环状RNA CDR1-AS通过靶向miR-1277对肺癌细胞增殖、凋亡和免疫因子表达的影响

目的:探究环状RNA(circRNA)小脑变性相关蛋白1反义转录物(CDR1-AS)对肺癌细胞增殖、凋亡和免疫因子表达的影响及可能机制。方法:分别以癌旁组织、支气管上皮细胞BEAS-2B为对照,qRT-PCR检测肺癌组织、肺癌细胞系(NCI-H23、H1299、NCI-H446)中CDR1-AS、miR-1277表达。以肺癌H1299细胞为研究对象,分别转染CDR1-AS小干扰RNA(si-CDR1-AS)、miR-1277模拟物或共转染si-CDR1-AS与miR-1277抑制剂后,CCK-8实验、克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞活性、克隆形成数、细胞凋亡率,ELISA检测细胞培养上清液中免疫因子(TNF-α、IFN-γ)表达。双荧光素酶报告基因实验验证CDR1-AS与miR-1277的调控关系。结果:与癌旁组织或BEAS-2B细胞比较,肺癌组织或细胞系(NCI-H23、H1299、NCIH446)中CDR1-AS表达升高(P<0.05),miR-1277表达降低(P<0.05)。沉默CDR1-AS或过表达miR-1277后,H1299细胞活性、克隆形成数及TNF-α分泌量降低(P<0.05),细胞凋亡率、IFN-γ分泌量升高(P<0.05)。CDR1-AS靶向结合miR-1277,且沉默CDR1-AS的H1299细胞中miR-1277表达升高(P<0.05)。下调miR-1277逆转沉默CDR1-AS对H1299细胞增殖、凋亡及免疫因子表达的影响。结论:CDR1-AS在肺癌组织和细胞系中表达上调,沉默其表达可通过靶向上调miR-1277抑制肺癌H1299细胞增殖及肿瘤细胞免疫逃逸,并诱导细胞凋亡。

非酒精性脂肪性肝病患者血清脂联素变化及其相关因素分析

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清脂联素的变化及其相关因素。方法选取NAFLD患者60例,健康者60例作为对照组,ELISA法测定血清脂联素水平,并与体质指数(BMI)、腰臀比(WHR)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(Tchol)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)、稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)相结合,判定脂联素在NAFLD中的作用。结果NAFLD组血清脂联素水平明显低于对照组[(12.69±2.83)mg/Lvs(22.83±4.61)mg/L,P<0.01)];Spearman分析提示脂联素与ALT(r=-0.643)、AST(r=-0.472)、GGT(r=-0.489)、HOMA-IR(r=-0.752)、TG(r=-0.671)、FBG(r=-0.710)、WHR(r=-0.732)、BM(Ir=-0.719)呈负相关(P<0.05),与HDL-C(r=0.567)呈正相关(P<0.05)。Logistic多因素回归分析显示脂联素与HOMA-IR(β=-0.495)、BM(Iβ=-0.314)呈独立负相关(P<0.05)。结论NAFLD患者血清脂联素水平降低,脂联素可能是NAFLD发病过程中起保护作用的脂肪细胞因子。

基于多序列MRI影像组学模型预测宫颈鳞癌病理组织分型

目的探讨基于MR平扫多序列的影像组学模型在预测宫颈鳞癌组织分型的价值。材料与方法回顾性收集103例经病理证实子宫颈鳞癌患者,角化型48例,非角化型55例,按3︰1比例随机分成训练集和测试集。所有患者均在治疗前行常规磁共振平扫成像,经预处理后,逐个序列图像手动勾画三维肿瘤感兴趣区,提取并筛选影像组学特征,在训练集中,分别基于T1、T2、T2抑脂序列图像特征及联合以上多序列图像特征,构建朴素贝叶斯预测模型,并在测试集中进行预测和评价。结果训练集中T1、T2、T2抑脂及联合多序列模型ROC曲线AUC值分别为0.718、0.705、0.756和0.863(P<0.001),组间ROC曲线Delong test检验中显示联合模型ROC曲线与T2、T1模型ROC曲线存在统计学差异,P值分别为0.004和0.018;测试集中联合多序列预测非角化型结果最佳,ROC曲线的AUC值为0.860,P=0.003,准确率为0.720,召回率0.900;组间ROC曲线比较仅发现联合模型ROC曲线与T1模型ROC曲线存在统计学差异,Z=2.200,P=0.027。结论基于MR多序列的影像组学模型能够预测宫颈鳞癌非角化型,并且联合多序列的预测模型预测效果最好。

TNFRSF10D在胶质瘤中的表达及其与免疫细胞浸润的关系

目的分析不同级别胶质瘤中肿瘤坏死因子受体超家族10D(TNFRSF10D)的表达水平及患者的预后情况,并探讨其与肿瘤免疫细胞的关系。方法从TCGA/CGGA数据库中下载胶质瘤患者的基因表达谱数据和临床信息。比较TNFRSF10D在不同病理分级、TCGA分级及分子分型组织样本中的表达差异。采用Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验评价TNFSFR10D的预后价值,采用基因集富集分析(GSEA)探索TNFRSF10D在胶质瘤中的免疫相关基因集,采用CIBERSORT分析TNFRSF10D与胶质瘤免疫微环境细胞构成的关系。分析TNFRSF10D表达水平与肿瘤纯度和免疫细胞浸润程度之间的关系,通过胶质瘤石蜡标本免疫组化染色进行验证。结果TNFRSF10D的表达与胶质瘤的恶性程度呈正相关,并与患者的预后不良显著相关。TNFRSF10D的表达水平可影响胶质瘤免疫微环境中免疫细胞的构成。TNFRSF10D高表达与巨噬细胞的富集有较强的相关性。结论TNFRSF10D可影响胶质瘤的免疫过程,并可作为胶质瘤的独立预后因素。

三阴性乳腺癌干细胞研究进展

三阴性乳腺癌(TNBC)富含肿瘤干细胞(CSC),并具有独特的维持其CSC表型的分子机制和肿瘤微环境.CSC可促进TNBC的化疗耐药与复发.阻断关键分子或改变肿瘤微环境能够削减CSC,进而抑制TNBC的肿瘤生长,并逆转化疗耐药.

