肺癌细胞外泌体miR-24-3p调控CD8^(+)T细胞抗肿瘤的功能及机制研究

目的:探究肺癌细胞外泌体miR-24-3p调控CD8^(+)T细胞抗肿瘤的功能及机制。方法:将16HBE exo、A549 exo、H522 exo、H460 exo、miR-NC exo、miR-24-3p exo与CD8^(+)T细胞共孵育(16HBE exo组、A549 exo组、H522 exo组、H460 exo组、miR-NC exo组、miR-24-3p exo组),与PBS共孵育组(PBS组)作为对照,CD8^(+)T与miR-24-3p exo共孵育后转染FGF11质粒(miR-24-3p exo+FGF11组)。CCK8法检测CD8^(+)T细胞的增殖能力。双荧光素酶报告基因实验验证miR-24-3p和FGF11的靶向关系。将各组CD8^(+)T细胞与A549细胞以20∶1的比例共孵育4 h(16HBE exo/CD8^(+)T组、A549 exo/CD8^(+)T组、H522 exo/CD8^(+)T组、H460 exo/CD8^(+)T组、miR-NC exo/CD8^(+)T组、miR-24-3p exo/CD8^(+)T组、PBS/CD8^(+)T组、miR-24-3p exo+FGF11/CD8^(+)T组),Elisa检测共孵育后细胞上清中INF-γ和IL-2的浓度,LDH法检测CD8^(+)T细胞对A549细胞的杀伤能力。结果:相比于PBS组,A549 exo组、H522 exo组、H460 exo组CD8^(+)T细胞增殖能力显著降低(P<0.05)。A549 exo/CD8^(+)T组、H522 exo/CD8^(+)T组、H460 exo/CD8^(+)T组细胞上清中INF-γ和IL-2的浓度显著下降(P<0.001),CD8^(+)T细胞杀伤能力亦显著下降(P<0.001)。双荧光素报告基因检测结果显示FGF11为miR-24-3p的靶基因。miR-24-3p exo组CD8^(+)T细胞增殖能力显著低于miR-NC exo组,miR-24-3p exo+FGF11组CD8^(+)T细胞增殖能力显著高于miR-24-3p exo组(P<0.05)。miR-24-3p exo/CD8^(+)T组细胞上清中INF-γ和IL-2浓度及CD8^(+)T细胞杀伤能力均显著低于miR-NC exo/CD8^(+)T组(P<0.001), miR-24-3p exo+FGF11/CD8^(+)T组细胞上清中INF-γ和IL-2浓度及CD8^(+)T细胞杀伤能力显著高于miR-24-3p exo/CD8^(+)T组(P<0.001)。结论:肺癌细胞外泌体miR-24-3p可通过靶向抑制FGF11而抑制CD8^(+)T细胞的抗肿瘤功能。

还原型谷胱甘肽对顺铂化疗方案治疗非小细胞肺癌的肾毒性损伤影响

目的研究还原型谷胱甘肽对顺铂化疗方案治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的肾毒性损伤影响。方法选择我院2016年2月至2017年6月收治的104例晚期NSCLC患者,采用随机数字法将其分为对照组和观察组,每组52例。对照组患者接受以顺铂为主的化疗方案治疗,在此基础上,观察组患者给予还原型谷胱甘肽治疗。比较两组患者的近期化疗总有效率及化疗前后的肝功能和肾功能指标。结果观察组患者的RR高于对照组(36.54%vs.19.23%,P=0.04);化疗后,观察组的ALT、AST、ALP、尿β_2-MG、BUN、Scr、CysC、NGAL水平均低于对照组(P <0.01),血Mg^(2+)水平明显高于对照组(P <0.01)。结论还原型谷胱甘肽能明显减轻顺铂化疗方案治疗NSCLC的肝肾毒性,值得在临床推广。

胱抑素C及β2-微球蛋白中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白联合检测在肺癌患者化疗相关肾损伤早期检测中的作用

目的探讨胱抑素C、β2-微球蛋白、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白与传统指标肌酐、血尿素在肺癌患者化疗后肾脏早期功能损伤的检测上的应用价值。方法选择本院63例60岁以上肺癌患者，采用前瞻性研究，检测化疗前后血清胱抑素C、尿液β2-微球蛋白、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白与传统指标血清肌酐、尿素水平，根据化疗时间节点将数据分为化疗前、化疗当天和化疗结束组。结果肺癌患者化疗后血清胱抑素C、尿液β2-微球蛋白、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白水平均明显升高，而血清肌酐、尿素水平升高不明显，随着接触化疗药物后的时间延长，前三者水平继续升高；化疗当日CysC、β2-MG、NGAL三组敏感性的多样本率的Pearson X2=31．32，P=0．00，化疗结束日，CysC、β2-MG、NGAL三组敏感性的多样本率的Pearson x2=60．38，P=0．00。结论肺癌患者化疗后血清胱抑素C、尿液β2-微球蛋白、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对肾脏早期功能损伤有较好的诊断作用，是肾脏早期功能损伤的理想检测指标，优于传统肾功能检测项目血清肌酐、尿素。

