血必净注射液对LPS诱导的急性肺损伤大鼠炎症反应及细胞凋亡的影响

目的观察血必净注射液对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤大鼠炎症反应及细胞凋亡的影响。方法将30只雄性SD大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(20只),造模组造模后(尾静脉注射LPS)随机分为模型组(10只)和血必净注射液组(10只)。采用肺组织湿重/干重评估肺组织水肿程度,ELISA检测血清炎症因子IL-6、IL-1β、IL-4和IL-18的水平,HE染色观察大鼠肺组织病理损伤情况,TUNEL染色观察肺组织细胞凋亡情况,RT-PCR和Western blot检测凋亡因子胱天蛋白酶-3(Caspase-3)和胱天蛋白酶-8(Caspase-8)的mRNA含量和蛋白水平。结果与正常组比,模型组大鼠肺组织湿重/干重升高(P<0.01),IL-6、IL-1β、IL-4和IL-18升高(P<0.001),肺组织出现损伤和炎症浸润,细胞凋亡率升高(P<0.001),Caspase-3和Caspase-8的mRNA、蛋白表达升高(P<0.01或P<0.001)。与模型组比,血必净注射液组大鼠肺组织湿重/干重下降(P<0.05),IL-6、IL-1β、IL-4和IL-18降低(P<0.05或P<0.01),肺组织损伤和炎症浸润情况明显改善,细胞凋亡率下降(P<0.001),Caspase-3和Caspase-8的mRNA和蛋白表达降低(P<0.01或P<0.001)。结论血必净注射液可改善急性肺损伤大鼠的肺组织损伤和炎症反应,其机制可能与抑制细胞凋亡有关。

反相高效液相色谱法测定生地茶止咳合剂中岩白菜素的含量

目的建立测定生地茶止咳合剂中岩白菜素含量的反相高效液相色谱法。方法采用Phenomenex C18-ODS(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇-水(23∶77),流速:1.0mL.min-1,检测波长:275nm,柱温:30℃。结果岩白菜素在0.040 8～0.408μg线性关系良好,(r=0.999 9);平均回收率为98.5%(n=9)。结论该方法操作简便、快速,适用于生地茶止咳合剂中岩白菜素的含量测定。

反相高效液相色谱法测定补血生发丸中二苯乙烯苷的含量

目的建立测定补血生发丸中2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量的反相高效液相色谱法。方法采用Hypersil ODS C18色谱柱(250mm×4.0mm,5μm),流动相:乙腈-水(17∶83);流速:1.0mL·min-1;检测波长:320nm;柱温:30℃。结果二苯乙烯苷在0.0352～0.352μg线性关系良好(r=0.9999);平均回收率为98.2%(n=6)。结论该方法操作简便、快速,适用于补血生发丸中二苯乙烯苷的含量测定。

湿疹喷雾剂的蒸馏与水提取工艺研究

目的确定湿疹喷雾剂的最佳蒸馏与水提提取工艺条件。方法以丹皮酚含量为指标,优选徐长卿蒸馏收集馏出液的最佳体积;以苦参碱含量(HPLC法测定)和浸出物为指标优选水提最佳工艺。结果徐长卿蒸馏,收集相当徐长卿重量8倍的馏出液;蒸馏后药渣与苦参等药材饮片碎断,过5目筛,浸泡1 h,分别加入8倍量、6倍量的水煎煮回流提取2次,时间分别为2 h;1.5 h,所得丹皮酚和苦参碱等最多。结论该工艺条件提取效率高,提取工艺合理。

HPLC法同时测定人血清中氯硝西泮、硝西泮、三唑仑浓度

目的建立单步萃取-HPLC法同时测定人血清中硝西泮、氯硝西泮、三唑仑浓度。方法血清样品采用二氯甲烷单步萃取,采用Ultimate XB-C18色谱柱(250.0mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇∶水∶乙腈=10∶56∶34,流速为1mL/min,检测波长为254nm,柱温为30℃,卡马西平为内标物。结果硝西泮、氯硝西泮、三唑仑的线性范围分别为32.5～650.0μg/L(r=0.9997)、31.5～630.0μg/L(r=0.9999)、74～1480μg/L(r=0.9997),最低检测限分别为8.13μg/L、7.88μg/L、18.5mg/L,日内精密度和日间精密度良好,回收率较高。结论本法操作简便,结果准确可靠。可满足临床快速监测的需要。

