调节维甲酸受体稳定性的化合物细胞筛选体系的建立

目的·构建可用于发现调节维甲酸受体(retinoic acid receptors,RARα)蛋白稳定性的化合物的细胞筛选体系。方法·对pMSCV质粒进行改造,插入绿色荧光蛋白(EGFP)-RARα融合基因和红色荧光蛋白(Ds Red)基因,两者之间以内部核糖体结合位点(IRES)序列分隔;构建成功的质粒稳定转染急性早幼粒细胞白血病细胞NB4,流式细胞术分析全反式维甲酸、丙戊酸钠、阿糖胞苷、来那度胺、依托泊苷、孟鲁司特纳及藤黄酸处理细胞后EGFP与DsRed的荧光信号的变化,间接反映RARα蛋白表达水平;并通过Western blotting实验进一步验证阳性化合物对RARα蛋白水平的影响。结果·成功构建了蛋白稳定性双荧光筛选体系,并发现丙戊酸钠可有效使RARα蛋白的表达水平稳定。结论·双荧光筛选系统可用于调节RARα蛋白稳定性的化合物的筛选。丙戊酸钠是一个新的稳定RARα的化合物。该方法对建立稳定其他蛋白的化合物筛选系统具有参考价值。

阿的平诱导结外NK/T淋巴瘤细胞凋亡的实验研究

背景与目的:随着含有门冬酰胺酶化疗方案以及局部放疗和免疫检查点抑制剂的成功应用,结外NK/T细胞淋巴瘤[extranodal natural killer(NK)/T-cell lymphoma,ENKTCL]患者缓解率和无病生存率较以往有显著提高,然而仍有相当一部分进展期ENKTCL患者成为复发/难治性病例。前期研究发现,抗寄生虫小分子化合物阿的平可以抑制包括血液肿瘤在内多种肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡,可能成为新型抗肿瘤药物。进一步探究阿的平对ENKTCL细胞的影响及其可能作用机制。方法:以不同浓度阿的平处理ENKTCL细胞系SNK6和NK92(分别由上海交通大学医学院附属新华医院血液内科和上海血液学研究所提供),观察细胞生长和形态并采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测其增殖,同时应用流式细胞术检测细胞周期、凋亡率以及细胞内线粒体跨膜电位和活性氧水平,进一步利用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞自噬相关蛋白LC3B和P70表达的变化。结果:SNK6和NK92细胞经阿的平处理48 h后,细胞增殖抑制率分别为(47.08±2.19)%和(30.46±7.95)%,明显高于对照组[(11.85±1.89)%和(10.08±2.01)%,P值均<0.05],阿的平处理24 h后处理组SNK6和NK92细胞凋亡率分别达到(86.45±6.54)%和(76.5±10.8)%;显著高于对照组[(3.3±3.24)%和(2.64±1.67)%,P值均<0.05]。同时阿的平处理组SNK6和NK92细胞周期均发生明显S期阻滞,但细胞内线粒体跨膜电位均无显著变化。进一步研究还发现,阿的平能够促使SNK6细胞内活性氧水平升高并抑制SNK6和NK92细胞内P70蛋白磷酸化,同时上调LC3B蛋白表达。结论:阿的平能够诱导ENKTCL细胞增殖阻滞和凋亡,其机制可能与阿的平介导细胞内活性氧水平升高以及抑制mTOR信号通路进而激活细胞自噬有关。

爱心汇聚,共建生态文明校园

在5月28日广州举办的中华儿慈会"开学有爱·防疫无‘碍’——生态校园疫情防控行动"暨"全国生态文明校园公益平台"启动仪式上,钟南山院士亲临现场并致辞。2017年,为贯彻落实中共中央、国务院《"健康中国2030"规划纲要》精神,中国教育装备行业协会联合中华少年儿童慈善救助基金会共同发起"中国生态校园"行动,并发布了《中国"生态校园"行动方案》。2019年,为进一步落实"生态校园"行动方案,深化推动全国中小学生态环境教育,提升青少年生态环境保护理念,填补青少年生态环境教育的公益事业空白,中华儿慈会"青少年生态环境教育专项基金"在北京正式成立。

小学英语阅读教学的优化与提升

英语是小学阶段的基础学科,而阅读教学是小学英语教学的重要组成部分,在提高学生的语言表达能力、思维能力和阅读能力等方面发挥着不可估量的作用,因此优化和提升小学英语阅读教学至关重要。但是当前在小学英语阅读教学中仍存在教学方法落后、学生被动学习、兴趣低下等诸多问题,阻碍了小学英语阅读教学的进程的开展,大大影响了学生阅读能力的提升。本文从创新教学放个、突出学生主体和传授阅读技巧三方面出发,分析和探究小学英语阅读教学优化与提升的有效策略。