还原型谷胱甘肽预防胸部恶性肿瘤患者化疗相关性肾损伤效果

目的探讨还原型谷胱甘肽(GSH)预防胸部恶性肿瘤患者化疗相关性肾损伤的疗效,以及其对血清胱抑素C(Cys C)、尿β2微球蛋白(β2-MG)和中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)水平的影响。方法选取自2017年10月至2018年2月收治的胸部恶性肿瘤患者90例为研究对象,随机分为A组(n=45)与B组(n=45)。A组肺癌患者采用长春瑞宾+顺铂或培美曲塞+顺铂方案化疗,食管癌患者采用顺铂+氟尿嘧啶+亚叶酸钙方案化疗。B组在A组治疗基础上给予GSH治疗。分别在化疗前及化疗后24 h检测患者血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、Cys C水平,在化疗前及顺铂静脉点滴结束后2 h检测患者尿β2-MG、NGAL水平,并对患者肾功能损伤检出率进行比较,记录不良反应发生情况。结果化疗后,A组Scr、BUN水平较化疗前明显升高,且明显高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);B组Scr、BUN水平较化疗前无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。化疗后,两组血Cys C、尿β2-MG、NGAL水平均较化疗前升高,且A组高于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。化疗后,采用Scr、BUN联合判断肾功能损伤,A组检出率为35.6%(16/45),B组检出率为2.2%(1/45);采用血Cys C、尿β2-MG、NGAL联合判断肾功能损伤,A组检出率为57.8%(26/45),B组检出率为8.9%(4/45)。血Cys C、尿β2-MG、NGAL联合检查的检出率均高于Scr、BUN联合检查,且B组肾损伤检出率均低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。B组患者骨髓抑制、肝损伤发生率分别为6.7%(3/45)、2.2%(1/45),均低于A组的22.2%(10/45)、13.3%(6/45),差异有统计学意义(P<0.05)。结论给予胸部恶性肿瘤化疗患者GSH治疗,能明显减少肾功能损伤,抑制不良反应发生。

miR-433-3p通过靶向SMC4抑制IL-17对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的促进作用

为探讨IL-17对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制,用IL-17(20 ng/mL)处理肺癌细胞A549和HCC827 48 h,采用Western blotting、qRT-PCR、Transwell试验、MTT试验和双荧光素酶报告基因试验分别检测A549和HCC827细胞中细胞周期素D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metallopro-teinase 9,MMP-9)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白(cyclin-dependent kinase inhibitor protein, p21)、染色体结构维持蛋白4(structural maintenance of chromosome 4,SMC4)的蛋白表达,miR-433-3p、SMC4的mRNA表达,细胞的增殖、迁移和侵袭及细胞的荧光素酶活性。结果显示,与对照组比较,IL-17组A549和HCC827细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著升高(P<0.05),miR-433-3p表达水平显著下调(P<0.05),SMC4表达水平显著上调(P<0.05),同时Cyclin D1、MMP-2、MMP-9水平显著上调(P<0.05);miR-433-3p与SMC4存在结合位点;分别与anti-miR-NC组、pcDNA组比较,anti-miR-433-3p组、pcDNA-SMC4组A549和HCC827细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著升高(P<0.05),同时Cyclin D1、MMP-2、MMP-9水平显著上调(P<0.05);miR-433-3p可抑制IL-17诱导的细胞增殖、迁移和侵袭的能力,并下调Cyclin D1、MMP-2、MMP-9水平。该研究提示,IL-17助力于肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与抑制miR-433-3p/SMC4通路的活性相关。

