影响正常口腔念珠菌检出率的方法学研究

目的 :研究不同检测方法对正常口腔念珠菌检出率的影响 ,寻找一种比较简便可靠的检测方法。方法 :以健康的平均年龄 7.4岁的儿童为检测人群 ,比较不同的取样部位 ,取样方法 ,检测方法 ,被检人群口腔中白色念珠菌以及其他念珠菌的检出率。结果 :取样和检测方法对检出率有不同程度的影响 ,PCR检测方法的检出率显著高于培养法。结论 :黏膜拭子加离心 ,和CHROMagarCandidaTM鉴定培养基相结合的方法是一种简便理想的分离培养方法 ,PCR方法则敏感度更高。

白假丝酵母菌药物流出泵基因在生物膜中表达的动态研究

目的动态观察白假丝酵母菌生物膜形成过程中耐药性产生相关的药物流出泵基因的表达和耐药性的变化情况,并分析该类基因的表达与生物膜耐药性产生的相关性。方法利用人工口腔恒化器形成白假丝酵母菌生物膜结构,收集生物膜形成不同阶段的生物膜态菌细胞,半定量RT-PCR技术分析菌细胞mRNA在生物膜成熟过程中的动态变化;96孔板XTT减低法获得生物膜耐药性的变化情况。结果耐药性随着生物膜的成熟不断增强;与早期生物膜相比,成熟生物膜菌株的药物流出泵基因CDR1表达上调,而MDR1基因的表达在生物膜的整个成熟过程中基本维持不变。结论生物膜成熟程度与耐药性增强有明显正相关性;药物流出泵基因的表达上调与生物膜耐药性的产生有一定关系但改变不一致;在生物膜成熟过程中,CDR1表达水平改变活跃,而MDR1基因相对稳定。

3种白色假丝酵母菌生物膜体外模型的比较研究

目的3种白色假丝酵母菌实验生物膜体外模型,观察生物膜形成的动态过程,比较3种模型研究结果的相关性。方法白色假丝酵母菌模式株ATCC 90038,分别用96孔板法,载玻片与6孔板法,以及连续培养法形成实验生物膜,荧光倒置显微镜观察生物膜的结构,XTT减低法定量检测生物膜的形成过程,比较3种方法形成的白色假丝酵母菌生物膜。结果3种方法都可以形成成熟的生物膜结构,定量分析有明显相关性。结论可以根据试验目的选择不同的白色假丝酵母菌实验生物膜的体外研究模型。

附着状态对口腔白色念珠菌ALS基因mRNA的影响

目的比较生物膜和游离状态下,白色念珠菌ALS基因在mRNA水平上的表达差异。方法一步法RT_PCR观察白色念珠菌临床分离株和标准菌株,在游离状态和生物膜状态下ALS1和ALS4的mRNA的丰度差异。结果白色念珠菌临床分离株在生物膜状态下,ALS1和ALS4的mRNA丰度明显强于游离状态,而标准株在游离状态和生物膜状态下,ALS1和ALS4的mRNA丰度没有显著性差异。结论生物膜状态下的白色念珠菌,ALS基因在转录水平的表达有增强,提示该基因在生物膜形成发展中可能有一定的作用,但其增强的程度在菌株之间可能有较大的差别。

各年龄段儿童口腔中念珠菌的分布研究

目的研究以白色念珠菌为代表的念珠菌群在不同年龄阶段儿童口腔中的分布情况。方法对4个不同年龄阶段的儿童口腔中的念珠菌群进行研究,颊黏膜拭子取样,鉴定培养基培养鉴定,比较培养法和PCR法对其中一组样本的白色念珠菌检出率的影响。结果念珠菌的检出率分别是:新生儿7.5%,乳牙列儿童组70%,混合牙列儿童组56.36%,恒牙列儿童组49.12%;白色念珠菌的比例各有不同,PCR方法比培养法更加敏感。结论各个年龄阶段儿童口腔中均有念珠菌的检出,但检出率不同,白色念珠菌是主要成分。

