仿野生种植三叶青不同部位总黄酮分析及其抗炎、抗氧化能力比较

目的:比较仿野生种植三叶青不同部位中总黄酮含量、抗氧化活性以及抗炎能力差异。方法:采用醇提工艺对仿野生种植三叶青茎叶、块根、根须进行提取,比较不同部位间总黄酮含量差异;通过DPPH自由基、ABTS^(+)自由基、羟自由基清除实验以及铁离子还原力测定,比较仿野生种植三叶青不同部位间抗氧化能力的强弱;采用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞作为炎症模型,通过细胞NO的释放量比较仿野生种植三叶青不同部位间的抗炎能力差异。结果:在最佳提取工艺条件下,测得仿野生种植三叶青茎叶、块根、根须总黄酮含量分别为11.86±0.23、8.48±0.10、7.52±0.02 mg·g^(-1);建立三叶青HPLC指纹图谱,共标定了10个共有峰,通过对照品指认出6号峰为芦丁、8号峰为槲皮素、9号峰为山奈酚,并对其含量进行检测,结果显示块根中三种指标成分含量均最高,其次根须,茎叶最低。检测仿野生种植三叶青不同部位对DPPH自由基、ABTS^(+)自由基以及羟自由基的IC_(50)值,茎叶分别为0.2107、0.2315、0.7625 mg/mL;块根分别为0.3134、0.3758、0.8967 mg/mL;根须分别为0.2058、0.2587、0.7856 mg/mL。三叶青茎叶、块根、根须对铁离子还原能力的吸光度值分别为0.172、0.153、0.184。当仿野生种植三叶青三部位的质量浓度在25~200μg/mL之间时,它们不会对RAW264.7细胞造成毒性,能够有效地抑制LPS诱导的NO释放,从而达到良好的抗炎效果。结论:本研究结果为仿野生种植三叶青不同部位的质量评价提供参考,并对仿野生种植三叶青非药用部位废物再利用及后续全资源开发提供理论依据。

乌饭果提取物化学成分分析及其美白功效评价

目的 研究乌饭果提取物的化学成分及其美白功效。方法 通过分光光度法测定总黄酮、总酚含量,UPLC-Q-TOF/MS法分析化学成分,以DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基清除能力和总还原能力为指标评价抗氧化活性,体外酶活试验评价对酪氨酸酶活性的影响。结果 共鉴定出30个化合物,包括11个花色苷类、9个黄酮类、8个萜类和2个苯丙素类,除花色苷类外均为首次报道。提取物清除DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基的IC50分别为0.119 7、0.109 9、0.458 8 mg/mL,铁还原能力为5.918 0 mg/mL,抑制酪氨酸酶单酚酶、二酚酶的IC50分别为0.109 9、0.711 6 mg/mL。结论 乌饭果主要含有花色苷类、黄酮类、萜类成分,其提取物具有抗氧化活性和酪氨酸酶抑制活性,在美白淡斑方面有一定的作用。

绉面草总黄酮提取工艺优化及美白活性研究

目的:优化绉面草总黄酮超声提取工艺,并考察其美白活性。方法:以绉面草总黄酮得率为指标,采用Box-Behnken响应面法对绉面草总黄酮提取工艺进行优化。通过绉面草总黄酮对DPPH、ABTS、·OH的清除能力以及总还原能力评价抗氧化活性,通过考察其对酪氨酸酶活性的抑制作用,并分析绉面草总黄酮对酪氨酸酶的抑制机理和抑制类型,评价其美白活性。结果:绉面草总黄酮最佳工艺条件为乙醇浓度65%,液料比18 mL/g,提取温度75℃,超声时间45 min,总黄酮得率高达107.36 mg/g;绉面草总黄酮对DPPH、ABTS以及·OH自由基具有良好的清除作用,并且总还原能力较好;同时,对单酚酶、二酚酶均有明显的抑制作用,抑制过程为不可逆的竞争与非竞争混合型抑制类型。结论:绉面草总黄酮提取工艺方法稳定可靠,且绉面草总黄酮具有良好的抗氧化能力和抑制酪氨酸酶活性,为绉面草在天然抗氧化剂以及祛斑美白类产品的开发利用提供了理论依据。