经纤维支气管镜支气管肺泡灌洗术治疗老年肺癌患者的临床效果

目的分析经纤维支气管镜支气管肺泡灌洗术治疗老年肺癌患者的临床效果。方法选取2016—2017年承德市中心医院心胸外科收治的老年肺癌患者96例,根据治疗方法分为对照组和观察组,各48例。对照组患者采用肺叶切除术+纵隔淋巴结清扫术治疗,观察组患者在对照组基础上对患侧肺进行经纤维支气管镜支气管肺泡灌洗术治疗。比较两组患者术后临床症状改善时间(包括体温及白细胞计数恢复正常时间、咳痰消失时间、拔管时间、特级护理改二级护理时间)、术后脱离呼吸机24 h动脉血气分析指标[包括pH值、动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)]、术前及术后3 d血清炎性因子[包括C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素8(IL-8)、降钙素原(PCT)]水平,并观察两组患者术后并发症发生情况。结果 (1)观察组患者体温及白细胞计数恢复正常时间、咳痰消失时间、拔管时间及特级护理改二级护理时间短于对照组(P<0.05)。(2)观察组患者术后脱离呼吸机24 h pH值、PaO2高于对照组,PaCO2低于对照组(P<0.05)。(3)两组患者术前血清CRP、TNF-α、IL-8、PCT水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者术后3 d血清CRP、TNF-α、IL-8、PCT水平低于对照组(P<0.05)。(4)两组患者术后并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论经纤维支气管镜支气管肺泡灌洗术可有效缩短老年肺癌患者术后临床症状改善时间,改善术后动脉血气分析指标,减轻术后炎性反应,且安全性较高。

交互式医学图像控制系统软件三维重建在肺腺癌复杂肺段切除术中的应用

目的评价交互式医学图像控制系统(MIMICS)软件行三维重建联合胸腔镜在肺腺癌复杂肺段切除术中的应用价值。方法以2016年1月—2017年6月在河北医科大学第四医院进行单纯胸腔镜肺段切除术的42例患者为对照组,以2017年7月—2018年7月期间行MIMICS软件三维重建联合胸腔镜肺段切除术的48例患者为观察组。比较2组围手术期临床指标、手术并发症;比较术前和拔除胸腔引流管后2组肺功能指标,包括1 s用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、每分钟最大通气量(MVV)。结果2组患者病灶数量、结节性质差异无统计学意义(均P>0.05),观察组并发症发生率(10.42%,5/48)显著低于对照组(28.57%,12/42,P<0.05)。观察组手术时间、术中出血量、术后胸管留置时间、术后住院时间显著短于对照组(均P<0.05)。2组术前FEV_(1)、FVC、MVV差异无统计学意义(均P>0.05);拔除胸腔引流管后,2组患者肺功能均显著低于术前,但观察组FEV_(1)、FVC、MVV显著高于对照组[(1.67±0.52)L vs.(1.38±0.69)L,(1.73±0.64)L vs.(1.48±0.51)L,(54.27±7.14)L/min vs.(50.36±6.08)L/min,均P<0.05]。结论对于行复杂肺段切除术的肺腺癌患者,采用MIMICS软件在术前进行三维重建有利于在术中分辨肺部解剖结构,确定结节位置,有利于提高手术准确性,缩短手术时间,减少并发症,减轻手术对肺功能的损伤,利于术后康复。

胸腔镜肺叶切除术后肺部感染与TNF-α和CYP1A2基因多态性的关联性

目的分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及细胞色素P450酶1A2(CYP1A2)基因多态性与胸腔镜肺叶切除术后肺部感染的关系。方法选择2017年11月-2019年11月于承德市中心医院行胸腔镜肺叶切除术患者156例为研究对象,根据术后是否并发肺部感染将患者分为肺部感染组(n=62)和无肺部感染组(n=94),采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法检测TNF-α及CYP1A2基因单核苷酸多态性(SNPs)位点多态性,采用Logistic回归分析探讨TNF-α及CYP1A2多态性位点与胸腔镜肺叶切除术后肺部感染的相关性。结果肺部感染组TNF-α基因rs1800629位点GG基因型、G等位基因频率分别为62.90%、77.42%低于无肺部感染组(P<0.05),GA、AA基因型和A等位基因频率分别为29.03%、8.06%和22.58%高于无肺部感染组(P<0.05),rs1800630位点CC、CA、AA基因型和C、A等位基因频率以及rs361525位点GG、GA、AA基因型和G、A等位基因频率与无肺部感染组比较差异无统计学意义;肺部感染组CYP1A2基因rs762551位点CC基因型和C等位基因频率分别为27.42%、51.61%低于无肺部感染组(P<0.05),CA、AA基因型和A等位基因频率分别为48.39%、24.19%和48.39%高于无肺部感染组(P<0.05);TNF-α基因rs1800629位点A等位基因与胸腔镜肺叶切除术后肺部感染风险存在明确相关性(P<0.05),显性模型rs1800629位点多态性差异有统计学意义(P<0.05);CYP1A2基因rs762551位点A等位基因与胸腔镜肺叶切除术后肺部感染风险存在明确相关性(P<0.05)。结论 TNF-α基因rs1800629位点A等位基因以及CYP1A2基因rs762551位点A等位基因与肺癌患者胸腔镜肺叶切除术后肺部感染风险有关。