牙髓毛细淋巴管的超微结构观察

目的 :观察人正常牙髓毛细淋巴管的超微结构特点。方法 :牙髓包埋块不经半薄定位 ,直接制作超薄切片 ,经电镜观察。结果 :内皮细胞间有 3种基本连接方式 ,重叠连接 (5 1% ) ,端端连接 (36 1% ) ,插入连接 (10 6 % ) ,内皮细胞中可见到Weibel Palade小体、脂褐素和大量大小不等的囊泡。结论 :人正常牙髓毛细淋巴管的超微结构有其自身特点。

药物流出泵基因在白假丝酵母菌生物膜耐药性产生机制中的作用

目的利用药物流出泵基因缺陷株,初步阐明药物流出泵基因CDR1、CDR2、MDR1在生物膜耐药性产生和表现型耐药菌株产生中的作用。方法以3种咪唑类抗真菌药物以及CDR1药物流出泵抑制剂作用于药物流出泵基因缺陷株形成的生物膜,采用XTT法和菌落计数的方法,分析药物流出泵基因在生物膜耐药性产生中的作用。结果药物流出泵基因对缺陷株形成的24h生物膜SMIC80影响不大,生物膜表现型耐药株的产生与药物流出泵基因有关,抗真菌药物联合CDR1基因抑制剂在一定程度上能够帮助杀灭白假丝酵母菌生物膜耐药株。结论药物流出泵基因对24h生物膜表现出来的耐药性影响不大,而对生物膜产生的耐药株有重要作用。

全科医师培养背景下关于口腔医学七年制培养的几点思考

培养高素质的口腔医学人才是提高人们生活质量的要求。近期国家提出"5+3"模式培养全科医师,这一计划对口腔医学七年制的培养有很大影响。目前七年制作为综合素质高的群体,却存在培养目标不明确、培养方案与五年制雷同等问题。文章就如何明确七年制口腔医学生的培养目标,加强顶层设计、按需培养,创新改革培养模式和方法,强化实践技能,避免与"5+3"培养模式同质化竞争,对口腔医学七年制学生的培养提出了新的思路和想法。

口腔链球菌生物膜与信息传递

生物膜是细菌自然状态下的生存方式,生物膜中存在复杂的物质及信息交流,这种交流对生物膜的形成有重要意义。口腔牙菌斑是典型的生物膜结构,生物膜中链球菌的生长方式及基因表达情况,与游离状态的细菌相比有较大差异。细菌在感受态时可以获得外源DNA,定额感受机制介导了链球菌进入感受态,该机制由com基因家族控制,基因的表达产物和调控基本过程已比较清楚。搞清牙菌斑中细菌的信息传递机制,有利于临床上控制由牙菌斑细菌导致的疾病——龋病和牙周病。

变形链球菌临床分离株乳酸脱氢酶遗传多态性研究

目的探讨变链菌临床株(血清型C)乳酸脱氢酶基因多态性与细菌致龋力及酶活性的关系。方法高龋组变链菌34株,无龋组变链菌36株;其中24株乳酸脱氢酶高活性,21株低活性。以细菌组DNA为模板扩增结构基因ldh,对目的基因进行限制性片段长度多态性分析(RFLP),并行测序分析。结果Mse酶切ldh-RFLP表现A、B两种基因型,而Hph、Mnl、Dde、Nla和Alu消化扩增产物未发现多态。确切概率法单侧检验发现B基因型菌株在无龋组的检出高于高龋组(P<0.05),双侧检验两种基因型在不同酶活性组的分布不同(P<0.05),低活性组B基因型菌株的比例高于高活性组。测序证实特异碱基突变引起酶切位点改变而产生多基因型。结论变链菌临床分离株乳酸脱氢酶基因较为保守,但仍存在碱基变异。研究提示乳酸脱氢酶基因多态性与酶活性差异相关,并可能在一定程度上与龋的低敏感性相关。

