NK4基因在重组腺病毒中的表达与初步鉴定

目的 构建含有肝细胞生长因子 (HGF)NK4基因的重组腺病毒载体 ,为应用HGF/NK4进行肿瘤基因治疗奠定实验基础。方法 应用AdEasy腺病毒载体系统 ,将PCR扩增所得的NK4基因片段与穿梭质粒pShuttle CMV进行连接 ,获得重组质粒pShuttle CMV NK4 ,将该质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1共转化大肠杆菌BJ5 183获得重组腺病毒质粒pAdCMV NK4 ,用该质粒转染 2 93细胞包装产生出重组腺病毒rvAdCMV NK4。重组腺病毒分别经电子显微镜技术及RT PCR、WesternBlot等方法进行鉴定。结果 得到含有NK4基因的重组腺病毒rvAdCMV NK4 ,电子显微镜下可见典型腺病毒颗粒形态 ,RT PCR及WesternBlot分析显示rvAdCMV NK4感染 2 93细胞后NK4基因可有效转录并表达。结论 成功构建出含有NK4基因的重组腺病毒rvAdCMV NK4 ,为下一步开展关于NK4基因的肿瘤治疗提供了基础。

CD44拼接变异体V6与上皮钙粘附素在胰腺癌中的表达及意义

目的探讨CD44拼接变异体V6(CD44 Splice varint V6,CD44V6)和上皮钙粘附素(E-Cadherin,E-CD)在胰腺癌中表达及与胰腺癌浸润、转移的关系,评价CD44V6和E-CD在胰腺癌浸润转移中的作用。方法采用SP免疫组化染色方法,检测43例胰腺癌组织中CD44V6和E-CD的表达情况。结果正常胰腺导管上皮细胞CD44V6呈阴性表达,胰腺癌组织中CD44V6阳性表达率达58.1%(25/43),CD44V6阳性表达与胰腺癌浸润深度、淋巴结转移情况密切相关(P<0.05),与胰腺癌组织分化程度无关(P>0.05)。正常胰腺导管上皮细胞E-CD呈强阳性表达,60.5%(26/43)的胰腺癌组织中E-CD呈异常表达,E-CD的异常表达与胰腺癌组织分化程度、浸润程度、淋巴结转移情况关系密切(P<0.01)。CD44V6和E-CD在胰腺癌中的表达无明显相关性(P>0.05)。结论CD44V6阳性表达和E-CD异常表达与胰腺癌浸润、转移关系密切,检测CD44V6和E-CD表达有助于对胰腺癌浸润转移潜能的判断,二者可以作为胰腺癌浸润转移的生物学指标。

E-CD的表达和胰腺癌浸润、转移的关系

目的 探讨E -CD(E -Cadherin)在胰腺癌中表达及与胰腺癌浸润、转移的关系 ,评价E -CD在胰腺癌浸润转移中的作用。方法 采用SP免疫组化染色方法 ,检测 43例胰腺癌组织中E -CD的表达情况。结果 正常胰腺导管上皮细胞E -CD呈强阳性表达 ,6 0 .5 % (2 6 /43)的胰腺癌组织中E -CD呈异常表达 ,E -CD的异常表达与胰腺癌组织分化程度、浸润程度、淋巴结转移情况关系密切 (P <0 0 5 )。结论 E -CD异常表达与胰腺癌浸润、转移关系密切 ,检测E -CD表达有助于对胰腺癌浸润转移潜能的判断 。

肿瘤也有可能遗传--林奇综合征

2013年,著名影星安吉丽娜·朱莉在尚未检出有明确肿瘤病灶的情况下,因检测到携带肿瘤遗传易感基因BRCA1突变,就选择接受双侧乳腺切除手术,两年后又进行了卵巢和输卵管的预防性切除术。这个爆炸性新闻掀起了公众对遗传性肿瘤的关注热潮。癌症还能遗传吗?