氮酮、丙二醇对湿疹喷雾剂中黄芩苷透皮吸收的影响

目的提高湿疹喷雾剂对皮肤的渗透能力,增强疗效。方法采用1定制的改良Franz扩散池,大鼠腹皮作透皮试验,一阶导数光谱法测定湿疹喷雾剂中黄芩苷透皮吸收量,对氮酮、丙二醇及二者按不同比例的促渗效果进行考察。结果氮酮、丙二醇最佳浓度的合用与单用比较,2%氮酮的累积渗透百分率达9%所需时间(T9%)值最快,经皮渗透5 h内累积渗透百分率Q5最大。结论湿疹喷雾剂中,加入2%氮酮能达到最好的促渗效果。

反相高效液相色谱法同时测定人血清中茶碱和多索茶碱的浓度

目的建立反相高效液相色谱法同时测定人血清中茶碱和多索茶碱浓度的分析方法。方法血清样品加入咖啡因为内标,三氯醋酸沉淀蛋白,采用Ultimate XB-C18(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱分离,流动相为甲醇:水=30:70,流速为1.0mL/min,检测波长为273 nm,柱温为30℃。结果茶碱在0.97～48.40mg/L范围内,线性关系良好,r=0.9999;多索茶碱在1.10～54.80mg/L范围内,线性关系良好,r=0.9998。日内精密度和日间精密度良好,茶碱、多索茶碱的低、中、高3种浓度方法回收率分别为6.01%、2.25%、0.86%和5.71%、2.02%、1.07%。结论该法操作简便,结果准确可靠,可满足临床快速监测的需要。

影响青霉素皮试液浓度准确性的因素探讨

目的通过高效液相色谱仪对两种方法配制的青霉素皮试液浓度进行测定,探讨影响配制青霉素皮试液浓度准确性的因素,为临床操作提供实验室依据,促进安全用药。方法设对照组(n=20)与实验组(n=15),配制青霉素皮试液,用高效液相色谱仪检测浓度,采用SPSS软件包对数据进行统计学处理。结果两组两种配制青霉素皮试液方法比较,P<0.05差异有显著意义;采用80万U与160万U两种青霉素配制青霉素皮试液,差异无显著意义,但对照组与实验组配制出的青霉素皮试液浓度与理论值40 U/0.1 ml差异有显著性意义。结论实际配制的皮试液浓度比理论值高,一次性塑料注射器无效腔容积的存在及操作中如何做到充分摇匀,是影响皮试液浓度准确性的两个重要因素。

黄芪对酒精性肝损伤小鼠MDA、GSH和TG的影响及肝脏保护作用的研究

目的:探讨黄芪总提取物(AM)对酒精性肝损伤小鼠丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)和甘油三酯(TG)的影响及其对肝脏保护作用。方法:将50只雄性昆明种小鼠随机分为5组:空白对照组、模型对照组和黄芪总提取物低、中、高剂量组,分别给药30d后,按试剂盒说明测定MDA含量、GSH活力和TG,进行肝脏病理组织学检查。结果:中、高剂量组能显著降低肝匀浆MDA含量和提高GSH含量;高剂量组能显著降低TG含量和改善肝脏脂变程度,与模型对照组比较,差异均具有统计学意义。结论:AM具有降低小鼠MDA和TG含量,提高GSH含量,对其肝脏具有保护作用。

乌骨藤总苷抑制肝癌细胞增殖和AFP分泌

目的研究乌骨藤总苷对肝癌细胞增殖的作用及其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT比色法)或移植瘤小鼠模型,观察不同浓度乌骨藤总苷对人肝癌Bel-7404、HepG2细胞和小鼠肝癌Hepl-6细胞生长的影响;研究乌骨藤总苷抑制HepG2细胞生长与调控甲胎蛋白AFP分泌的关系。结果乌骨藤总苷对人肝癌Bel-7404、HepG2细胞和小鼠肝癌Hepl-6细胞生长有显著的抑制作用,能显著降低AFP的分泌。结论乌骨藤总苷抑制肝癌细胞增殖其机制可能与抑制AFP分泌有关。