上颌第二恒磨牙近中颊根第二根管的离体牙研究

目的研究上颌第二恒磨牙近中颊根第二根管(MB2)的发生情况,为提高上颌第二恒磨牙根管治疗的成功率提供解剖学基础。方法于山东地区收集离体上颌第二恒磨牙118颗,采用斜方型开髓洞型开髓,利用小号C型锉探查并疏通根管,记录MB2的发现率及扩通率;拍摄X线牙片,记录近中颊根的根管数目、形态和类型;在根管显微镜下观察并应用数显卡尺测量近中颊根主根管和MB2根管口之间的距离,确定根管口的位置;记录近中颊根的根尖孔数目,并测量解剖根尖孔至解剖根尖的距离。结果118颗上颌第二恒磨牙中,有58颗发现MB2,发现率为49.15%;其中48颗牙齿的MB2被扩通,扩通率为82.76%。108颗3根牙中,近中颊根的根管形态为Ⅰ型者有50颗,占46.30%;Ⅱ型及Ⅲ型者分别为14和34颗,占12.96%和31.48%。近中颊根主根管口与MB2根管口的平均距离为1.26mm;近中颊根解剖根尖孔至解剖根尖的距离平均值为1.13mm。结论山东地区上颌第二恒磨牙MB2的发现率较高,临床治疗中采用改良的斜方型开髓孔有利于发现MB2,用X线片确定工作长度时需要结合临床综合判断根尖孔的位置。

变形链球菌F-ATPase亚基基因uncEBF基因多态性的研究

目的研究变形链球菌临床分离株耐酸因子F-ATPase亚基c、a、b联合基因uncEBF的遗传多态性,并探讨基因多态与细菌耐酸力的关系。方法选取18株变形链球菌高耐酸株、20株低耐酸株,以特异引物从细菌组DNA扩增uncEBF,行限制性内切酶长度多态性分析(RFLP)和测序比较。结果不同限制性内切酶RFLP产生不同的基因型,测序证实了导致多态出现的基因变异;其中内切酶AluⅠ产生的A、B基因型在不同耐酸力菌株的分布不同(P<0.05),高耐酸性菌株中A型基因uncEBF的检出高于低耐酸力菌株。结论变形链球菌F-ATPase亚基联合基因uncEBF具有明显基因多态性,酸性环境下生存力强的菌株可能出现基因的适应性变异,可认为不同基因型uncEBF分布与耐酸力不同相关。

阿替卡因与利多卡因在磨牙牙髓治疗中镇痛效果的比较

目的研究阿替卡因与利多卡因对牙髓的麻醉效果。方法对246例病人的382个患牙分别用碧兰麻(40g/L阿替卡因加1∶100000的肾上腺素)和20g/L盐酸利多卡因加1∶100000的肾上腺素进行局部浸润麻醉,观察牙髓麻醉效果。对麻醉失败者改用阻滞麻醉继续观察。结果上颌磨牙浸润麻醉,阿替卡因与利多卡因的麻醉效果无差别;下颌磨牙浸润麻醉,阿替卡因的效果略优于利多卡因。但对浸润麻醉失败的病例改用阻滞麻醉后,两者的麻醉效果无明显差别。结论阿替卡因和利多卡因麻醉的镇痛效果近似,麻醉方式在镇痛中起到更重要的作用。

变形链球菌临床株F-ATPase亚基基因uncEBF在mRNA水平的表达

目的:研究变形链球菌临床分离株耐酸因子F-ATPase c、a、b亚基联合基因uncEBF在mRNA水平的表达差异,探讨基因表达水平与细菌耐酸力以及uncEBF基因型的关系。方法:应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件分析,分别对18株来自不同基因型和不同耐酸力变链菌的uncEBF基因表达水平进行评价,以SPSS11.0软件分析和比较mRNA表达的差异。结果:不同基因型及不同耐酸力菌株un-cEBF的mRNA表达水平不同(P<0.05),表现为A基因型uncEBF表达高于B基因型,高耐酸力菌株un-cEBF表达高于低耐酸力菌株。结论:变链菌不同基因型uncEBF基因的表达水平不同,表达水平高低与菌株的耐酸力相关。

