牛蒡子苷元对ConA诱导小鼠急性肝炎的保护作用

目的研究牛蒡子苷元(ATG)对刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠急性肝炎的保护作用。方法将C57BL/6小鼠随机分成DMSO组、ConA/DMSO组、ConA/ATG组,每组10只小鼠。DMSO组和ConA/DMSO组小鼠腹腔注射DMSO,ConA/ATG组小鼠腹腔注射等体积ATG(30 mg/kg),5h后ConA/DMSO组和ConA/ATG组尾静脉注射ConA(20mg/kg)。12h后处死小鼠,取血清和肝脏组织,用生化分析仪测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,苏木精-伊红(HE)染色检测肝组织病理损伤,TUNEL染色检测肝细胞凋亡,ELISA方法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)水平,q-PCR方法检测肝组织中TNF-α和IFN-γmRNA表达水平,流式细胞术检测骨髓来源抑制细胞(MDSCs),生化法检测肝脏匀浆丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)的表达水平。结果与DMSO组相比,ConA/DMSO组血清ALT和AST水平明显升高(F=125.80、94.74,P<0.05);肝脏组织损伤明显加重;肝细胞凋亡增加;血清和肝组织中TNF-α和IFN-γ水平升高(F=17.52、68.81,P<0.05);肝脏MDSCs募集活化降低;同时MDA和MPO活性升高(F=13.38、14.78,P<0.05)。与ConA/DMSO组比较,ConA/ATG组血清ALT和AST水平明显降低(F=125.80、94.74,P<0.05);肝脏组织损伤明显减轻;肝细胞凋亡减少;血清中TNF-α和IFN-γ的水平降低(F=17.52、68.81,P<0.05);肝组织中TNF-α和IFN-γmRNA的表达水平降低(F=31.55、14.64,P<0.05),MDSCs募集活化明显增强;MDA和MPO活性降低(F=13.38、14.78,P<0.05)。结论 ATG对ConA诱导的小鼠急性肝炎具有明显的保护作用。

人肝源性干细胞腹腔移植抗刀豆蛋白A诱导小鼠急性肝损伤的机制研究

目的探讨人肝源性干细胞抗刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠急性肝损伤的作用机制。方法将72只雄性C57BL/6小鼠分成2组,ConA模型组和干细胞干预组,干预组腹腔注射人肝源性干细胞,模型组注射等量的磷酸盐缓冲液,干预12h后尾静脉注射ConA,注射ConA后分5个不同时间点(0h、3h、6h、12h、24h)分别处死小鼠,检测血清ALT、AST、TNF-α和IL-10的水平,检测肝组织TNF-α和IL-10的mRNA表达水平,观察肝组织病理改变及细胞凋亡程度。结果干预组小鼠(12h、24h)较模型组相比血清ALT、AST水平显著下降(P<0.05),肝组织坏死程度明显减轻;干预组小鼠(3h、6h、12h)血清TNF-α水平较模型组明显下降(P<0.05),而血清IL-10(6h)水平较模型组明显升高(P<0.05);肝组织TNF-α和IL-10的mRNA水平变化与血清基本一致;TUNEL染色显示干预组小鼠(12h、24h)肝组织凋亡程度较模型组明显减轻。结论人肝源性干细胞抑制促炎因子释放、促进抑炎因子表达及抗凋亡作用可能是其保护ConA诱导小鼠急性肝损伤的重要机制。

CXCL1在乳癌MCF-7细胞上皮-间质转化中作用

目的探讨趋化因子CXC型趋化因子配体1(CXCL1)对人乳癌细胞MCF-7迁移能力和上皮-间质转化(EMT)的影响及其机制。方法体外培养人乳癌细胞MCF-7,分为对照组、CXCL1处理组、CXC趋化因子受体2(CXCR2)抑制剂组,应用CCK8方法检测各组细胞增殖活性,以ELISA法检测各组细胞E-cadherin、Vimentin、p-PI3K、p-AKT蛋白表达,RT-PCR方法检测E-cadherin、Vimentin mRNA表达。结果 CCK8检测结果显示,与对照组比较,CXCL1处理组细胞增殖活性升高(F=58.89,q=8.96,P<0.01),CXCR2抑制剂组细胞增殖活性降低(q=6.31,P<0.05)。RT-PCR结果显示,与对照组相比较,CXCL1处理组E-cadherin mRNA表达下调(t=4.07,P<0.01),Vimentin mRNA表达上调(t=3.62,P<0.05)。ELISA检测结果显示,与对照组比较,CXCL1处理组E-cadherin蛋白表达下调(F=8.95,q=2.02,P<0.05),Vimentin蛋白表达上调(F=111.50,q=14.48,P<0.01),CXCR2抑制剂组E-cadherin表达上调(q=2.04,P<0.05),Vimentin蛋白表达下调(q=6.08,P<0.05);与对照组比较,CXCL1处理组PI3K、PAKT蛋白表达明显升高(F=60.35、28.15,q=10.52、5.37,P<0.01),CXCR2抑制剂组细胞内p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低(q=4.65、4.97,P<0.05)。结论乳癌细胞可能通过CXCL1/CXCR2轴活化PI3K/AKT信号通路发生EMT。