中药抗肿瘤有效成分的药效基团研究概况

归纳总结近10年来在构效关系研究中,中药各类抗肿瘤有效成分及其衍生物的抗肿瘤作用药效基团,并探讨其研究意义,为中药抗肿瘤成分的结构优化和抗肿瘤新药开发提供参考思路。

异叶败酱有效部位PHEB抗肿瘤作用研究

目的:从异叶败醤中分离纯化得到抗肿瘤有效部位PHEB,通过体外抗肿瘤实验,明确PHEB对黑色素瘤细胞(B-16)和脑胶质瘤细胞(C6)生长的抑制作用。方法:采用硅胶柱层析分离制备PHEB,MTT比色法考察PHEB对B-16和C6肿瘤细胞的体外增殖抑制能力。结果:从异叶败醤醇提物中分离精制得到PHEB(4.0‰)。MTT法表明PHEB对B-16和C6肿瘤细胞均有明显的抑制作用,IC50分别为(33.5±3.7)μg/mL和(41.2±3.5)μg/mL,且具有明显的量-效关系。结论:败酱有效部位PHEB对B-16和C6肿瘤细胞具有一定的抑制作用。

茶皂素解酒饮料的研制

以茶皂素为主要原料,添加适量白砂糖、β-环状糊精及其他辅料,通过单因素试验和正交试验进行比较分析,以确定解酒饮料的最佳配方。结果表明,饮料的最佳配方为茶皂素1.5%,白砂糖22%,β-环状糊精0.5%,黄原胶0.05%。茶皂素饮料的口感适宜、感官良好,为进一步研究茶皂素的利用价值提供参考。

黄芪玫瑰花复合饮料的研制

以玫瑰花和黄芪为主要原料,研制出集黄芪与玫瑰花保健功效于一体,且具有抗氧化祛斑作用的黄芪玫瑰花复合饮料,探究了黄芪与玫瑰花的提取和浸提工艺,并通过单因素试验与正交试验得出了饮料的最佳配方。结果表明,黄芪汁添加量15%,玫瑰花汁添加量40%,白砂糖添加量4%,柠檬酸添加量0.04%,卡拉胶添加量0.04%,CMC-Na添加量0.10%为该饮料的最佳配方。所得黄芪玫瑰花复合饮料口感良好、感官品质优,为黄芪和玫瑰花的进一步开发利用提供方案。

基于中药物质组理论的浙贝母品质评价方法研究

目的:探索基于中药物质组理论的浙贝母品质评价方法。方法:采用高效液相蒸发光散射法(HPLCELSD)测定浙贝母色谱图;以具有最强止咳功效的龙观产地浙贝母作为标准药材,其汤剂为标准物质组储备液,制备物质组浓度标准普数据,结合Kalman滤波法测得不同产地浙贝母物质组溶出特征,建立基于物质组理论的浙贝母品质评价方法。结果:物质组相对定量方法能在一定程度上归类浙贝母产地。结论:基于中药物质组理论的中药品质评价方法有一定的探索价值,但是方法的适用性仍有待进一步研究证实。

桂枝不同提取物对大鼠良性前列腺增生的影响

目的:观察桂枝不同提取物对丙酸睾丸素致大鼠良性前列腺增生的影响。方法:皮下注射丙酸睾丸素(雄性大鼠5mg/kg)造成良性前列腺增生动物模型。给药组分别灌胃给予桂枝不同成分提取物,前列康组相同途径给予前列康混悬液(雄性大鼠2.0g/kg),正常对照组和模型组给以等体积离子净化水。给药期间收集尿液。末次给药24h后取前列腺,计算前列腺指数并进行病理学切片检查。结果:桂枝水煎液具有一定的利尿作用,可明显降低良性前列腺增生模型大鼠的前列腺湿重和前列腺指数(P<0.01),光镜下可观察到其能明显改善前列腺组织病理现象。结论:桂枝水煎液有治疗大鼠良性前列腺增生作用。