白色念珠菌生物膜形成的定量分析和形态学观察

目的:XTT法定量分析并在激光共聚焦显微镜和荧光显微镜下观察白色念珠菌生物膜的动态形成过程。方法:经过血清处理的灭菌玻片在六孔板中形成生物膜,经过荧光染色后在荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下,动态观察生物膜的形成过程,并利用XTT减低法定量分析生物膜的形成过程。结果:形态学和定量分析都表明,白色念珠菌可以在玻片上形成典型的、成熟的生物膜结构,形成过程经过了几个明显的阶段。结论:白色念珠菌形成的生物膜具备典型的微生物生物膜结构。

变形链球菌临床株质子移位膜ATP酶γ亚基基因uncG遗传多态性及mRNA表达水平的研究

目的研究变形链球菌临床分离株质子移位膜ATP酶(F-ATPase)的γ亚基基因uncG的遗传多态性和mRNA表达水平。方法选取在不同龋敏感人群中分离的18株高耐酸和20株低耐酸变形链球菌为实验株,扩增uncG基因,行限制性内切酶长度多态性(RFLP)分析和测序比较,应用RT-PCR法和凝胶成像系统定量软件对20株不同基因型和不同耐酸力变形链球菌uncG基因的mRNA表达水平进行评价和比较。结果ALuⅠ-RFLP和BsrⅠ-RFLP产生A、B、C、D 4种基因型,但4种基因型在不同耐酸力菌株的分布差异没有统计学意义(P>0.05)。不同基因型及不同耐酸力菌株uncG的mRNA表达水平不同,但其差异也没有统计学意义(P>0.05)。结论变形链球菌F-ATPaseγ亚基基因uncG的RFLP基因型和mRNA表达水平具有明显遗传异质性,但对菌株耐酸力没有明显影响。

化疗患者口腔白假丝酵母菌的分布及基因分组研究

目的研究以白假丝酵母菌(S.albicans)为代表的假丝酵母菌在化疗肿瘤患者口腔中的分布情况,并对检出的白假丝酵母菌进行基因分组。方法从390例接受化疗1年以上的肿瘤患者口腔中取样,采用颊黏膜拭子法,CHROMagar CandidaTM鉴定培养基初步鉴定,根据白假丝酵母菌25S rDNA基因多态性设计引物,根据PCR产物多态性进行基因分组。结果肿瘤患者口腔假丝酵母菌检出率为53.85%(210/390),白假丝酵母菌的检出率为48.21%(188/390),其余为光滑假丝酵母菌5.64%(22/390);白假丝酵母菌基因分组A、B、C组均有检出,其中以B组为主,59.57%(112/188)。结论肿瘤患者口腔的假丝酵母菌以白假丝酵母菌为主,与健康人群的口腔白假丝酵母菌A组占有绝对多数的情况不同,B组白假丝酵母菌在化疗患者口腔中占主导地位。

手用ProTaper镍钛锉临床折断原因的初步分析

目的通过记录手用ProTaper镍钛锉临床折断前使用次数,观察其断口形貌的改变,分析折断原因。方法收集临床中记录的废弃手用ProTaper镍钛锉21套(S1-F2)共105支和一套未经使用的手用ProTaper镍钛锉对比,通过肉眼和扫描电镜对其外观和断口形貌进行观察,比较不同使用次数器械受损情况。结果所有根管锉的切割刃肉眼观察无缺陷。SEM观测根管锉的侧面形貌显示在使用过的根管锉靠近断口区,有许多裂纹,呈锐利Ⅰ型平面断口,应属于弯曲疲劳折断,而未使用过的新根管锉表面未见裂纹。F2折断机会多,折断前使用次数最少,一般在使用45～50次左右易断;S1在55～60次易断,其次为F1,最不易折断的为S2。结论在熟练掌握正确的使用技术后,手用ProTaper镍钛锉在使用40～50个根管后容易发生断针。