刀鲚染色体核型分析

以刀鲚的鳃和头肾组织为材料,采用腹腔注射植物血细胞凝集素(PHA)、秋水仙素法制备染色体标本,进行染色体核型分析;同时,采用石蜡组织切片以确定每尾刀鲚的性别。结果显示,刀鲚雌雄染色体存在差异,雌性染色体数目为2n=47,雄性染色体数目为2n=48,核型公式为2n(♀)=2X=47t(SAT)、2n(♂)=2X=48t(SAT);最长的一对染色体上存在随体,次缢痕;且刀鲚存在性染色体,其性染色体型为ZZ-ZO型。

黄鳝性逆转相关基因的表达及定位分析

为研究F25基因与黄鳝性逆转关系,首先利用荧光定量PCR技术对该基因在各期性腺组织中的表达量进行分析,然后利用原位杂交技术合成cRNA探针对F25基因进行杂交定位分析。结果显示,F25基因在II、III期卵巢中仅有微量表达,而在IV卵巢中表达开始迅速增加,同时随着卵巢发育成熟、排卵、退化表达量也呈现不同程度的升高,在精巢中该基因的表达量达到最大值;经定位分析发现,该基因在早期卵巢中基本不表达,在IV、V期卵巢中主要在体细胞中表达,而在精巢雄性生殖细胞中基本不存在F25基因的表达,由此推测F25基因可能在性逆转过程中起到一定的作用,且主要作用于性腺组织中的体细胞。

黄鳝性逆转差异表达基因F25 cDNA的克隆和分析

首先运用组织学手段对黄鳝性腺发育过程进行观察分析,然后运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了差异表达基因(F25)cDNA,并利用半定量RT-PCR分析了该基因于各期性腺组织中的表达。结果表明,通过光镜观察到性腺发育的8个阶段:Ⅲ～Ⅵ期卵巢、间期性腺、早期精巢和晚期精巢。基因F25在卵巢发育早期不表达,即在Ⅱ、Ⅲ期卵巢中不表达,在Ⅳ期卵巢开始表达,同时随着卵巢发育成熟、排卵、退化及精巢发育,表达量明显升高,由此推测基因F25可能在性逆转过程中起到一定的作用。基因F25 cDNA全长为1 139 bp,共编码257个氨基酸,在线SignalP分析表明,基因F25肽链不存在信号肽,为非经典分泌蛋白,同源性分析结果显示该基因无同源性序列,视为新报道的基因。