白首乌苷体外抗肿瘤作用研究

目的通过体外抗肿瘤实验考察白首乌苷对多种瘤株的抑制作用。方法采用体外MTT比色法,结合生长曲线法及细胞形态学观察研究白首乌苷对B-16、K-562、PC-3和HeLa肿瘤细胞增殖的抑制作用。结果白首乌苷对B-16、K-562、PC-3和Hela肿瘤细胞均有较强的体外细胞毒作用,半数抑制浓度(IC50)分别为(10.0±0.4),(23.1±1.3),(34.8±2.4),(41.6±6.4)μg.mL-1,且具有明显剂量-效应关系;生长曲线表明,白首乌苷对PC-3肿瘤细胞的作用随着给药浓度增加而增强,且在一定剂量范围内随时间增加其对肿瘤细胞的作用增强,具有明显的量-效和时-效关系;观察细胞形态发现,白首乌苷能使细胞密度明显降低,细胞皱缩,部分悬浮,细胞碎片增多。结论白首乌苷对多种体外生长的肿瘤细胞均有抑制作用,且有一定的选择性。

桂枝对大鼠良性前列腺增生细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究桂枝对大鼠良性前列腺增生细胞增殖和凋亡的影响。方法:大鼠皮下注射丙酸睾丸素(5mg/kg)造成良性前列腺增生动物模型,经灌胃给以不同剂量桂枝水煎液(6.67g/kg、3.33g/kg和1.67g/kg),阳性对照组相同途径给予保列治(非那雄胺)水溶液(0.45mg/kg),正常对照组和模型组给予等体积离子净化水。30d后处死大鼠,观察大鼠前列腺指数变化,HE染色光镜观察前列腺病理改变,Ki-67免疫组化染色和TUNEL染色检测大鼠前列腺细胞的增殖指数和凋亡指数。结果:桂枝能明显降低大鼠的前列腺指数(P<0.01),明显减轻前列腺组织病理改变,提高前列腺细胞凋亡表达率(P<0.01);而对前列腺细胞增殖指数没有明显作用(P>0.05)。结论:桂枝具有抗大鼠良性前列腺增生的作用,促进大鼠前列腺增生细胞凋亡可能是其机理之一。

桂枝不同提取物对小鼠良性前列腺增生的影响

目的:观察桂枝不同提取物对丙酸睾丸素致小鼠良性前列腺增生的影响。方法:皮下注射丙酸睾丸素造成小鼠良性前列腺增生动物模型。给药组分别灌胃给予桂枝不同成分提取物;前列康做对照。末次给药24小时后,处死动物,取前列腺称重,计算前列腺指数并进行病理学检查。结果:桂枝水煎剂可明显降低良性前列腺增生模型小鼠的前列腺湿重与前列腺指数(P<0·01),改善小鼠前列腺病理组织学变化。结论:桂枝水煎液有抑制小鼠良性前列腺增生作用。

中药复方辅助治疗肝外阻塞性黄疸的研究概况

肝外阻塞性黄疸(obstructivejaundice,OJ)主要通过手术治疗,有较高的围手术期并发症率及手术病死率,如能用中药复方辅助治疗,能够较好的降低手术带来的并发症发生率和病死率.本文从肝外OJ发病原因及相关并发症着手,阐述中药复方辅助治疗肝外OJ的现状与进展,多方面总结中药复方辅助治疗肝外OJ的重要作用,为更进一步的实验及临床研究与应用提供理论依据.

