冷应激条件下猪脂肪组织中脂联素及其受体mRNA水平的表达变化

为了研究冷应激对脂肪代谢的影响,本试验分别在-15～-10℃、-10～-5℃、-5～0℃、15～18℃温度条件下采取猪颈部、背部皮下和内脏系膜脂肪组织,通过荧光定量RT-PCR方法检测脂联素及其受体mRNA的表达水平。结果显示,随着冷应激强度的逐渐加大,在颈部、背部皮下、内脏系膜Adiponectin mRNA的表达量逐渐降低,差异显著(P<0.05);内脏系膜中AdipoR 1和AdipoR 2mRNA表达量先逐渐升高后恢复正常,且差异极显著(P<0.01);背部皮下AdipoR 2mRNA表达量先逐渐降低后恢复正常,差异极显著(P<0.01),AdipoR 1mRNA表达量没有明显变化;颈部皮下AdipoR 2mRNA的表达量先逐渐升高后恢复正常,差异极显著(P<0.01),AdipoR 1mRNA的表达量先升高后恢复正常,而后又升高,差异极显著(P<0.01)。结果表明,脂联素及其受体参与冷应激过程,它们可能与冷应激条件下脂肪组织的重新分布有重要的关系。

β-羟丁酸对中枢神经系统的作用及机制研究进展

β-羟丁酸(β-hydroxybutyric acid,BHBA)是血液中酮体的重要组成成分,在禁食和能量供应不足的情况下,可作为大脑和其他组织的重要能量来源。推测BHBA可能作为中枢神经系统的信号物质在能量和摄食行为调节中发挥重要作用。由于BHBA对神经元具有神经保护性作用,所以有可能成为治疗神经元疾病的有效物质。文章主要概述了BHBA在中枢神经系统中的作用及其可能的信号通路。

μ型阿片受体与炎症性肠病

μ型阿片受体(mu opioid receptor,MOR)作为G蛋白偶联受体的成员之一,在疼痛传递、炎症过程、免疫调节等多种生理及病理反应中发挥重要作用.MOR在中枢和外周都有大量表达,在胃肠道中主要分布于肠道淋巴细胞、肠肌层及黏膜下神经元中,对肠道蠕动、分泌功能都有重要作用.一些动物实验和体外实验结果表明MOR的激动剂在治疗炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)方面具有重要的潜在价值,已经成为治疗IBD的一种新靶点.本文对MOR的功能及其与IBD的潜在联系进行了综述,为深入研究治疗IBD的新途径提供理论依据.

SCFAs对DCAPCs中GH、PRL合成和分泌的影响及其初步机制研究中期报告

该研究采用RT-PCR、ELISA、液体闪烁测量技术、western blot等方法研究了SCFAs对DCAPCs中c AMP/PKA/CREB信号通路的影响,以及对GH、PRL表达和分泌的影响,并初步认识了SCFAs调节DCAPCs中GH、PRL表达和分泌的分子机制。SCFAs可以通过与DCAPCs细胞膜上的GPR41/43相结合,激活Gαi蛋白,抑制AC的酶活性,降低胞内c AMP含量,从而降低PKA活性和CREB磷酸化水平,最终以直接或间接的方式下调了GH和PRL的合成和分泌。此外,SCFAs可以降低DCAPCs的细胞活性,这也可能是导致GH和PRL分泌量减少的原因之一。

奶牛隐性乳房炎研究进展

奶牛隐性乳房炎发病率高,分布范围广,病因复杂,给我国乃至世界乳业带来了巨大的经济损失。随着分子生物学和计算机技术的发展与融合,如巢式PCR、宏基因组分析以及免疫学检测技术的普及给该病的诊断带来了新的方向,能够更加快速、准确、便捷地确定病原及病因。另外,在该病的治疗方面,中草药以及新型药物正在逐步取代传统抗生素的使用,亦成为该病治疗的新趋势。从奶牛隐性乳房炎的发病规律、病因、诊断和治疗方面介绍国内外最新研究进展。

