磨损颗粒刺激下小鼠骨髓来源巨噬细胞调控白细胞介素-34表达的实验研究

目的探讨白细胞介素-34(IL-34)在体外是否可以促进破骨细胞形成以及在磨损颗粒刺激下小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMMs)中IL-34的体外表达量和相关机制。方法提取小鼠BMMs原代细胞,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测IL-34或巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)在核因子κB受体激活剂(RANKL)存在下处理BMMs后破骨细胞的形成。酶联免疫吸附(ELISA)及实时聚合酶链反应(RT-PCR)法测定不同浓度下钴铬钼合金颗粒(CoCrMo)刺激下小鼠BMMs中IL-34的表达量。RT-PCR和Western blotting法检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路抑制剂干预下IL-34及其磷酸化蛋白的表达量。结果IL-34和M-CSF对于促进体外破骨细胞的生成具有相同的作用。ELISA和RT-PCR结果显示,CoCrMo磨损颗粒以时间和浓度依赖趋势增加BMMs中IL-34的表达水平。Western blotting结果进一步解释BMMs中IL-34的表达量的升高可能与细胞外调节蛋白激酶(ERK)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化水平的增加有关。结论磨损颗粒通过影响ERK和JNK磷酸化水平调控IL-34的表达,参与体外破骨细胞的形成。