染比例高于CSG组。[结论]单中心临床调查显示胃十二指肠疾病患者人群中感染Hp主要以毒力强的Ⅰ型为主,Ⅰ型菌株与GC、CAG、PU的发生有相关性;Hp血清抗体分型检测有助于临床医师对Hp相关的胃十二指肠疾病的预后风险评价及指导Hp感染的治疗策略。

高分辨肛肠测压对难治性肠易激综合征分型诊断的临床意义

[目的]探讨高分辨肛肠测压对难治性肠易激综合征(IBS)患者的分型诊断及临床个体化治疗的意义。[方法]难治性IBS患者50例进入本研究。根据罗马Ⅲ标准,50例分为:便秘型IBS(IBS-C)15例,腹泻型IBS(IBSD)20例,混合型IBS(IBS-M)10例,不定型IBS(IBS-U)5例。50例均接受高分辨肛门直肠测压;根据高分辨测压结果分型以及评价高分辨肛肠测压分型与罗马Ⅲ标准分型的一致性,并根据患者意愿给予治疗。21例同时接受常规药物治疗和生物反馈治疗(联合治疗组);29例按常规药物治疗(常规治疗组)。所有患者治疗时间均为1个月。[结果]50例患者根据高分辨肛门直肠测压结果分型,与罗马Ⅲ标准比较,一致性尚好,Kappa值0.626。高分辨肛肠测压结果显示IBS-D中有10例应归为IBS-M;IBS各亚型患者中伴有功能性排便障碍比例较高(56%)。治疗效果按照症状积分下降判断。联合治疗组21例中20例有明显效果,1例无效;常规治疗组29例中19例有效,10例无效。联合治疗组较常规治疗组效果显著,2组比较差异有统计学意义(χ~2=4.66,P<0.05)。[结论]高分辨肛肠测压检查对难治性IBS分型与罗马Ⅲ标准分型有较高的一致性,对难治性IBS患者的症状能提供病理生理改变的证据,能指导IBS患者个体化治疗。联合生物反馈治疗能明显提高难治性IBS患者的治疗效果。

心脏增强MRI在冠状动脉造影基本正常急性心肌梗死一例中的应用及文献分析

目的总结1例冠状动脉造影基本正常诊断急性心肌梗死的病例,探讨心脏增强MRI在冠状动脉造影基本正常心肌梗死患者中的应用。方法 2013年10月17日,1例老年男性患者于在局部麻醉下行冠状动脉造影术,术中见左右冠状动脉轻度狭窄,但患者心电图动态演变及心肌标志物异常,符合急性心肌梗死的临床演变过程,结合患者病程第6天行心脏增强MRI确诊急性心肌梗死,检索国内外期刊数据库,探索心脏增强MRI在急性心肌梗死诊断中应用价值及意义。结果作为冠状动脉病变诊断金标准的冠状动脉造影对于一些冠状动脉偏心狭窄、边支血管狭窄及冠状动脉痉挛等造成的心肌梗死诊断有一定局限性,心脏增强MRI具有可精确测量心肌梗死后心肌变薄的程度、良好显示缺血心肌的功能性改变等优势。结论心脏增强MRI检查对诊断冠状动脉造影正常的心肌梗死具有重要意义。

迷走神经电刺激抑制NF-κB信号通路对结肠炎大鼠血管内皮功能的损伤

[目的]观察迷走神经电刺激(vagus nerve stimulation,VNS)对结肠炎大鼠胸主动脉形态、功能的影响,探讨其对结肠炎大鼠血管内皮损伤的作用。[方法]将健康SD大鼠随机分为对照组(15只)、葡聚糖硫酸钠(DSS)组(45只),对照组不作任何处理,DSS组通过饮用5%DSS诱导构建结肠炎模型。将DSS组大鼠随机选择30只又分为DSS+VNS组和DSS+Sham组,每组15只;DSS+VNS组给予大鼠VNS,而DSS+Sham组进行假手术。HE染色检测各组大鼠结肠和胸主动脉组织病理学变化,酶联免疫吸附实验检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和内皮素-1(ET-1)的含量,比色法检测胸主动脉中亚硝酸盐/硝酸盐的浓度,实时荧光定量PCR检测胸主动脉中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA和血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)mRNA的表达水平,免疫组织化学染色检测胸主动脉中NF-κB p65阳性细胞表达情况,Western blot检测胸主动脉中NF-κB p65、κBα以及p-lκBα蛋白表达水平。[结果](1)与对照组比较,DSS组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和ET-1的含量升高,血管形态发生病变,内皮细胞脱落,胸主动脉中亚硝酸盐/硝酸盐浓度降低,ICAM-1和VCAM-1m RNA表达升高,NF-κB p65阳性表达率高,NF-κB p65和p-lκBα的蛋白表达水平升高而WBα蛋白表达水平降低,变化均显著(P<0.01)。(2)与DSS组和DSS+Sham组比较.DSS+VNS组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和ET-1的含量下降,大鼠血管形态明显改善并抑制了内皮细胞脱落的现象,胸主动脉中亚硝酸盐/硝酸盐浓度上升,ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达降低,NF-κB p65阳性表达率下降,同时抑制了NF-κB p65和p-lκBα的蛋白表达水平升高以及lκBα蛋白表达水平降低,变化均显著(P<0.01)。而DSS+Sham组与DSS组比较,这些变化差异不显著(P>0.05)。[结论]VNS能在DSS诱导的结肠炎大鼠中起到抗炎作用.可以减轻炎症过程中的血管内皮损伤,这一过程可能是通过抑制NF-κB信号通路实现的。