吉林省猪圆环病毒3型的分子流行病学调查及遗传演化分析

为了解猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)在吉林省的流行情况和分子生物学特性,本研究通过PCR方法对吉林省2015-2017年的484份血清样品进行PCV3检测,将PCV3检测阳性的样品进行ORF2基因扩增和测序,并利用生物信息学软件DNAStar和Mega 6.06对ORF2基因的分子生物学特性进行分析。结果显示,吉林省2015-2017年PCV3样品总感染率和猪场感染率分别为28.1%(136/484)和65.8%(25/38),且呈逐年上升趋势。同源性分析结果表明,本研究获得的4株PCV3 ORF2基因的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为98.3%～98.9%和97.7%～99.5%,4株PCV3 ORF2基因与国内外参考毒株ORF2基因的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为97.7%～99.7%和96.7%～100%。遗传进化分析表明,PCV3存在2个亚群:PCV3a和PCV3b。本试验分离的PCV3毒株分别位于2个亚群上,1株属于PCV3a亚群,3株属于PCV3b亚群。PCV3毒株Cap蛋白第24(A、V)和27位(R、K)氨基酸的不同可能与PCV3毒株的进化相关。本试验结果表明,PCV3在吉林省猪群和猪场中存在很高的感染率,PCV3毒株之间高度保守,本研究结果为PCV3的分子特性研究提供了参考依据。

数码显微互动系统在动物组织学与胚胎学实验教学中的应用

动物组织学与胚胎学是一门形态学科,具有很强的直观性,实验课的学习主要通过显微镜观察动物组织切片标本的基本形态结构,验证理论课内容,将抽象难懂的书本知识具体化、形象化,利于学生加强记忆、掌握所学知识。将数码显微互动系统应用于动物组织学与胚胎学实验教学中,实现了师生互动、资源共享,形成了讨论式教学,调动了学生的学习兴趣,提高了教学质量与教学效果。

局域网教学环境对动物机能学实验教学的促进作用

网络技术在高校实验教学中得到越来越广泛的应用。吉林大学动物机能学实验室几年前组建了多媒体教学局域网,实现了资源共享和教学方式的多样化。实践证明,局域网教学环境建设有利于整合教学资源、提升教师水平、激发学生学习兴趣、提高学生创新思维能力和综合素质,对动物机能学实验教学起到了良好的促进作用。

玉米黄素对TGF-β1诱导的小鼠乳腺上皮细胞EMT过程的影响

奶牛乳腺纤维化对畜牧业造成巨大的经济损失,上皮细胞间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)过程产生的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)引发纤维化表型指标升高,是诱导乳腺纤维化病变的主要原因,因此有效缓解上皮细胞EMT过程是缓解乳腺纤维化的潜在防治手段。玉米黄素(zeaxanthin,ZEA)是一种天然类胡萝卜素,研究表明具有缓解EMT过程的生物学功能,并且具有成本相对低廉的优势,但是ZEA对乳腺纤维化的影响及其潜在作用机制尚缺乏研究。因此本试验的目的是探究ZEA对转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的小鼠乳腺上皮细胞(mice mammary epithelial cells,mMECs)EMT过程中纤维化表型指标的影响及其潜在机制。试验分为5组,空白对照组、ZEA组、TGF-β1模型组、TGF-β1+ZEA(5μmol/L)组、TGF-β1+ZEA(10μmol/L)组。通过CCK8、Western blot和分子动力学模拟等技术探究ZEA对TGF-β1诱导的mMECs纤维化相关指标的影响。结果显示,ZEA显著缓解了TGF-β1诱导的mMECs的纤维化表型指标的升高,具体表现为,E-cadherin蛋白表达显著升高,Collagen 2、α-SMA和Vimentin蛋白表达显著降低。进一步研究表明,ZEA显著抑制TGF-β1/Smad信号通路的激活。综上所述,ZEA通过抑制TGF-β1/Smad信号通路的激活,抑制纤维化表型指标的升高,从而缓解mMECs细胞的EMT过程。

β-羟丁酸抑制下丘脑神经细胞PIF基因表达和蛋白分泌

分离培养Wistar新生大鼠的下丘脑神经细胞,在培养第7天以不同浓度的β-羟丁酸(β-hydroxybutyric acid,BHBA)(0、0.05、0.5、1、2mmol/L)处理24h,收集上清和细胞,提取细胞总RNA,分别利用荧光定量RT-PCR和ELISA的方法检测催乳素释放抑制因子(Prolactin release-inhibiting factor,PIF)基因表达和蛋白分泌的变化。结果显示,BHBA能显著抑制PIF基因表达和蛋白分泌,而且具有剂量依赖性。结果表明,BHBA可能做为信号分子调节下丘脑的分泌功能。