五味子乙素通过激活Caspase-3影响三阴乳腺癌增殖和凋亡

目的观察中药五味子乙素对三阴乳腺癌细胞株MDA-MB-231裸鼠成瘤能力的影响及机制。方法利用MTT实验验证五味子乙素对三阴乳腺癌细胞株MDA-MB-231的毒性作用;利用流式细胞术检测不同浓度的五味子乙素对MDA-MB-231细胞凋亡的影响;利用裸鼠移植瘤模型分析五味子乙素对乳腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响;利用蛋白免疫印迹方法检测各组移植瘤组织中Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达水平。结果五味子乙素呈剂量依赖性显著抑制MDA-MB-231细胞的体外增殖能力,促进细胞的凋亡,较好地抑制乳腺癌细胞裸鼠移植瘤的生长,明显缩小肿瘤体积。五味子乙素处理后肿瘤裸鼠模型的肿瘤组织中Bax、Caspase-3蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低,说明五味子乙素促进移植瘤细胞凋亡。结论五味子乙素抑制MDA-MB-231细胞增殖并促进凋亡,并抑制裸鼠移植瘤的生长。

658例结直肠癌错配修复蛋白的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨错配修复（mismatch repair，MMR）蛋白MLH1、MSH2、MSH6和PMS2在结直肠癌中的表达情况及其与患者临床病理特征之间的关系。方法收集中国医科大学附属盛京医院2016年1月至2017年1月间658例连续的结直肠癌病例，患者中男性409例，女性249例；年龄20-92岁，平均年龄（63±5）岁。采用免疫组织化学EnVision法检测结直肠癌组织中MLH1、MSH2、MSH6和PMS2蛋白表达缺失的情况，和MLH1蛋白表达缺失的结肠癌病例中的BRAF突变，分析MMR蛋白表达缺失与结直肠癌患者临床病理特征之间的关系。结果658例结直肠癌有44例（6．7％）发生MMR蛋白表达缺失，MLH1、MSH2、MSH6、PMS2蛋白表达缺失率分别为4．1％（27／658）、2．3％（15／658）、2．4％（16／658）、4．3％（28／658）。MMR蛋白表达缺失以MLH1与PMS2表达联合缺失（61．4％，27／44）、MSH2与MSH6表达联合缺失（34．1％，15／44）为主；PMS2和MSH6蛋白表达单独缺失的各有1例（2．3％，1／44）。进行BRAF V600E检测的27例MLH1蛋白缺失的病例中有7例（25．9％）为BRAF阳性，提示该7例患者可能存在因BRAF基因突变导致的MLH1蛋白表达缺失，属于散发型结直肠癌。结直肠癌组织中MMR蛋白表达缺失与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、脉管癌栓、临床分期以及肿瘤血行转移无关（P〉0．05），与更低程度的肿瘤组织分化、组织学类型和发病部位以及肿瘤浸润淋巴细胞数目增加显著相关（P〈0．01）：其中MLH1、PMS2蛋白表达缺失与组织学类型相关（P=0．049，P=0．013），常伴黏液腺癌分化；MLH1、PMS2蛋白表达缺失多发生于右半结肠（P=0．006，P=0．002）；MSH2与MSH6蛋白表达缺失的患者发病年龄相对较小（P=0．014，P=0．023）；MSH2与PMS2蛋白表达缺失与性别相关，MSH2蛋白缺失多发生于女性（P=0．048），PMS2蛋白表达缺失多发生于男性（P=0．031）。结论MMR蛋白缺失结直肠癌患者发病年龄低，组织分化程度低，发生部位多位于右半结肠，癌组织常伴有黏液腺癌分化。

鼠双微体基因2和高迁移率族蛋白B1在骨肉瘤组织的表达及其临床意义

目的探讨鼠双微体基因2(MDM2)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在骨软骨瘤组织和骨肉瘤组织中的表达及其临床意义。方法收集2016年1月至2020年12月辽宁省人民医院和中国医科大学附属盛京医院资料病理学确诊的27例骨软骨瘤组织和80例骨肉瘤组织标本,应用免疫组织化学法检测上述组织MDM2蛋白和HMGB1蛋白的表达水平,采用χ^(2)检验进行统计学分析。结果骨肉瘤组织中MDM2表达率为68.75%(55/80)、明显高于骨软骨瘤组织MDM2表达率[7.41%(2/27)],两者差异有统计学意义(χ^(2)=30.515,P<0.01),MDM2表达水平与骨肉瘤恩内金分期(Eneeking分期)、肺转移明显相关(χ^(2)=5.1239、4.4649,P<0.05),差异有统计学意义。骨肉瘤组织中HMGB1表达率为56.25%(45/80)、明显高于骨软骨瘤组织中HMGB1表达率[14.82(4/27)],两者差异有统计学意义(χ^(2)=13.962,P<0.01)。HMGB1表达水平与骨肉瘤Eneeking分期、肺转移、软组织浸润明显相关(χ^(2)=5.261、4.127、4.898,P<0.05),差异有统计学意义。结论 MDM2蛋白和HMGB1蛋白表达与骨肉瘤转移、侵袭明显相关,检测MDM2和HMGB1有助于诊断骨肉瘤患者病情进展。