桂枝对良性前列腺增生大鼠血清性激素的影响

目的:观察桂枝对良性前列腺增生大鼠血清性激素水平的影响。方法:大鼠皮下注射丙酸睾丸素制备良性前列腺增生动物模型,灌胃给予不同剂量桂枝水煎液,阳性对照组相同途径给予保列治水溶液,正常对照组和模型组给予等体积离子净化水。给药30天后,取血分离血清,放免法检测大鼠血清中雌二醇(E2)、睾酮(T)和双氢睾酮(DHT)含量;处死大鼠,观察大鼠前列腺指数的变化;HE染色光镜观察前列腺病理改变。结果:桂枝能显著降低大鼠的前列腺指数(P<0.01),明显减轻前列腺组织病理改变,明显升高血清E2含量和E2/T比值(P<0.01),对血清T和DHT含量没有明显作用(P>0.05)。结论:桂枝具有抗大鼠良性前列腺增生作用,调节前列腺增生大鼠血清雌激素含量和雌/雄激素比例可能是其机理之一。

HPLC测定肺形草中熊果酸的含量

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）测定肺形草中熊果酸的含量方法。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱选用Hypersil ODS C18柱,流动相为乙腈-0.5%乙酸铵溶液（85：15）,流速为0.6ml/min,检测波长为210nm,柱温30℃。结果：该色谱条件下,熊果酸在0.1~3.0μg浓度范围内呈良好线性关系（0.9971）,样品平均回收率为98.5%,相对标准偏差（RSD）值为2.58%。结论：本法简便、灵敏、稳定、可靠,可作为肺形草的质量控制方法之一。

玄参环烯醚萜苷对氧糖剥夺再灌注细胞模型内质网钙稳态的调控作用

目的:阐明玄参环烯醚萜苷(IGRS)基于调控内质网应激反应对抗脑缺血再灌注损伤的作用及机制。方法:采用IGRS(50、100、200μg/mL)预处理PC12细胞24 h,然后构建氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)细胞模型。MTT法检测细胞存活率,细胞内乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞损伤程度;流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)水平;实时逆转录PCR法检测肌浆网钙泵2(SERCA2)、1,4,5-三磷酸肌醇受体1(IP_3R1)、兰尼碱受体2(RyR2)mRNA表达;激光共聚焦显微镜观察细胞质中的游离钙离子浓度。结果:IGRS预处理可以提高OGD/R细胞存活率、减少LDH释放(均P<0.01);降低细胞凋亡率,抑制GRP78、CHOP,Bax和caspase-12蛋白表达(均P<0.01),上调Bcl-2和Bcl-2/Bax(均P<0.01),增加细胞SERCA2 mRNA表达(P<0.01),降低游离钙离子浓度,下调RyR2和IP_3R1 mRNA表达。结论:IGRS具有明确的神经保护作用,可能是通过调节SERCA2维持钙平衡,进而抑制内质网应激介导的细胞凋亡来减轻脑缺血再灌注损伤。

温莪术药渣再提取工艺及其美白活性研究

以活性成分总姜黄素得率为指标,响应面法优化温莪术药渣的最佳提取工艺,采用DPPH法和ABTS法评价温莪术药渣提取物的抗氧化活性,并考察其对小鼠黑色素瘤B16细胞存活率、黑色素合成及其细胞内酪氨酸酶活性的影响。实验结果表明,温莪术药渣提取物的最佳工艺条件为乙醇浓度82%,超声时间55 min,液料比22 mL/g,总姜黄素平均提取得率为6.38 mg/g;此外,温莪术药渣提取物对DPPH、ABTS自由基具有一定的清除作用,IC_(50)值分别为24.99、49.72μg/mL;并且能有效抑制B16细胞黑色素合成及酪氨酸酶活性,与正常组相比均具有显著性差异(P<0.05)。本研究为温莪术提油后药渣二次开发利用提供了依据。

RP-HPLC法测定垂盆草片中槲皮素的含量

本实验对垂盆草片的质量控制进行了分析研究,建立了垂盆草片中槲皮素的含量测定方法。1仪器与试药高效液相色谱仪（Agilent 1200,美国安捷伦公司）,电子分析天平（BP211D型,北京赛多利斯公司）,槲皮素对照品（中国药品生物制品检定所,批号100081-2004）,垂盆草片（市售,批号：20120702、20120810、20121211）,甲醇（色谱纯,德国Merck公司），纯化水（自制），其他试剂均为分析纯。

