两种真核蛋氨酸裂解酶基因克隆、鉴定及分析比较

目的:克隆并分析从阴道毛滴虫中得到两种蛋氨酸裂解酶同工酶基因(TVmgl1,TVmgl2)。方法:提取阴道毛滴虫总RNA,由逆转录获取cDNA,PCR大量扩增得到TVmgl1和TVmgl2基因,分离纯化后,连接pMD-19-T克隆载体,转菌后筛选得到阳性克隆,测序得到碱基序列。结果:序列分析所得基因,序列TVmgl1为1191bp,TVmglL2为1197bp,其编码氨基酸序列TVMGL1与TVMGL2有69%的同源性。结论:克隆得到TVmgl1、TVmgl2基因。

METase在不同原核表达系统中的表达和活性比较

目的:构建L-蛋氨酸γ-裂解酶(Metase)基因的两种高效原核表达载体,建立最佳高效原核表达体系。方法:在Metase基因已经克隆的基础上,通过分子克隆技术构建两种重组表达质粒pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase,重组质粒转化感受态大肠杆菌Dh5α,诱导表达,测定Metase活性,统计分析比较。结果:成功构建出两种高效重组表达质粒pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase,经诱导后都能测出Metase活性。结论:重组表达质粒pBV220-Metase具有比pGEX-4T-1-Metase更强的活性,可作为Metase的高效表达体系。

中药复方培元康对蛋鸡产蛋和蛋品质的影响

选用黄芪、白术等七种中药制成复方中药散剂培元康,按0.2%比例添加,经对产蛋期的高产蛋鸡、夏季蛋鸡、患病后蛋鸡、老龄蛋鸡进行实验观察,培元康可减少高产蛋鸡与夏季热应激蛋鸡的软蛋、破蛋、畸形蛋率(P<0.01);显著降低热应激对蛋鸡产蛋性能的影响(P<0.05);促进患病后蛋鸡产蛋率的快速恢复(P<0.01);提高老龄蛋鸡产蛋率(P<0.01)。检测实验所产鸡蛋,符合国家关于鸡蛋的食品卫生要求。

蛋氨酸酶肿瘤治疗的研究进展

肿瘤细胞蛋氨酸依赖性的增高是一种特异性的代谢缺陷,这种代谢缺陷也是选择性治疗肿瘤的一个靶点。研究发现,蛋氨酸γ-裂解酶(蛋氨酸酶、L-Methionine-γLyase)可以特异地裂解细胞内外的蛋氨酸,从而强烈地抑制肿瘤细胞的生长,并诱发其凋亡,但对正常细胞无影响,从而发挥抗肿瘤的作用。现在还发现,蛋氨酸酶消除体内的蛋氨酸,能够导致基因的甲基化作用和DNA合成发生改变,以增强抗肿瘤效果。动物研究和临床试验表明,蛋氨酸酶可以消除多种依赖蛋氨酸的肿瘤细胞,因此是一种蛋氨酸限制抗癌策略。蛋氨酸酶显示出作为一种新型的基因治疗方法的巨大前景。本文特对此做一综述。