成年大鼠非胰岛内Nestin阳性细胞的体外分离、培养及分化

目的 :建立成年大鼠胰腺非胰岛内 Nestin阳性细胞的体外分离培养及分化的方法。方法 :采用胰管内注入胶原酶消化法分离 3只成年大鼠胰腺组织 ,并经含 10 %胎牛血清 RPMI16 4 0液 (p H7.6 )体外培养 ,36 h后弃去悬浮细胞及胰岛 ,改用无 10 %胎牛血清 RPMI16 4 0液 (p H7.4 )加 b FGF、EGF及 N2 添加剂培养 ,18～ 2 2 d后收集新生类胰岛样细胞团并传代培养。挑选新分离的胰岛和新生类胰岛样细胞团每次各 4 0个 ,共 3次 ,采用1 31 放射免疫法测定分离的胰岛及新生类胰岛样细胞团的胰岛素分泌量 ,并计算葡萄糖刺激指数 (SI) ;免疫荧光细胞化学法检查贴壁细胞及传代后的新生类胰岛样细胞团 Nestin阳性细胞的表达。结果 :胰管内注入胶原酶消化法可获得功能、形态良好的胰岛 ;分离后胰腺组织在 p H7.6的 10 %胎牛血清 RPMI16 4 0液培养条件下 ,36 h内胰岛细胞不贴壁 ,贴壁细胞中大多数表达 Nestin阳性细胞 ,无胰岛素和胰高血糖素表达 ,但 Nestin表达不一 ,培养 18～ 2 2 d可见新生类胰岛样细胞团出现 ,新生类胰岛样细胞团传代后仍可见 Nestin阳性细胞。新分离的 4 0个胰岛在含糖 3.3、 16 .7m mol· L- 1培养液中胰岛素分泌量为 (6 3.6± 4 .0 )、 (2 0 2 .2± 14 .8) m IU· L- 1 ;而新生的4

结直肠癌肝转移的新辅助治疗策略

肝转移是结直肠癌患者最主要的致死原因,而绝大部分肝转移灶是初始不能切除的,对于不能切除的肝转移灶,术前治疗可使部分患者转化为可切除。可切除的肝转移患者术后复发率高,如何降低早期复发率,从而获得长期生存,是改善结直肠癌肝转移患者预后的关键。近年来,新辅助化疗在结肠癌肝转移的治疗中取得了一些进展,本文从新辅助化疗的意义、化疗方案的选择以及是否联用靶向治疗等三个方面进行综述。

非颈部切口内镜甲状腺手术的临床应用

目的:探讨内镜技术用于甲状腺手术的可行性、技术难点及解决方法。方法:回顾分析2006年10月至2008年7月我院为128例患者行内镜甲状腺手术的临床资料。结果:128例中122例内镜手术成功,6例中转手术,其中2例为Ⅲ度甲亢,颈部操作空间不够;4例游离甲状腺肿瘤时引起难以控制的出血。手术时间48～240min,平均85min。术中平均出血15ml。颈部引流管术后3d拔除,术后4d出院。6例皮下积液,2例皮下气肿,2例皮下瘀斑,2例颈部感觉减退,3例吞咽不适,经对症处理很快康复。未损伤喉上神经、喉返神经及甲状旁腺。随访122例6～9个月,无一例复发。患者对术后美容效果非常满意。结论:内镜甲状腺手术出血少,并发症发生率低,具有颈部无瘢痕、美容效果极佳、安全可靠的优点。操作空间的建立,手术视野、甲状腺及肿瘤的良好显露,残留甲状腺体积的正确估计,超声刀的熟练运用,出血的处理及颈前肌群的熟练缝合是手术的关键。

结直肠癌肝转移的手术治疗

目的 探讨手术治疗结直肠癌肝转移的疗效以及影响因素.方法 收集74例手术治疗的结直肠癌肝转移病例,进行回顾性分析.结果 本组患者3年和5年生存率分别为63.8%和49.8%.原发灶淋巴结转移者5年生存率（33.3%）显著低于无转移者（63.7%,P=0.002）,脉管侵犯者（39.6%）显著低于无侵犯者（61.6%,P=0.025）.转移灶个数≤3个者（53.7%）显著高于＞3个者（34.6%,P=0.021）.肝转移灶局限于半肝者,其5年生存率（65.2%）显著高于双侧弥漫者（23.9%,P=0.001）.结论 手术切除是唯一可能治愈结直肠癌肝转移的方法.原发灶无淋巴结转移、无脉管侵犯,转移灶个数不超过3个、局限于半肝者预后较好.

