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低剂量地西他滨对免疫性血小板减少症患者来源的骨髓间充质干细胞生物学行为的影响 被引量:2
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作者 王昕芃 王君颖 +2 位作者 蔡佳翌 付婉彬 钟华 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期758-767,共10页
目的·研究低剂量地西他滨对原发免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)患者来源的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)增殖、凋亡等生物学行为的影响。方法·纳入2020年4月—2021年10月上海交通大学医学... 目的·研究低剂量地西他滨对原发免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)患者来源的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)增殖、凋亡等生物学行为的影响。方法·纳入2020年4月—2021年10月上海交通大学医学院附属仁济医院血液科门诊或住院的ITP发病期患者10例,以及10例无骨髓异常的非ITP患者作为对照(normal control,NC),收集骨髓穿刺标本,分离MSC,流式细胞术检测其表面抗原标志物。使用CCK-8试剂盒和EdU细胞增殖检测试剂盒检测及比较ITP患者来源(MSC-ITP)和对照组来源(MSC-NC)的MSC增殖水平差异,并使用微管荧光探针检测细胞形态的变化。使用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡情况,采用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒检测细胞凋亡水平。通过不同浓度的地西他滨以不同的时长处理MSC-ITP,探索地西他滨促其增殖的最佳浓度及处理时间。以最佳浓度的地西他滨处理MSC-ITP,观察其对细胞凋亡水平的影响。Western blotting检测细胞凋亡相关通路蛋白的表达,以及地西他滨的影响。结果·与MSC-NC相比,MSC-ITP细胞形态异常,细胞核碎裂、皱缩较多,体外增殖水平减弱,基础凋亡率增加。地西他滨刺激MSC-ITP增殖的最佳工作浓度为2.5μmol/L,最佳处理时间为24 h。2.5μmol/L地西他滨处理MSCITP 24 h后细胞核形态得到改善,细胞核的碎裂和凝聚减少,凋亡率显著降低(P<0.05)。Western blotting结果表明,地西他滨处理后,MSC-ITP中线粒体凋亡通路相关蛋白BAX降低,胱天蛋白酶(caspase3)和cleaved-caspase3减少(均P<0.05)。结论·ITP患者骨髓来源的MSC形态异常,体外增殖水平减弱,基础凋亡率增加;低剂量地西他滨可以促进该细胞增殖,抑制其凋亡;该作用可能是通过线粒体凋亡途径介导的。 展开更多
关键词 免疫性血小板减少症 骨髓间充质干细胞 地西他滨 DNA甲基转移酶抑制剂 细胞凋亡
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PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235对弥漫大B细胞株靶向作用的体外研究 被引量:2
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作者 付婉彬 王文方 +4 位作者 刘之茵 陈丽韵 郭沛 李军民 徐子真 《诊断学理论与实践》 2013年第4期414-418,共5页
目的:在体外水平研究新型PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235对弥漫大B细胞株的靶向作用机制。方法:采用CCK-8法检测NVP-BEZ235对弥漫大B细胞株SUDHL-4和DB细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,蛋白印迹法检测靶蛋白及PI3K/AKT... 目的:在体外水平研究新型PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235对弥漫大B细胞株的靶向作用机制。方法:采用CCK-8法检测NVP-BEZ235对弥漫大B细胞株SUDHL-4和DB细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,蛋白印迹法检测靶蛋白及PI3K/AKT/mTOR信号转导通路上下游分子、细胞周期及凋亡相关分子的变化。结果:NVP-BEZ235可呈剂量依赖性地抑制弥漫大B细胞株SUDHL-4和DB的增殖;使细胞周期阻滞在G0/G1期,并促进细胞凋亡;蛋白印迹检测显示NVP-BEZ235能够抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路中关键分子的活性,下调细胞周期相关蛋白,上调凋亡相关蛋白。结论:PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235可在体外水平抑制弥漫大B细胞株SUDHL-4和DB的生长,使细胞周期阻滞在G0/G1期,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 P13K mTOR途径 NVP—BEZ235 弥漫大B细胞株 凋亡 细胞周期
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弥漫大B细胞淋巴瘤中血清和石蜡包埋组织标本miR-155表达水平对疗效及预后判断的意义 被引量:2
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作者 徐岚 肖丹 +2 位作者 付婉彬 李昕 钟华 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期421-430,共10页
目的:探讨微RNA(microRNA,miR)-155表达水平是否可作为利妥昔单抗(rituximab)联合CHOP方案[环磷酰胺(cyclophosphamide)+多柔比星(doxorubicin)+长春新碱(vincristin)+强的松(prednisone)](R-CHOP方案)治疗弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse la... 目的:探讨微RNA(microRNA,miR)-155表达水平是否可作为利妥昔单抗(rituximab)联合CHOP方案[环磷酰胺(cyclophosphamide)+多柔比星(doxorubicin)+长春新碱(vincristin)+强的松(prednisone)](R-CHOP方案)治疗弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)患者预后的生物标志物,并验证血清与石蜡包埋组织(formalin‐fixed and paraffin-embedded,FFPE)标本中miR-155表达水平的一致性。方法:选取2014年1月—2018年9月上海交通大学医学院附属仁济医院南院收治的初诊DLBCL患者83例。收集所有患者治疗前血清标本,其中46例患者同时收集FFPE标本。采用实时荧光定量PCR法检测miR-155在83例DLBCL患者血清、20例正常健康人群血清和46例DLBCL患者FFPE标本中的表达水平。通过Pearson线性相关性分析、χ~2检验、Mann-Whitney检验、COX多因素比例风险回归模型以及Kaplan-Meier法分析miR-155表达水平与患者疗效及预后的相关性。结果:DLBCL患者血清miR-155表达水平明显高于正常健康人群(P=0.009)。DLBCL患者血清与FFPE标本中miR-155表达水平具有一致性(r=0.3903,P=0.029)。C-myc阳性表达组患者miR-155的表达水平明显高于C-myc阴性组患者(P=0.002)。依据国际预后评分(international prognostic index,IPI)危险度分层,随着危险度增加,miR-155的表达水平上调(P=0.007)。miR-155表达水平越高预示完全缓解率、无进展生存率和总生存率越低。结论:miR-155作为生物标志物用于判断R-CHOP方案治疗DLBCL的疗效及预后具有临床意义。血清中循环miR-155与FFPE标本中miR-155的检测结果一致,因此检测血清中miR-155的表达水平可进一步推广应用于临床早期诊断及判定预后。 展开更多
关键词 淋巴瘤 大B细胞 弥漫性 微RNAS 预后
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