生物学半同胞关系鉴定策略

目的比较似然比(likelihood ratio,LR)法和状态一致性(identity by state,IBS)法在半同胞关系鉴定中的应用价值,为制定半同胞鉴定相关规范提供参考。方法(1)基于相同的遗传标记组合,比较实际案例与计算机模拟案例的累计状态一致性评分(cumulated identity by state score,CIBS)与累积全同胞关系指数分布,验证计算机模拟方法的可信度;(2)模拟获得全同胞、半同胞、无关个体对各100万对在不同数量的三种类型遗传标记上的分型,分别计算CIBS和相应类型的累积LR参数;(3)比较基于不同数据、不同种类的遗传标记、应用不同准确度标准区分上述三种关系个体对时,LR法和IBS法所能提供的最佳系统效能,以比较两种方法在上述鉴定中的应用价值;(4)根据已有模拟数据,以曲线拟合的方式估计应用不同类型遗传标记鉴别半同胞与另两种关系个体对所需的最低遗传标记数目。结果(1)经秩和检验,在真实关系和检验的遗传标记组合相同的前提下,模拟方法与实际案例所得结果差异无统计学意义;(2)多数情况下,在其他条件设置相同时,LR法的系统效能大于IBS法;(3)基于现有数据,可以通过曲线拟合的方式得到全-半同胞鉴定和半同胞鉴定在系统效能达到0.95或0.99时所需遗传标记的数目。结论在进行甄别全同胞对和半同胞对或甄别半同胞对和无关个体对的鉴定时,推荐优先使用LR法,并根据拟进行的鉴定类型和基于的人群数据估计所需遗传标记数目,以保证鉴定效果。

郧阳区石漠化山地水源涵养林营造技术

本文针对丹江口库区石漠化山地特点及水源涵养林经营目标,提出了郧阳区石漠化山地造林树种选择原则,筛选推荐了适宜石漠化山地造林的先锋树(草)种30余种;从生产实践中总结出郧阳区石漠山地水源林营造模式4个及其营建技术,提出了石漠化治理的组织管理和保障措施,以期为郧阳区石漠化山地植被恢复提供技术服务。

姨与外甥亲缘关系鉴定1例

1.1简要案情孙某与张某(男)户口本上显示两人为母子关系,因遗产继承问题,孙某委托本单位证明二人为姨与外甥关系,进行亲缘关系鉴定。1.2检验方法应用Chelex-100法提取二人外周血基因组DNA,采用GoldeneyeTMDNA身份鉴定系统20A试剂盒、GoldeneyeTMDNA身份鉴定系统22NC试剂盒[基点认知技术(北京)有限公司]、PowerPlexTMFusion试剂盒(美国Promega公司)、HDplex试剂盒(德国QIAGEN公司)检测的常染色体基因座个数分别为19个、21个、22个、12个,其中D3S1358基因座为GoldeneyeTMDNA身份鉴定系统20A试剂盒、GoldeneyeTMDNA身份鉴定系统22NC试剂盒和PowerPlexTMFusion试剂盒共有,D18S51、D12S391基因座为GoldeneyeTMDNA身份鉴定系统20A试剂盒、HDplex试剂盒和PowerPlexTMFusion试剂盒共有,D19S433、D5S818、D21S11、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、PentaD、vWA、D8S1179、TPOX、PentaE、TH01、D2S1338、FGA15个基因座为GoldeneyeTMDNA身份鉴定系统20A试剂盒和PowerPlexTMFusion试剂盒共有,D2S441、D1S1656、D10S1248基因座为GoldeneyeTMDNA身份鉴定系统22NC试剂盒和PowerPlexTMFusion试剂盒共有,D4S2366、D7S1517、D3S1744、D8S1132、D5S2500基因座为GoldeneyeTMDNA身份鉴定系统22NC试剂盒和HDplex试剂盒共有。

优质钙果栽培技术

结合生产实际,从优质钙果的园址选择、品种选择、苗木繁育、栽植技术、田间管理、病虫害防治等作了较详细的介绍,为优质钙果的经营管理提供了依据。

法医学混合斑研究进展

混合斑是性侵案件中常见生物检材,对其分析结果的解释是法医学检验中的难点之一。混合斑的种类较多,多个个体或多种体液、分泌液形成混合斑的提取、分离方法比较复杂。目前,法医学用于对混合斑量化评估主要应用杂合型均衡比和混合比例两个参数,而其分析受多种因素的影响。分析常用的遗传标记包括:常染色体和Y染色体STR,SNP,mt DNA,INDEls等。统计分析方法主要有似然率法(LR)以及随机男子不能被排除率法(RMNE)。混合斑分析软件的出现,有助于对检验结果的分析和判断。本文对相关文献进行综述,意在为混合斑的研究和鉴定提供参考和借鉴。