非颈部切口内镜甲状腺手术的技巧

目的:探讨内镜技术在非颈部切口甲状腺手术中应用的技术难点及处理技巧。方法:回顾分析中日友好医院普外二科2006年10月～2008年7月128例经胸乳途径内镜甲状腺手术患者的临床资料。结果:128例中122例成功,6例中转手术。手术时间48～240min,平均85min。术中平均出血15ml。颈部引流管术后3d拔除,平均术后4d出院。手术未损伤喉上神经、喉返神经及甲状旁腺。122例随访6～9个月,无一例术后肿瘤复发。所有患者对术后切口满意。结论:非颈部切口内镜甲状腺手术出血少、并发症低,是一种颈部无瘢痕、安全可靠的新方法。手术的关键技巧在于手术操作空间的建立、甲状腺及肿瘤的良好显露、超声刀的运用以及出血的处理。

“四步法”混合入路腹腔镜右半结肠癌根治性切除的初步探讨

目的:初步探讨'四步法'混合入路腹腔镜右半结肠癌根治性切除的安全性、可行性及临床应用价值。方法:回顾分析中日友好医院普通外科2015年9月~2019年1月行腹腔镜右半结肠癌根治术患者共87例,其中采用'四步法'混合入路47例(混合入路组)、传统中间入路40例(中间入路组),分析比较2组患者的临床资料。结果:2组患者均顺利完成腹腔镜下右半结肠癌根治性切除术,性别、年龄、身高体重指数、肿瘤所在部位、分期、清扫淋巴结数目及并发症方面,差异均无统计学意义(均P>0.05)。混合入路组与中间入路组手术时间(180.6±12.0min vs 189.1±18.9min),术中出血量(74.2±19.6ml vs 106.4±64ml)比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:与中间入路相比,'四步法'混合入路腹腔镜下右半结肠癌根治术操作难度低、手术时间短、术中失血量少,值得在临床中探讨及推广应用。

原发性腹膜后肿瘤的诊断和治疗

目的 总结和探讨原发性腹膜后肿瘤的诊断和治疗经验。方法 回顾性分析 86例原发性腹膜后肿瘤的诊断方法和手术方式的临床资料。结果 86例中恶性肿瘤 6 2例 ,肿瘤完整切除率 5 9% ,合并脏器切除率 5 8.1% ;良性肿瘤 2 4例 ,肿瘤完整切除率 79.2 % ,合并脏器切除率 8.3%。重复手术 2 4.7%。结论 B型超声和CT是早期诊断原发性腹膜后肿瘤较好的影像学检查方法 ,外科手术治疗及肿瘤完整切除是治疗和预后的关键 ,复发性肿瘤应积极再次手术。

术前放化疗对直肠癌括约肌间切除术后肛门功能的影响

目的评估术前放化疗是否会降低接受肛门括约肌间切除术(intersphincteric resection,ISR)的低位直肠癌患者术后的肛门功能。方法收集89例低位直肠癌患者,根据患者所接受的治疗方式分为手术组41例和放化疗组48例。手术组患者直接接受ISR治疗,放化疗组在术前接受长程放化疗。所有患者均临时性回肠造口。所有患者均在术前1周和术后6个月时进行肛门直肠测压检查,并于术后6个月进行前切除综合征评分。结果放化疗组患者放化疗后最大缩榨压(P=0.005)和残余压(P=0.007)均减低,排便的最大耐受量也降低(P=0.040)。术后6个月时放化疗组患者的静息压(OR=1.024,P=0.047)、排便感觉阈(OR=1.035,P=0.045)和最大耐受量(OR=1.030,P=0.011)减低的程度均大于手术组。26例(29.2%)患者在术后6个月时回肠造口不能还纳。通过前切除综合征评分表评估患者术后的症状发现,放化疗后的患者术后前切除综合征发生率增高(80.5%vs 66.7%),但其严重程度与手术组比较,差异无统计学意义(P=0.091)。结论术前放化疗会降低ISR术后肛门功能,降低生活质量。