野木瓜总皂苷提取工艺优化及其美白活性组分筛选

目的:优化野木瓜中总皂苷的提取工艺,并为野木瓜总皂苷活性组分在美白化妆品中的后续开发应用奠定基础。方法:在单因素实验的基础上,以乙醇浓度、液料比、提取温度、提取时间为优化因素,总皂苷得率为评价指标,Box-Behnken法优化野木瓜总皂苷提取工艺;依次用不同极性溶剂对其提取物进行萃取,硅胶柱色谱层析进行分离,获得不同活性组分,MTT法检测B16细胞的增殖抑制能力,多巴氧化法检测酪氨酸酶活性。结果:各因素对野木瓜总皂苷得率影响顺序为:乙醇浓度>提取温度>液料比>提取时间;最佳提取工艺为乙醇浓度79%,液料比25∶1 mL/g,提取温度81℃,提取时间89 min,总皂苷平均得率为2.16%;各萃取部位中正丁醇部位对细胞增殖和酪氨酸酶活性抑制效果最好,效果优于对照品熊果苷(P<0.05),其IC 50分别为86.61和69.09μg/mL;正丁醇部位分离得8个活性组分,其中组分Fr.6对B16细胞增殖和酪氨酸酶活性抑制效果最好,IC 50分别为80.93和58.99μg/mL,且抑制酪氨酸酶活性的效果较分离前的正丁醇部位更好(P<0.05)。结论:本文探讨了野木瓜总皂苷的最佳提取工艺,获得的活性组分Fr.6具有良好的美白活性,在美白化妆品产品开发中具有较好的应用前景。

马尾松松针提取物调节JNK3/caspase-3信号转导减轻大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤

目的:探讨马尾松松针提取物(PNE)对大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤的保护作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为手术对照组、模型对照组、依达拉奉组、PNE小剂量组(200 mg/kg)、PNE中剂量组(400 mg/kg)、PNE大剂量组(800 mg/kg),于造模前连续7 d及造模后6 h分别灌胃给药。其中,手术对照组和模型对照组灌胃给予等渗氯化钠溶液,依达拉奉组灌胃给予等渗氯化钠溶液的同时腹腔注射依达拉奉3 mg/kg,PNE各组灌胃给予各剂量PNE。通过大脑中动脉阻塞法建立脑缺血再灌注损伤大鼠模型,于再灌注24 h后测定各组大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、脑梗死体积。采用苏木素-伊红染色观察大脑皮层及海马组织结构病理变化并统计正常神经细胞数;TUNEL法检测大脑皮层神经细胞凋亡率;试剂盒检测缺血侧脑组织一氧化氮、丙二醛含量与超氧化物歧化酶(SOD)活性;蛋白质印迹法检测大脑皮层c-Jun氨基末端激酶(JNK)3、磷酸化JNK3、B淋巴细胞瘤蛋白(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C、胱天蛋白酶(caspase)-3的蛋白表达水平。结果:与模型对照组比较,PNE各剂量组行为学评分、脑组织含水量及脑梗死体积均显著降低(均P<0.05),大脑皮层及海马CA1区组织病理性损伤显著减轻,缺血侧皮层及海马CA1区中正常神经细胞数增加(均P<0.05),以PNE中剂量组效果最好。与模型对照组比较,PNE中剂量组皮层神经细胞凋亡率显著减小,大脑皮层组织中一氧化氮、丙二醛含量显著减少,SOD活性显著升高,磷酸化JNK3/JNK3比值、细胞色素C、caspase-3蛋白表达水平均显著降低,Bcl-2/Bax比值显著升高(均P<0.05)。结论:PNE对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,这种保护作用可能与清除一氧化氮和丙二醛,抑制氧化应激介导的JNK3/caspase-3信号转导来抑制神经细胞凋亡有关。