妇科肿瘤和乳腺癌组织常染色体和X染色体STR的突变分析

目的探讨妇科肿瘤组织和乳腺癌组织的法医学常用STR基因座突变类型和规律,以及显微切割技术在肿瘤组织法医学鉴定中的应用。方法应用Power Plex 21 System和Argus X-12试剂盒对62例乳腺癌患者,62例妇科恶性肿瘤患者,10例良性妇科肿瘤患者外周血、肿瘤组织和癌旁组织DNA样本进行复合扩增,获得STR分型,并选取存在突变的部分肿瘤组织进行显微切割。结果妇科恶性肿瘤患者外周血的STR分型与癌旁组织一致;46.77%的妇科恶性肿瘤组织中观察到4种STR突变类型,显著高于良性肿瘤的STR突变率(P<0.01)和乳腺癌的STR突变率(P=0.009)。显微切割获得的间质细胞的STR分型与癌旁组织一致。结论本研究所检测的STR基因座在妇科恶性肿瘤组织中的稳定性较差,不适用于该系统肿瘤组织的法医学鉴定;显微切割技术可准确分离间质细胞,能够代表肿瘤来源个体的正常DNA分型,是解决此类案件法医学鉴定的一种有效方法。

河北汉族人群Investigator HDplex 12个STR基因座遗传多态性

本研究对中国河北地区汉族183个健康无关个体进行12个STR基因座遗传多态性调查。采用QIAamp DNA midi试剂盒提取样本DNA,用Investigator HDplex试剂盒进行扩增及检测。结果在12个STR基因座共检测出167个等位基因和637种基因型,其分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。所调查的汉族人群12个STR基因座具有较好识别能力。

人类反转座核元件甲基化研究进展

人类反转座核元件LINE-1序列和Alu序列甲基化水平的变化与多种疾病的发生、发展有密切的联系,因此是相关疾病,尤其肿瘤和癌症预测、诊断、治疗及预后的新标记。近年来,二者在法医学方面的研究也逐渐展开,主要集中在同卵双生子的鉴别、年龄的鉴定、组织的鉴定等方面,有望成为法医DNA分析领域新一代的遗传标记。本文综述LINE-1序列和Alu序列甲基化在医学、法医学等领域的研究进展,希望能为相关研究和应用提供参考。

12个X染色体短串联重复序列基因座在河北汉族人群的遗传多态性

目的调查12个X染色体短串联重复序列（X chromosome short tandem repeat，X-STR）基因座在中国河北汉族人群中的遗传多态性。方法应用荧光标记复合扩增和毛细管电泳分型技术，对198名河北汉族无关个体（男性96名，女性102名）进行InvestigatorArgusX-12试剂盒中12个X-STR基因座分型，计算群体遗传学参数。结果该群体12个X-STR基因座中DXS10101与DXS10103呈连锁不平衡状态。12个X-STR基因座共检出148个等位基因，其中包括22个分型标准物外（off-ladder，OL）等位基因。12个X-STR基因座在河北汉族人群的杂合度为0．5074～0．9143，多态性信息含量为0．4377～0．9079，男性个体识别力为0．5074～0．9143，女性个体识别力为0．6876～0．9863，三联体非父排除率为0．4377～0．9079，二联体非父排除率为0．2984～0．8373。结论Investigator Argus X-12系统在河北汉族人群中具有高度多态性，适用于法医学个人识别和亲子鉴定，尤其是特殊或复杂的亲子鉴定。

福尔马林固定组织SNP与STR检测的比较

目的检测经长期福尔马林固定的组织降解情况,并比较组织中SNP与STR的检出率。方法本文对24例经福尔马林固定、-20℃保存5年的组织样本,采用Quantifiler?Trio DNA定量试剂盒检测样本DNA的降解系数及浓度,运用55-SNPs SNa Pshot复合分型体系和Power Plex?21试剂盒分别进行SNP与STR检测。结果大部分样本降解系数在1~8,发生不同程度的降解。与未降解样本相比,SNP分型完全一致,检出率为100%;其中8例样本STR分型存在33个等位基因丢失,降解系数均大于2.6,且75.8%的等位基因片段长度大于300bp。当样本检测出16个STR基因座时,似然率与54个SNP相当。当样本检出大于17个STR时,似然率大于54个SNP。STR基因座片段长度与等位基因检出率之间呈负相关。除2例样本降解系数较小却发生等位基因丢失外,其余样本降解系数与等位基因检出率之间呈负相关。结论经福尔马林长期固定的组织DNA易降解,检测SNP明显优于STR,但需要更多的SNP以提高个体识别能力。