冷应激对猪脂肪、肝脏、心脏与肾脏组织中PPARγ2 mRNA及蛋白表达的影响

为了研究冷应激对机体的影响及过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)在冷应激中的作用,本试验选用30头军牧一号猪,并随机分成5组,包括常温对照组和4个冷应激组。常温组在(21±2)℃饲养,冷应激组的温度设置分别为:(-10±2)、(-5±2)、(0±2)、(5±2)℃。冷应激2h屠宰后分别采集猪腹腔脂肪、颈部皮下脂肪、胸部皮下脂肪、肝脏、心脏与肾脏组织样品提取总RNA与总蛋白。通过荧光定量PCR技术检测了PPARγ2mR-NA的表达量;通过Western blot检测PPARγ2蛋白表达量。结果显示,各温度组猪腹腔脂肪、颈部皮下脂肪、胸部皮下脂肪、肝脏、心脏PPARγ2mRNA及蛋白表达量总体上差异显著(P<0.01),肾脏PPARγ2mRNA表达量总体显著升高,但其蛋白表达量总体呈下降趋势。结果表明,PPARγ2对冷刺激非常敏感,它除了可以调节冷应激时的脂肪代谢平衡,还对心脏有较好的保护作用,但是对肾脏的作用有限。本试验显示了冷应激中PPARγ2在脂肪代谢与能量代谢中作用,为研究冷应激对机体的影响及畜禽品质的提高奠定了基础。

血栓闭塞性脉管炎大鼠模型的建立及鉴定

利用手术结合化学造模法,建立血栓闭塞性脉管炎大鼠模型,并运用病理学、免疫学及分子生物学方法对模型进行鉴定。结果显示,利用股动脉注射月桂酸钠的方法,成功构建类似于人血栓闭塞性脉管炎的大鼠动物模型。模型大鼠病变明显,病变部位血管内皮细胞Icam-1、Vcam-1 mRNA表达显著升高,模型大鼠血清中TXB2、AECA含量显著升高,与人血栓闭塞性脉管炎自然发病病理特点相似。本试验构建的血栓闭塞性脉管炎大鼠模型可用于进一步研究,可为该疾病发病机理研究与治疗方法探索提供平台。

IL-21及其受体在IBD大鼠结肠、大脑组织中的表达规律

从脑-肠互作的角度出发,研究IL-21及其受体在TNBS化学诱导的IBD模型大鼠的结肠、大脑组织中mR-NA表达水平以及血清蛋白水平变化,以此探讨IL-21在炎症性肠病中的调节作用。建立了大鼠IBD模型,用荧光定量PCR方法检测IL-21及其受体mRNA在结肠、大脑组织中的表达水平变化,并采用ELISA方法测定血清中IL-21在IBD大鼠不同发病时期的蛋白水平。结果显示:IL-21及其受体在IBD大鼠结肠和大脑组织中的mRNA水平的呈现一致变化,即随着炎症的加剧而逐渐增加,在病变最为严重的时候达到最大值,而随着炎症的消退逐渐恢复至正常水平。在血清中,IL-21蛋白浓度变化也表现出一致的变化趋势。结果表明,IL-21参与了肠道炎症进程,并且IL-21可能通过脑-肠互作来调节IBD的炎症进程。

冷应激对猪解耦联蛋白3 mRNA表达的影响

为探讨不同冷刺激强度对猪解耦联蛋白3(UCP3)mRNA表达的影响,试验选择"军牧1号"猪30头,随机均分成5组,包括常温对照组和4个冷刺激组,常温组在(21±2)℃饲养后宰杀,冷刺激组在温度为(-10±2)、(-5±2)、(0±2)、(5±2)℃,冷暴露2 h后迅速宰杀,分别取颈部脂肪、骨骼肌和肝脏组织,通过实时定量PCR方法检测各样品中的UCP3 mRNA表达水平。结果表明:冷刺激后猪UCP3在颈部脂肪、骨骼肌表达量升高,温度越低UCP3基因表达量越高;冷刺激后肝脏组织UCP3基因表达水平提高,但与对照组差异不显著(P>0.05)。说明UCP3在机体适应冷环境过程中具有重要的生物学作用。