治疗药物监测危急值报告制度的建立及应用

目的探讨治疗药物浓度监测危急值报告的方式和意义。方法建立治疗药物监测危急值报告制度,对出现的危急值执行报告程序,并对医护人员进行危急值相关知识以及危急值的报告和反馈流程进行培训。结果 2010~2012年共执行危急值报告66例,有41例危急值为药物中毒,占危急值报告中的62.12%;有25例危急值为常规剂量下个体差异或药物相互作用体内蓄积所造成,占危急值报告中的37.88%。这66例患者因报告及时,得到了紧急处理,受到医师和患者的好评。医护人员对危急值的知晓率逐年提高而危急值的平均处理时间逐年降低。结论危急值报告制度很好的执行,规范了危急值报告流程,提高了医护人员对危急值重要性的认识及危急值的处理效果。

湿疹喷雾剂质量标准的研究

目的制定湿疹喷雾剂的质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别徐长卿、黄柏、冰片、黄芩和苦参,高效液相色谱法测定丹皮酚的含量。结果薄层斑点清晰,阴性无干扰;含量测定平均回收率为100.3%,RSD为0.59%。结论所建方法准确、重复性好,可有效控制该制剂的质量。

单步萃取-HPLC法同时测定人血清中艾司唑仑及阿普唑仑浓度

目的建立RP-HPLC法同时测定人血清中艾司唑仑、阿普唑仑浓度。方法血清样品采用二氯甲烷单步萃取,采用Ultimate XB-C18(250.0 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇:水=66:34,流速为1.0 mL/min,检测波长为223 nm,柱温为30℃,2-氨基-2氯-5硝基二苯酮为内标物。结果艾司唑仑、阿普唑仑的线性范围分别为62.5～3 130.0μg/L(r=0.9995)和30.5～3 050.0μg/L(r=0.9998),最低检测限分别为20.8μg/L和20.3μg/L,日内精密度和日间精密度良好,回收率较高。结论该法操作简便,结果准确可靠。可满足临床快速检测的需要。

头孢地嗪钠与3种注射液配伍稳定性的观察

目的考察注射用头孢地嗪钠与5%葡萄糖氯化钠注射液、0.9%氯化钠注射液和5%葡萄糖注射液配伍的稳定性。方法观察配伍液外观及其pH值变化,采用高效液相色谱法测定配伍液中头孢地嗪钠的含量。结果室温6 h内,注射用头孢地嗪钠与5%葡萄糖生理盐水、0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液配伍液外观、pH值、含量基本不变。结论室温6 h内,注射用头孢地嗪钠在3种输液中是稳定的。

STAT_4基因缺失增强髓系抑制性细胞动员促进小鼠炎症相关肠癌的发生

目的探索信号转导与转录因子4(STAT4)对髓系抑制性细胞(MDSCs)动员和分化的调控及其在结肠癌发生发展中的作用。方法应用信号转导与转录激活因子4基因敲除(STAT4-/-)小鼠建立炎症相关肠癌模型,STAT4-/-小鼠通过腹腔注射氧化偶氮甲烷(AOM)和饮用含DSS水诱发急性肠炎,建立炎症相关结肠肿瘤模型并鉴定;应用流式细胞技术分析STAT4基因缺失对免疫细胞亚群分化和动员的影响。结果 STAT4-/-小鼠表现为明显的结肠肿瘤病变,而野生型(WT)对照组在结肠的中下段和肛门处只有炎性病变和上皮组织增生;CD11b+Gr-1+MDSCs在STAT4-/-小鼠的外周血、脾脏和骨髓内的百分率较WT对照组小鼠显著增加(P<0.05)。结论 STAT4缺失能促进小鼠结肠肿瘤的发生,其机制可能与STAT4信号通路抑制导致CD11b+Gr-1+MDSCs的异常分化和动员有关。

RP-HPLC法测定人血清中茶碱浓度的改进

目的建立反相高效液相色谱法测定人血清中茶碱浓度。方法血清样品加入咖啡因为内标,10%三氯醋酸去蛋白,采用Ultimate XB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱分离,流动相为甲醇∶水=30∶70,流速为1.0 mL/min,检测波长为273 nm,柱温为30℃。结果茶碱在1.76~44.00 mg/L浓度范围线性关系良好,r=0.999 6,血清最低检测限为0.44 mg/L,日内精密度和日间精密度良好,回收率较高。结论本法操作简便,结果准确可靠。可满足临床快速监测的需要。