恶性肿瘤组织的常染色体、X和Y染色体STR突变分析

目的观察恶性肿瘤组织的常染色体、X和Y染色体STR及性别基因座的等位基因突变情况。方法应用PowerPlex 21 System、Argus X-12试剂盒和AmpFLSTR Yfiler试剂盒对124例肿瘤组织和正常对照组织DNA样本进行复合扩增,AB 3130遗传分析仪进行PCR产物分离和分析,获得STR基因分型。结果在常染色体、X和Y-STR观察到4种突变类型。在93例样本中观察到477次突变,包括增加等位基因135次,出现新等位基因86次,完全杂合性丢失102次,部分杂合性丢失154次。引起常染色体STR基因型改变的突变类型以增加等位基因和杂合性丢失为主,引起X-STR基因型改变的突变类型以增加等位基因和出现新等位基因为主。分别在62例(50%)和53例(42.74%)样本中观察到常染色体和X-STR基因型突变,10例样本(12.35%)的9个Y-STR观察到突变,故Y-STR突变率显著低于常染色体和X-STR(P<0.001)。结论恶性肿瘤组织的常染色体和X染色体STR突变率较高,应用STR进行肿瘤组织个体识别时应谨慎。而肿瘤组织中Y-STR的稳定性较常染色体STR和X-STR好,可以在特殊检案中使用以补充信息。

法医物证学翻转课堂教学设计与效果分析

本文选取法医物证学的两个章节进行翻转课堂教学,与传统教学效果进行分析比较,发现采用翻转课堂教学班级的两个章节的成绩优于传统教学班级,且在提高学生的综合能力方面胜于传统教学模式。翻转课堂教学模式对教师提出了更高的要求,课前对课程内容的选择及教学设计对于教学效果及学生能力培养至关重要。

法医体液溯源的分子生物学技术研究进展

通过对犯罪现场发现的体液溯源,可以在样本来源者与实际犯罪行为之间建立联系,为现场重建提供重要证据。随着分子生物学技术的发展,DNA甲基化、RNA等遗传标记以及特定微生物检测被发现具有潜在的法医体液溯源价值。本文对近年来应用分子生物学方法进行法医体液溯源的研究现状和应用前景进行综述。

家系基因型重建法在单亲祖孙关系鉴定中的应用研究

目的对有参考个体参与的单亲祖孙关系鉴定中家系基因型重建方法的应用及计算思路的选择进行探索研究。方法依据河北汉族人群38个常染色体短串联重复序列遗传学数据,用计算机模拟8000个祖孙家系,选择生母及不同数量父辈个体作为参考样本进行单亲祖孙关系鉴定,应用家系基因型重建法的三种不同计算思路:期望值法、最小概率值法及改良的最小概率值法计算祖孙关系指数(grandparent index, GI),通过诊断实验设定累积祖孙关系指数(combined grandparent index,CGI)界值,并用60例实际案例进行验证。结果父辈参考个体数目显著影响单亲祖孙关系的判定,随着参考个体数目的增加,判定的准确性增加。若以104、10-4作为认定与排除的界值,即使只有1个父辈参考个体,期望值法获得的判定准确度也在90%以上,2个父辈个体参与时准确度达99.8%,而最小概率值法的灵敏度较低,假阴性率较高,改良的最小概率值法介于二者之间。60例实际案例验证结果显示,以期望值法计算CGI值,除有一个单参考个体真家系不能判定外,其余家系均被准确认定或排除。结论在单亲祖孙关系鉴定中,生母及父辈个体参与鉴定时,应用家系基因型重建法可以有效利用更多被检个体的遗传信息,提高鉴定效力;在讨论的三种计算思路内,期望值法能更准确的估计亲缘关系成立的可能性,其效力和安全性均足以满足该类鉴定需求。

法医器官组织特异性circRNAs的筛选及确证

目的筛选并确证器官组织特异性circRNAs分子标记物,应用于法医器官组织溯源。方法从TSCD数据库及文献中,筛选出器官组织特异性circRNAs,设计并验证引物。收集心脏、大脑、肝脏、皮肤、骨骼肌、肺脏等人体组织样本,经总RNA提取、RT-qPCR、琼脂糖凝胶电泳等步骤对候选circRNAs进行组织表达水平分析,并评估方法的灵敏度。结果利用数据库和文献初步筛选出25个器官组织特异性circRNAs。经验证,其中8个circRNAs在目标组织中的相对表达水平显著高于其他组织(P<0.01)。RT-qPCR方法在最低0.1ng起始RNA模板量情况下可在所有目标组织检出特异性circRNAs。结论circRNAs可以作为鉴识法医器官组织新的分子标记,值得继续深入研究。