中央直属公立医院养老保险改革问题及对策研究进展

2015年国务院印发了《关于机关事业单位工作人员养老保险制度改革的决定》,这标志着养老金＂双轨制＂的终结,机关事业单位自2014年10月1日起进行养老保险制度的改革,实行社会统筹与个人账户相结合的基本养老保险制度,其编制内4000万机关事业单位人员将和企业职工一样缴纳养老保险。

内镜甲状腺切除术

目的探讨内镜甲状腺切除术的手术难点和应对策略。方法对169例患者施行内镜甲状腺切除术，总结本类手术难点、危险因素及防治措施。结果内镜甲状腺切除手术成功167例，包括甲状腺腺瘤切除术37例，甲状腺单叶大部分切除术63例，甲状腺双叶大部分切除术42例，甲状腺功能亢进行甲状腺双叶次全切除术20例，甲状腺癌行甲状腺单叶并峡部全切除对侧次全切除术5例。无神经或甲状旁腺损伤等严重并发症。中转开放手术2例，术后切口脂肪液化2例，皮下气肿1例，皮肤淤斑1例，一过性声音嘶哑1例，随访1～4年，复发1例，无死亡病例。结论内镜甲状腺切除术有其特殊的操作方法和手术难点，通过精细的术中操作和适当的围手术期处理可以降低副损伤的发生率。

新生大鼠胰腺nestin阳性细胞的体外分离、培养和分化的研究

目的探索新生大鼠胰腺nestin阳性细胞体外分离、培养并使之形成类胰岛样细胞团的方法。方法应用胶原酶消化新生大鼠胰腺,将消化的组织碎片培养形成类胰岛样细胞团后传代。免疫荧光细胞化学法检测贴壁细胞胰岛素、胰高血糖素及nestin的表达。RT-PCR检测培养1周的贴壁细胞nestin及细胞角蛋白(CK19)的表达。结果在pH 7．6条件下培养24-36 h有部分细胞贴壁生长,改用pH 7．4无血清RPMI 1640培养液培养18-24 d可形成类胰岛样细胞团,传代后可有单层细胞生长。培养24～36 h的贴壁细胞nestin呈阳性,但胰岛素、胰高血糖素阴性,形成的类胰岛样细胞团传代后24 h胰岛素、胰高血糖素呈阳性。培养1周的单层细胞经RT-PCR扩增获得nestin 片段,但未获得CK19相应的片段。结论类胰岛样细胞团传代培养后可表达胰岛素、胰高血糖素; 胰腺nestin阳性细胞具有胰岛干细胞的特点。

食管下段鳞癌伴Paget病一例

患者男性，74岁。因进食后哽噎感2个月，于2008年3月12日入院。患者在外院行上消化道造影示食管下段黏膜中断，充盈缺损，胃镜示食管下段距门齿35cm处左侧壁盘状隆起，大小约1．5cm×1．0 cm，病理报告为中分化鳞状细胞癌。患者入院后查体未见明显阳性体征，术前诊断食管下段鳞癌，于2008年3月18日全麻下行食管中下段切除术、食管-胃弓上吻合术。术中见肿瘤位于食管下段，侵及贲门，食管管壁异常增厚，剖开后见黏膜水肿感，粗糙，呈暗红色。

应用吻合器行低位直肠癌切除术60例分析

为评价采用保肛低位吻合术治疗低位直肠癌的疗效，回顾分析60例直肠癌患者应用吻合器行保肛手术的临床资料。60例手术成功率为100％。吻合口漏发生率为3．3％(2／60)，吻合口狭窄发生率为3．3％，局部复发率为6．7％(4／60)。结果表明，吻合器的应用，扩大了直肠癌保肛手术的治疗范围，并且成功率高，并发症少，操作简单。

青年和老年人大肠癌136例临床及病理特点分析

为探讨青年人及老年人大肠癌的临床及病理学特点，对136例青年及老年大肠癌患者的临床特征及病理学特点进行分析。青年组和老年组大肠癌在性别分布上无明显差异，两组中直肠癌均多于结肠癌，青年组肿瘤细胞分化程度差，老年组肿瘤细胞分化程度较高，青年组病程较晚的病例数较老年组为多。青年组和老年组大肠癌有不同的临床特点和生物学特征。