湿疹喷雾剂水提物干燥工艺的研究

目的优选湿疹喷雾剂水提取物的干燥工艺。方法采用高效液相法测定苦参碱含量,确立干燥方法,进一步以含水量、粘壁情况及收集杯内干燥粉重量为考察指标,单因素考察各参数对喷雾干燥效果的影响。结果将提取液减压浓缩至相对密度为1.07,采用喷雾干燥,进风温度为170℃,流速为30%,抽气率为100%,通针速度为5次/分。结论在此工艺条件下,干燥效率高,产品质量好。

湿疹喷雾剂提取方法的研究

目的对湿疹喷雾剂提取方法进行优选,以保证制剂质量达到标准.方法选择渗漉法、回流法、浸渍法、超声法研究方中徐长卿、黄芩、紫草等六味药材的最优提取方法,并运用正交设计试验法优选工艺条件,采用高效液相色谱法测定方中丹皮酚、黄芩苷的含量,以此作为评价工艺的指标.结果回流法提取徐长卿、黄芩等五味药材最优工艺条件为:不浸泡,加醇量6倍、4倍,回流时间60、40 min,黄芩苷、丹皮酚浸出量分别可达401.86、97.93 mg,而渗漉法的最优工艺条件为:粉碎度20目,渗漉速度3 mL/min,浸渍时间24 h,加醇量为10倍,黄芩苷、丹皮酚浸出量分别可达332.04、92.27 mg.紫草单独用超声法提取,40 min时吸光值最大,为0.676;而用浸渍法则需36 h吸光值才达到最大,为0.492.结论徐长卿、黄芩等五味药材采用回流法较渗漉法提取效率高,紫草采用超声法较浸渍法提取效率高.表9。

湿疹喷雾剂提取方法的研究

目的 对湿疹喷雾剂提取方法进行优选，以保证制剂质量达到标准。方法 选择渗漉法、回流法、浸渍法、超声法研究方中徐长卿、黄芩、紫草等六味药材的最优提取方法，并运用正交设计试验法优选工艺条件，采用高效液相色谱法测定方中丹皮酚、黄芩苷的含量，以此作为评价工艺的指标。结果 回流法提取徐长卿、黄芩等五味药材最优工艺条件为：不浸泡，加醇量6倍、4倍．回流时间60min和40min，黄芩苷、丹皮酚浸出量分别可达401．86、97．93mg；而渗漉法的最优工艺条件为：粉碎度20目，渗漉速度3mL／min，浸渍时间24h．加醇量为10倍，黄芩苷、丹皮酚浸出量分别可达332．04、92．27mg。紫草单独用超声法提取，加min时吸光值最大，为0．676；而用浸渍法则需36h吸光值才达到最大，为0．492。结论 徐长卿、黄芩等五味药材采用回流法较渗漉法提取效率高，紫草采用超声法较浸渍法提取效率高。

单步萃取-HPLC法同时测定人血清中3种抗癫痫药浓度

目的:建立以单步萃取-高效液相色谱法同时测定人血清中卡马西平、苯妥英钠、苯巴比妥浓度的方法。方法:血清样品采用二氯甲烷单步萃取后进样测定,色谱柱为Ultimate XB-C18,流动相为甲醇-水(70∶30),流速为1 mL·min-1,检测波长为240nm,柱温为25℃,内标为2-氨基-2-氯-5-硝基二苯酮。结果:卡马西平、苯妥英钠、苯巴比妥血药浓度分别在1.33～33.25 mg·L-1(r=0.999 6)、1.96～49.0 mg·L-1(r=0.999 5)、2.88～72.0 mg·L-1(r=0.998 8)范围内线性关系良好,最低检测限分别为0.06、0.13、0.14 mg·L-1,方法回收率分别为94.0%～109.1%、93.6%～98.7%、97.0%～105.2%,日内、日间RSD均<10%。结论:本法操作简便、快速、准确、经济实用,可满足临床快速监测的需要。