清髓愈疽丹对血栓闭塞性脉管炎模型大鼠血栓相关因子的影响

通过人工建立血栓闭塞性脉管炎大鼠模型,结合病理学切片结果,利用荧光定量PCR和ELISA方法检测病变组织中的Icam-1、Vcam-1和血清中的血栓素B2(TXB2)、抗内皮细胞抗体(AECA)的含量。结果表明清髓愈疽丹能够通过有效地降低Icam-1、Vcam-1、TXB2、AECA的含量,抑制淋巴细胞、白细胞的浸润和血小板的黏附聚集,阻止血液高凝状态的形成;延缓损伤内皮处免疫复合物的形成,从而减轻病变部位的炎症与损伤,因此能抑制血栓的形成,对TAO有确实的疗效。

IL-21对巨噬细胞分泌功能的影响及机制

白细胞介素21(IL-21)是新近发现的γ链(γc)家族中的一种调节性细胞因子,主要由活化的CD4+T细胞、NK T细胞分泌,能够激活T细胞并促进其分泌细胞因子,从而参与调节机体免疫应答。巨噬细胞具有很强的吞噬能力,是机体固有免疫的重要组成细胞,同时又是一类主要的抗原递呈细胞,在机体固有免疫和获得性免疫应答、炎症反应以及组织修复和重建中发挥重要的作用,并能通过分泌大量的细胞因子参与机体炎症反应。

μ型阿片肽受体在炎症性肠病大鼠中的表达变化规律

从神经-内分泌-免疫网络与机体免疫稳态调节的角度出发,通过建立大鼠炎症性肠病(IBD)动物模型,应用荧光定量PCR方法检测μ型阿片肽受体(MOR)在IBD大鼠不同组织和外周血淋巴细胞中的表达水平,并采用ELISA方法测定血清和脑脊液中MOR的内源性配体(β-内啡肽;强啡肽)在IBD大鼠不同发病时期的表达水平变化,探讨MOR在炎症性肠病中的调节作用。结果显示,MOR在大鼠下丘脑、胸腺和外周血淋巴细胞中的mRNA水平随着炎症的加剧而逐渐增加,而在结肠组织中随着炎症的加剧其表达逐渐降低,且在病变最为严重时变化最为显著,随着炎症反应的消退逐渐恢复至正常水平。在血清和脑脊液中,内源性配体强啡肽和β-内啡肽蛋白浓度在病变高峰期显著降低。结果表明,MOR可能在IBD发生、发展中发挥调控作用。

乙酸对体外培养的大鼠下丘脑神经细胞功能的影响

乳脂是牛奶中重要的营养成分,其前体物主要有乙酸、β-羟丁酸(BHBA)、游离脂肪酸(NEFA)和甘油三酯(TG)等。神经内分泌网络可以作用于肝脏和脂肪组织调控脂代谢以满足乳脂合成。那么,乳脂前体物能否反馈调节神经内分泌网络而使乳脂的合成处于一个动态平衡的过程,目前尚未见相关报道。

β-羟丁酸对体外培养的大鼠下丘脑神经细胞功能的影响

乳脂是牛奶中重要的营养成分,其前体物主要有乙酸、β-羟丁酸(β-hydroxybutyric acid,BHBA)、游离脂肪酸(NEFA)和甘油三酯(TG)等。神经内分泌网络可以作用于肝脏和脂肪组织调控脂代谢以满足乳脂合成。那么,乳脂前体物能否反馈调节神经内分泌网络而使乳脂的合成处于一个动态平衡的过程,目前尚未见相关报道。

冷应激对猪腹腔脂肪组织中UCP3 mRNA表达的影响

冷应激是影响北方地区冬季猪生产性能的主要因素脂肪是冷应激作用的重要靶器官之一,猪在冷应激时,体内脂肪代谢发生新的变化。解耦联蛋白(UCP)是一类位于线粒体内膜的质子转运载体蛋白,它们参与机体的能量代谢,可将呼吸链与ATP的产生过程解耦联,使质子化学梯度消失,能量以产热形式散发,增加能量的消耗。目前。